| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-30页 |
| ·转基因作物及其安全管理 | 第14-15页 |
| ·转基因作物全球种植情况 | 第14页 |
| ·我国转基因作物研发情况 | 第14页 |
| ·转基因作物的安全性及标识管理制度 | 第14-15页 |
| ·转基因作物PCR 检测方法研究进展 | 第15-22页 |
| ·针对不同靶标的PCR 检测策略 | 第17-19页 |
| ·定性PCR 检测技术 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR 方法 | 第20-22页 |
| ·植物内标准基因的应用 | 第22-25页 |
| ·植物内标准基因的作用 | 第22-23页 |
| ·植物内标准基因研究进展 | 第23-25页 |
| ·质粒分子作为标准物质的研究与应用 | 第25-28页 |
| ·标准物质 | 第25页 |
| ·质粒分子 | 第25-28页 |
| ·本研究的意义和内容 | 第28-30页 |
| 第二章 抗虫水稻科丰6 号定量检测标准质粒构建及试用 | 第30-41页 |
| ·材料与方法 | 第30-35页 |
| ·材料和 DNA 提取 | 第30-31页 |
| ·菌株和载体 | 第31页 |
| ·酶和试剂 | 第31页 |
| ·主要实验仪器、设备 | 第31页 |
| ·引物和探针 | 第31页 |
| ·标准质粒构建 | 第31-34页 |
| ·已知含量的科丰6 号混合样品的制备 | 第34页 |
| ·常规PCR 条件 | 第34页 |
| ·定量 PCR 条件 | 第34-35页 |
| ·结果和分析 | 第35-38页 |
| ·标准质粒构建 | 第35-36页 |
| ·PMD-KF6 作为阳性对照的定量引物特异性验证 | 第36页 |
| ·PMD-KF6 作为标准物质的标准曲线的建立 | 第36-37页 |
| ·定量方法的验证 | 第37页 |
| ·不同混合样品的实际定量结果 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·引物和探针设计 | 第38-39页 |
| ·标准质粒在科丰6 号定量检测中的应用 | 第39页 |
| ·定量分析方法的评价 | 第39-41页 |
| 第三章 抗虫水稻BT 汕优63 定量检测标准质粒构建及试用 | 第41-50页 |
| ·材料与方法 | 第41-44页 |
| ·材料和 DNA 提取 | 第41页 |
| ·菌株和载体 | 第41页 |
| ·酶和试剂 | 第41页 |
| ·主要实验仪器、设备 | 第41-42页 |
| ·引物和探针 | 第42页 |
| ·标准质粒构建 | 第42-43页 |
| ·已知含量的 BT 汕优63 混合样品的制备 | 第43-44页 |
| ·常规 PCR 条件 | 第44页 |
| ·定量 PCR 条件 | 第44页 |
| ·结果和分析 | 第44-48页 |
| ·标准质粒构建 | 第44-45页 |
| ·PMDBT63 作为阳性对照的定量引物特异性验证 | 第45页 |
| ·PMDBT63 作为标准物质的标准曲线的建立 | 第45-46页 |
| ·定量方法的验证 | 第46页 |
| ·已知浓度混合样品的定量检测 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·靶标序列的选择和引物探针设计 | 第48页 |
| ·标准曲线的建立 | 第48-49页 |
| ·定量分析方法的评价 | 第49-50页 |
| 第四章 适合四种抗虫水稻定量检测标准质粒的构建及试用 | 第50-61页 |
| ·材料与方法 | 第50-54页 |
| ·材料与 DNA 提取 | 第50页 |
| ·菌株和载体 | 第50页 |
| ·酶和试剂 | 第50-51页 |
| ·主要实验仪器、设备 | 第51页 |
| ·标准质粒构建 | 第51-53页 |
| ·构建的质粒分子作为标准物质用于转基因水稻定量检测的适用性 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-58页 |
| ·标准质粒构建 | 第54-56页 |
| ·PMD68DH 作为阳性对照的定量引物特异性验证 | 第56-57页 |
| ·PMD68DH 作为标准物质的科丰8 号和克螟稻定量方法建立及验证 | 第57-58页 |
| ·混合样品的定量分析 | 第58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| ·基因重组技术在标准质粒构建中的应用 | 第58-59页 |
| ·靶标序列的选择和引物、探针设计 | 第59-60页 |
| ·定量方法的评价 | 第60-61页 |
| 第五章 适合转基因棉通用元件、外源基因剂量测定标准质粒的构建及试用 | 第61-76页 |
| ·材料与方法 | 第61-66页 |
| ·供试材料和 DNA 提取 | 第61-62页 |
| ·菌株和载体 | 第62页 |
| ·酶和试剂 | 第62页 |
| ·主要实验仪器、设备 | 第62页 |
| ·引物和探针 | 第62页 |
| ·标准质粒构建 | 第62-63页 |
| ·我国转基因棉花样品通用元件和外源基因剂量测定 | 第63-66页 |
| ·定量条件 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-74页 |
| ·标准质粒的构建 | 第66-68页 |
| ·标准曲线的建立 | 第68-71页 |
| ·PMDMCS 作为标准物质的定量方法的可重复性和检测限 | 第71-73页 |
| ·应用 PMDMCS 作为标准物质的转基因棉外源靶标基因剂量测定 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-76页 |
| ·实时荧光定量PCR 方法在我国转基因棉花基因剂量测定中的应用 | 第74页 |
| ·定量方法的评价与分析 | 第74-76页 |
| 第六章 全文结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 附录 1 | 第88-89页 |
| 附录 2 | 第89-90页 |
| 附录 3 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 作者简历 | 第92-93页 |
