| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 新型胰岛素样生长因子—1基因的构建 | 第13-32页 |
| 1 引言 | 第13-14页 |
| 2 材料和方法 | 第14-24页 |
| ·材料 | 第14-17页 |
| ·质粒和宿主菌 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-16页 |
| ·培养基及溶液配制 | 第16-17页 |
| ·方法 | 第17-24页 |
| ·IGF-1D基因引物的设计与合成 | 第17页 |
| ·IGF-1D基因的PCR扩增 | 第17-19页 |
| ·扩增片段回收 | 第19-20页 |
| ·扩增片段的双酶切 | 第20页 |
| ·连接用载体的制备 | 第20页 |
| ·载体与IGF-1D cDNA片段的连接 | 第20-21页 |
| ·连接产物的转化 | 第21-22页 |
| ·重组质粒的筛选和初步鉴定 | 第22-24页 |
| ·重组质粒中插入片段的序列测定及结果分析 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-30页 |
| ·PCR扩增产物的鉴定 | 第24-25页 |
| ·克隆载体的构建 | 第25-26页 |
| ·重组原核表达质粒的构建 | 第26-27页 |
| ·IGF-1D cDNA序列分析 | 第27-29页 |
| ·蛋白序列的三维结构分析 | 第29-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第二章 新型胰岛素样生长因子-1基因的原核表达研究 | 第32-49页 |
| 1 引言 | 第32-33页 |
| 2 材料和方法 | 第33-37页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·宿主菌 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-37页 |
| ·质粒转化BL21宿主菌 | 第33页 |
| ·融合蛋白的诱导表达和SDS-PAGE电泳分析 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白表达条件的探索 | 第34-35页 |
| ·表达蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·IGF-1D生物学活性检测 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-44页 |
| ·IGF-1D的诱导表达和SDS-PAGE电泳分析 | 第37-38页 |
| ·IGF-1D表达条件的探索 | 第38-41页 |
| ·不同IPTG浓度对蛋白表达的影响 | 第38-39页 |
| ·不同发酵时间对蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| ·不同发酵温度对蛋白表达的影响 | 第40-41页 |
| ·IGF-1D性质检测 | 第41-42页 |
| ·IGF-1D蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·IGF-1D蛋白活性检测 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| ·IGF-1D蛋白的表达 | 第44页 |
| ·截短型IGF-1表达研究 | 第44-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 第三章 文献综述 | 第49-81页 |
| 胰岛素样生长因子-1研究进展 | 第49-75页 |
| 1 引言 | 第49-50页 |
| 2 IGFS的来源和组成 | 第50-56页 |
| ·IGFs的来源 | 第50-51页 |
| ·IGFs系统的组成 | 第51-56页 |
| ·IGF-1和IGF-2 | 第51-53页 |
| ·IGFs受体 | 第53-55页 |
| ·IGFs结合蛋白 | 第55-56页 |
| 3 IGF-1的结构及生物学作用 | 第56-72页 |
| ·IGF-1的结构 | 第56-60页 |
| ·IGF-1的一级结构 | 第56-58页 |
| ·IGF-1的三维结构 | 第58-60页 |
| ·截短型IGF-1的结构 | 第60页 |
| ·IGF-1的作用 | 第60-72页 |
| ·IGF-1的生物学效应 | 第60-67页 |
| ·IGF-1的临床应用 | 第67-71页 |
| ·pIGF-1在养猪业中的应用 | 第71-72页 |
| 4 IGF-1结构与功能的关系 | 第72-73页 |
| 5 影响IGF-1表达的因素 | 第73-74页 |
| ·激素 | 第73页 |
| ·营养水平 | 第73页 |
| ·发育水平 | 第73-74页 |
| 6 IGF-1的应用前景 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 在读硕士期间发表论文 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83页 |