| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| ·番茄不孕病毒的侵染特性 | 第14-15页 |
| ·番茄不孕病毒结构、基因组功能及其形态 | 第15-16页 |
| ·番茄不孕病毒的结构和基因组功能 | 第15-16页 |
| ·番茄不孕病毒的形态 | 第16页 |
| ·番茄不孕病毒全序列测定及功能蛋白研究 | 第16-18页 |
| ·全序列测定 | 第16-17页 |
| ·主要功能蛋白研究 | 第17-18页 |
| ·番茄不孕病毒突变、重组研究进展 | 第18-20页 |
| ·番茄不孕病毒的突变研究 | 第18-19页 |
| ·番茄不孕病毒的重组与突变研究 | 第19-20页 |
| ·番茄不孕病毒侵染性克隆构建研究进展 | 第20-21页 |
| ·基因沉默和基因沉默抑制子 | 第21-22页 |
| ·本文的研究目的与意义 | 第22-23页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 番茄不孕病毒BJ 株系生物检测和全基因组序列测定 | 第23-40页 |
| ·TAV-BJ 生物学检测的材料与方法 | 第23-26页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·病理学症状观察 | 第23-24页 |
| ·双链RNA 大量抽提 | 第24页 |
| ·病毒粒子提取 | 第24-25页 |
| ·从病毒粒子中提取基因组 | 第25-26页 |
| ·Northern 杂交 | 第26页 |
| ·TAV-BJ 全基因组序列测定的材料与方法 | 第26-33页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·载体与试剂 | 第27-28页 |
| ·毒源 | 第28页 |
| ·总RNA 提取 | 第28页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第28-30页 |
| ·PCR 产物回收 | 第30页 |
| ·DNA 片段的连接 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的转化 | 第31页 |
| ·重组质粒筛选 | 第31-32页 |
| ·酶切鉴定阳性质粒 | 第32页 |
| ·PCR 鉴定阳性质粒 | 第32页 |
| ·重组克隆序列测定与拼接 | 第32-33页 |
| ·全序列分析 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-39页 |
| ·TAV-BJ 病理学症状观察结果 | 第33-35页 |
| ·TAV-BJ 的分子检测结果 | 第35页 |
| ·TAV-BJ 全序列克隆结果 | 第35-36页 |
| ·全序列分析和同源性比较 | 第36-39页 |
| ·小结与讨论 | 第39-40页 |
| 第三章 番茄不孕病毒BJ 株系侵染性克隆构建 | 第40-54页 |
| ·材料与方法 | 第41-48页 |
| ·毒源、酶和试剂 | 第41页 |
| ·引物设计 | 第41-43页 |
| ·侵染性克隆质粒构建过程 | 第43-45页 |
| ·体外转录 | 第45-47页 |
| ·接种 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-52页 |
| ·侵染性克隆质粒构建结果 | 第48-50页 |
| ·体外转录产物接种心叶烟后的症状反应 | 第50-52页 |
| ·小结与讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 番茄不孕病毒 BJ 株系 3a 蛋白基因沉默抑制功能初步确定 | 第54-66页 |
| ·TAV RNA3 嵌合体侵染性克隆的材料与方法 | 第55-58页 |
| ·毒源、酶与试剂 | 第55页 |
| ·重叠 PCR 引物设计 | 第55-56页 |
| ·重叠PCR 扩增 | 第56-57页 |
| ·侵染性克隆质粒构建 | 第57-58页 |
| ·体外转录与重组病毒接种 | 第58页 |
| ·瞬时表达-农杆菌共浸润实验的材料与方法 | 第58-61页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·瞬时表达载体构建 | 第58-59页 |
| ·农杆菌电转化感受态的制备 | 第59-60页 |
| ·瞬时表达载体的农杆菌转化 | 第60页 |
| ·农杆菌的共浸润 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-64页 |
| ·TAV RNA3 嵌合体侵染性克隆质粒构建结果 | 第61-62页 |
| ·嵌合重组病毒接种心叶烟后的症状反应 | 第62页 |
| ·瞬时表达载体构建结果 | 第62-63页 |
| ·瞬时表达载体影响转GFP 基因本生烟16c 的GFP 沉默成像结果 | 第63-64页 |
| ·小结与讨论 | 第64-66页 |
| 结论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 附录：重要溶液的配制 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士期间的研究成果 | 第76页 |
