中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
缩略语表 | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-42页 |
·锥虫的形态特征 | 第14-17页 |
·表膜(pellicle) | 第15页 |
·细胞核(nucleus) | 第15-16页 |
·动基体(kinetoplast) | 第16页 |
·鞭毛(flagellum)和波动膜(undulating membrane) | 第16-17页 |
·表面变异糖蛋白(variant surface glycoprotein 简称VSG) | 第17页 |
·锥虫的生活史 | 第17-18页 |
·鱼类锥虫的同质异形现象(pleomorphism) | 第18-19页 |
·锥虫形态学研究历史及分类地位 | 第19-22页 |
·分子系统发育及其方法 | 第22-28页 |
·分子系统学诞生的背景 | 第22-23页 |
·分子系统发育学的分子标记 | 第23-24页 |
·分子系统发育学的研究方法 | 第24-26页 |
·系统发育推断方法 | 第26-28页 |
·锥虫分子系统发育的研究进展 | 第28-34页 |
·锥虫的起源 | 第28-30页 |
·锥虫的系统发育方式 | 第30-31页 |
·锥虫的进化 | 第31-34页 |
·鱼类锥虫分子系统发育研究现状 | 第34-38页 |
·国内鱼类锥虫的研究现状 | 第38页 |
·本研究的目的和意义 | 第38-42页 |
第二章 鱼类锥虫的分离 | 第42-56页 |
第一节 用Percoll 试剂和DEAE-纤维素层析柱分离纯化鳝锥虫 | 第42-50页 |
·前言 | 第42-43页 |
·材料与方法 | 第43-44页 |
·实验鱼 | 第43页 |
·锥虫稀释缓冲液(PGSS) | 第43页 |
·Percoll 分离液 | 第43页 |
·层析洗脱缓冲液(PSG) | 第43页 |
·含虫血样品制备 | 第43页 |
·离心 | 第43-44页 |
·过柱、洗脱 | 第44页 |
·红细胞和锥虫计数 | 第44页 |
·结果 | 第44-45页 |
·不同转速、不同时间离心对红细胞去除和锥虫存留的影响 | 第44-45页 |
·用Percoll 试剂和DEAE-纤维素52 从自然感染鳝锥虫的黄鳝血液中分离锥虫 | 第45页 |
·镜检结果 | 第45页 |
·分离锥虫回收率 | 第45页 |
·过柱锥虫回收率 | 第45页 |
·讨论 | 第45-50页 |
第二节 重组气溶素分离鱼类锥虫 | 第50-56页 |
·前言 | 第50-51页 |
·材料与方法 | 第51-52页 |
·实验鱼 | 第51页 |
·锥虫稀释缓冲液(PGSS) | 第51页 |
·含虫血样品制备 | 第51页 |
·离心 | 第51-52页 |
·重组气溶素蛋白的制备 | 第52页 |
·结果 | 第52页 |
·讨论 | 第52-56页 |
第三章 形态学再描述鳢锥虫(Trypanosoma ophiocephali Chen,1964)和在沙塘鳢的新记录 | 第56-68页 |
·前言 | 第56页 |
·材料与方法 | 第56-57页 |
·结果 | 第57-59页 |
·讨论 | 第59-68页 |
第四章 用形态学和分子数据再描述鳜锥虫(Trypanosoma siniperca Chang,1964) | 第68-83页 |
·前言 | 第68页 |
·材料与方法 | 第68-72页 |
·样品采集 | 第68-69页 |
·薄血片制作 | 第69页 |
·虫体纯化 | 第69页 |
·DNA 提取 | 第69-70页 |
·185 rRNA 基因片段的扩增及回收 | 第70页 |
·PCR 产物的连接和转化 | 第70-71页 |
·阳性克隆检测和测序 | 第71页 |
·185 rDNA 序列分析和排序 | 第71-72页 |
·系统发育关系分析 | 第72页 |
·结果 | 第72-74页 |
·形态学观察及种的鉴定 | 第72-73页 |
·序列特征和系统发育分析 | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-83页 |
第五章 形态学和分子数据厘定黄颡锥虫(Trypanosoma pseudobagri Dogiel et Achmerov, 1959) | 第83-100页 |
·前言 | 第83-84页 |
·材料与方法 | 第84-86页 |
·样品采集 | 第84页 |
·薄血片制作 | 第84-85页 |
·虫体纯化 | 第85页 |
·DNA 的提取、185 rDNA 序列的扩增和测定 | 第85页 |
·185 rDNA 序列分析和排序 | 第85-86页 |
·系统发育关系分析 | 第86页 |
·结果 | 第86-89页 |
·分类描述 | 第86-88页 |
·分子鉴定 | 第88-89页 |
·序列分析 | 第88-89页 |
·系统发育分析 | 第89页 |
·讨论 | 第89-100页 |
第六章 黄颡锥虫(Trypanosoma pseudobagri)超微结构的研究 | 第100-115页 |
·前言 | 第100-101页 |
·材料与方法 | 第101-102页 |
·样本收集 | 第101页 |
·薄血片制作 | 第101页 |
·虫体纯化 | 第101页 |
·电镜样品制作 | 第101-102页 |
·结果 | 第102-104页 |
·光镜观察 | 第102页 |
·电镜观察 | 第102-104页 |
·表膜、鞭毛及相关附属结构 | 第102-103页 |
·动基体-线粒体 | 第103页 |
·细胞核 | 第103-104页 |
·细胞质内含物 | 第104页 |
·讨论 | 第104-115页 |
第七章 鱼类锥虫的分子系统发育研究 | 第115-134页 |
·前言 | 第115-116页 |
·材料与方法 | 第116-119页 |
·样品采集 | 第116页 |
·薄血片制作和形态学观察 | 第116-117页 |
·虫体纯化及基因组DNA 的提取 | 第117页 |
·18S rRNA 基因序列的扩增、纯化及测序 | 第117页 |
·18S rRNA 基因序列分析和比对 | 第117-118页 |
·系统发育分析 | 第118-119页 |
·结果 | 第119-123页 |
·形态学描述 | 第119页 |
·18S rRNA 基因部分序列 | 第119-123页 |
·系统发育分析 | 第123页 |
·讨论 | 第123-134页 |
·形态学鉴定 | 第124页 |
·鱼类锥虫的系统发育关系 | 第124-125页 |
·中国淡水鱼类锥虫的系统发育位置 | 第125-126页 |
·宿主特异性问题 | 第126-134页 |
参考文献 | 第134-150页 |
附录 | 第150-152页 |
致谢 | 第152-153页 |