| 缩略词表 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-20页 |
| 一、端粒与端粒酶 | 第14-15页 |
| 二、端粒酶在肿瘤细胞中的功能 | 第15-17页 |
| 三、端粒酶调控机制 | 第17-20页 |
| 材料和方法 | 第20-30页 |
| 一、材料 | 第20-22页 |
| 1 质粒 | 第20页 |
| 2 引物合成及序列测定 | 第20页 |
| 3 菌株、细胞株 | 第20页 |
| 4 分子生物学工具酶 | 第20页 |
| 5 常用分子生物学试剂盒 | 第20页 |
| 6 细胞培养试剂 | 第20页 |
| 7 Western Blot 试剂 | 第20-21页 |
| 8 端粒长度检测的试剂 | 第21页 |
| 9 其它常规试剂 | 第21页 |
| 10 大型仪器 | 第21-22页 |
| 二、方法 | 第22-30页 |
| 1 质粒构建、阳性克隆的鉴定 | 第22页 |
| 2 质粒提取、酶切片断、PCR 反应产物回收 | 第22页 |
| 3 转染质粒的制备 | 第22页 |
| 4 细胞培养、冻存与转染 | 第22-23页 |
| 5 蛋白质浓度的测定 | 第23页 |
| 6 免疫印迹（Immunoblot，IB） | 第23-24页 |
| 7 端粒酶活性检测 | 第24页 |
| 8 地高辛标记法检测端粒长度 | 第24-25页 |
| 9 慢病毒（Lentivirus）的制备 | 第25-26页 |
| 10 细胞生长曲线测定 | 第26页 |
| 11 RT-PCR | 第26-27页 |
| 12 SA-β-gal 衰老检测 | 第27页 |
| 13 PCR 构建点突变体 | 第27-28页 |
| 14 shRNA 载体的构建 | 第28页 |
| 15 Hoechst 染色计数凋亡 | 第28页 |
| 16 免疫荧光 | 第28-29页 |
| 17 平板克隆形成实验 | 第29-30页 |
| 结果与分析 | 第30-45页 |
| 一、hTERT 核仁定位分布调控与正常条件下的端粒酶功能无关 | 第31-36页 |
| 1 hTERT 核仁定位调控对端粒酶活性的影响 | 第31-34页 |
| 2 hTERT 核仁定位调控对端粒酶稳定端粒长度的影响 | 第34页 |
| 3 hTERT 核仁定位调控对端粒酶永生化功能的影响 | 第34-36页 |
| 二、DNA 损伤诱导的hTERT 核仁聚集的结构基础及调控机制 | 第36-45页 |
| ·诱导hTERT 核仁聚集是肿瘤细胞特异针对染色体双链DNA 损伤的一种细胞学反应 | 第36页 |
| ·DNA 损伤诱导的hTERT 核仁聚集在肿瘤细胞中具有普遍性 | 第36-38页 |
| ·hTERT 分子中介导其DNA 损伤诱导的核仁定位的决定性元件的鉴定 | 第38-40页 |
| ·染色体双链DNA 损伤诱导的hTERT 核仁聚集是通过ATM 途径介导的 | 第40-42页 |
| ·hTERT 分子中存在DNA 损伤诱导的核仁聚集的反应性调控元件 | 第42-45页 |
| 三、hTERT 核仁聚集在肿瘤细胞DNA 损伤反应中的细胞生物学意义 | 第45-57页 |
| ·hTERT 核仁聚集在DNA 双链断裂（DSBs）中的生物学意义 | 第45-51页 |
| ·DNA 损伤诱导的肿瘤细胞中hTERT 的核仁聚集与其蛋白稳定性及端粒酶活性无关 | 第45-47页 |
| ·hTERT 核仁聚集抑制DNA 损伤灶的形成 | 第47页 |
| ·hTERT 核仁聚集与DNA 损伤诱导的细胞死亡的关系 | 第47-51页 |
| ·hTERT 的核仁聚集与端粒损伤 | 第51-55页 |
| ·特定形式的端粒损伤可以造成hTERT 的核仁定位 | 第51-53页 |
| ·hTERT 核仁聚集抑制端粒损伤发生时端粒损伤灶（TIFs）的形成 | 第53-55页 |
| ·降低内源性hTERT 的表达量可激活肿瘤细胞中的DNA 损伤反应 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 文献综述 | 第69-79页 |
| 个人简历 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
