| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 略缩语 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-18页 |
| 1 高致病性禽流感简介 | 第12-13页 |
| 2 流感疫苗研制技术 | 第13-14页 |
| 3 禽流感疫苗研制进展 | 第14-15页 |
| 4 本实验研制的新型重组禽流感疫苗 | 第15-16页 |
| 5 流感疫苗的检定内容和方法 | 第16-18页 |
| 第二章 实验设计方案 | 第18-20页 |
| 1 研究意义及目的 | 第18页 |
| 2 研究内容 | 第18-20页 |
| 第三章 疫苗毒种遗传稳定性研究 | 第20-31页 |
| 1 材料与试剂 | 第20-21页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·试剂配制 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-27页 |
| ·疫苗毒种扩增用细胞基质BmN 细胞的复苏及传代培养 | 第21-22页 |
| ·蚀斑试验测定毒种感染滴度 | 第22-23页 |
| ·疫苗毒种的传代 | 第23页 |
| ·病毒基因组的提取 | 第23页 |
| ·病毒基因组中HA 序列的鉴定 | 第23-27页 |
| 3 结果 | 第27-29页 |
| ·基因组鉴定 | 第27页 |
| ·PCR 扩增GP-HA 基因 | 第27-28页 |
| ·双酶切电泳图 | 第28-29页 |
| ·测序结果 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第四章 疫苗中HA 蛋白的鉴定 | 第31-46页 |
| 1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·主要试剂的配置 | 第31-32页 |
| 2. 方法 | 第32-36页 |
| ·疫苗中总蛋白的提取 | 第32-33页 |
| ·双向电泳 | 第33-35页 |
| ·质谱样品的制备 | 第35-36页 |
| ·MALDI-TOF-MS 分析 | 第36页 |
| 3. 结果 | 第36-45页 |
| ·双向电泳结果 | 第36-37页 |
| ·质谱分析结果 | 第37-45页 |
| 4. 讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 疫苗HA 活性测定 | 第46-49页 |
| 1 材料与试剂 | 第46页 |
| ·材料 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·主要试剂的配置 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| ·鸡血红细胞的收集 | 第46-47页 |
| ·鸡血红细胞的清洗及10%鸡血红细胞制备 | 第47页 |
| ·血凝实验 | 第47页 |
| ·HA 活性单位定义 | 第47-48页 |
| 3 结果 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 第六章 疫苗Western Blotting 鉴定 | 第49-54页 |
| 1 材料与试剂 | 第49-51页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·主要试剂的配置 | 第49-51页 |
| 2. 方法 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第51页 |
| ·Western Blotting | 第51-52页 |
| 3. 结果 | 第52-53页 |
| ·SDS-PAGE 结果 | 第52页 |
| ·Western Blotting 鉴定结果 | 第52-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-54页 |
| 第七章 HA 定量方法研究 | 第54-64页 |
| 1 材料与试剂 | 第54-55页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·试剂 | 第54页 |
| ·主要试剂的配置 | 第54-55页 |
| 2. 方法 | 第55-59页 |
| ·间接ELISA 法测定疫苗HA 含量 | 第55-58页 |
| ·DOT BLOT 法测定疫苗中HA 含量 | 第58-59页 |
| ·SRID 法测定疫苗中HA 含量 | 第59页 |
| 3. 结果 | 第59-62页 |
| ·棋盘滴定结果 | 第59-61页 |
| ·DOT BLOT 测定结果 | 第61-62页 |
| ·单向免疫琼脂扩散结果 | 第62页 |
| 4. 讨论 | 第62-64页 |
| 第八章 疫苗的透射电镜观察 | 第64-67页 |
| 1 材料和试剂 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·试剂 | 第64页 |
| ·主要试剂的配置 | 第64-65页 |
| 2 方法 | 第65页 |
| ·电镜样品的制备 | 第65页 |
| ·透射电镜观察 | 第65页 |
| 3 结果 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72页 |