中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-36页 |
1 小麦条锈病 | 第13-15页 |
·小麦条锈病的起源与分布 | 第13页 |
·小麦条锈病的研究现状 | 第13-15页 |
2 植物抗病的分子生物学研究 | 第15-27页 |
·植物抗病机制 | 第15-17页 |
·植物抗病基因的类型、结构与功能 | 第17-21页 |
·植物抗病基因的类型 | 第17页 |
·植物抗病基因的结构与功能 | 第17-21页 |
·植物抗病基因克隆的方法 | 第21-24页 |
·图位克隆法 | 第21-22页 |
·转座子标签法(Transposon tagging) | 第22-23页 |
·抗病基因同源序列法 | 第23-24页 |
·mRNA差异显示 | 第24页 |
·植物防卫基因 | 第24-27页 |
·植物防卫基因 | 第24-25页 |
·已克隆的防卫反应基因 | 第25页 |
·防卫反应基因的结构特点 | 第25页 |
·防卫反应基因的表达,调控 | 第25-27页 |
3 病程相关蛋白与植物抗病性的研究进展 | 第27-34页 |
·几丁质酶与植物的抗病性 | 第28-31页 |
·β-1,3-葡聚糖酶与植物的抗病性 | 第31-34页 |
·β-1,3-葡聚糖酶在体外的抑菌作用 | 第31-32页 |
·β-1,3-葡聚糖酶的诱导及其活性与植物的抗病性 | 第32-33页 |
·转入β-1,3-葡聚糖酶基因植物的抗病性 | 第33页 |
·β-1,3-葡聚糖酶与几丁质酶的协同性 | 第33-34页 |
4 本研究的目的意义 | 第34-36页 |
第二章 小麦叶片总RNA的提取 | 第36-41页 |
1 材料与方法 | 第36-39页 |
·生化试剂 | 第36-37页 |
·实验仪器 | 第37页 |
·供试小麦品种及材料准备 | 第37页 |
·小麦叶片总RNA 的提取与纯化 | 第37-39页 |
·小麦叶片总RNA 的提取 | 第37-38页 |
·小麦叶片总RNA 的纯化 | 第38页 |
·小麦叶片总RNA 的纯度测定 | 第38页 |
·小麦叶片总RNA 的完整性检测 | 第38-39页 |
2 结果与分析 | 第39-40页 |
·总RNA 的完整性及纯度检测 | 第39-40页 |
·1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测结果 | 第39-40页 |
·甲醛变性电泳检测结果 | 第40页 |
3 结论与讨论 | 第40-41页 |
第三章 小麦受条锈菌侵染后防卫基因的表达特征 | 第41-52页 |
1 材料与方法 | 第41-44页 |
·仪器 | 第41页 |
·试剂 | 第41-42页 |
·供试菌种和小麦品种 | 第42页 |
·接种和培养 | 第42页 |
·取样及取样量 | 第42页 |
·取样时间 | 第42页 |
·不同组合和不同取样时间小麦叶片总RNA 的提取 | 第42页 |
·Northern blotting 分析 | 第42-44页 |
·cDNA 杂交探针的制备 | 第43页 |
·探针的回收 | 第43页 |
·RNA 甲醛变性电泳 | 第43页 |
·RNA 印迹转移 | 第43-44页 |
·杂交 | 第44页 |
·洗膜 | 第44页 |
·杂交显色 | 第44页 |
2 结果与分析 | 第44-49页 |
·cDNA 杂交探针的检测结果 | 第44-45页 |
·Northern 杂交结果 | 第45-49页 |
·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-1(PR-1homologue)防卫基因在转录水平上的表达特征 | 第45-46页 |
·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-2(β-1,3-glucanase)防卫基因在转录水平上的表达特征 | 第46-47页 |
·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-3(chitinase)防卫基因在转录水平上的表达特征 | 第47-48页 |
·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-5(thaumatin)防卫基因在转录水平上的表达特征 | 第48-49页 |
3 结论与讨论 | 第49-52页 |
第四章 β-1,3-葡聚糖酶基因全长CDNA的克隆及其表达特征 | 第52-68页 |
1 材料与方法 | 第52-59页 |
·用于全长cDNA 克隆的小麦材料 | 第52页 |
·生化试剂 | 第52-53页 |
·菌株 | 第53页 |
·材料准备 | 第53页 |
·小麦叶片总RNA 的提取 | 第53页 |
·RT-PCR 克隆-β1,3-葡聚糖酶基因 | 第53-55页 |
·第一链cDNA 的合成 | 第53页 |
·RT-PCR 扩增β-1,3-葡聚糖酶基因 | 第53-54页 |
·PCR 扩增产物的回收 | 第54页 |
·PCR 产物的载体连接反应 | 第54页 |
·感受态细胞的制备及连接产物的转化 | 第54页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第54-55页 |
·cDNA 片段的测序及序列分析 | 第55页 |
·全长cDNA 的克隆 | 第55-58页 |
·5’RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 与3’RACE 特异引物设计 | 第55页 |
·3’RACE | 第55-56页 |
·5’RACE | 第56-57页 |
·RACE产物克隆测序及序列分析 | 第57-58页 |
·全长cDNA 的Northern 杂交分析 | 第58-59页 |
·试剂 | 第58页 |
·小麦材料的准备及总RNA 的提取 | 第58页 |
·Northern 杂交方法 | 第58-59页 |
2 结果与分析 | 第59-66页 |
·RT-PCR 扩增-β1,3-葡聚糖酶基因 | 第59页 |
·cDNA 片段的核酸序列分析 | 第59-61页 |
·5’RACE 与3’RACE | 第61-62页 |
·全长cDNA 序列及序列分析 | 第62-64页 |
·核酸序列分析及推导的氨基酸序列分析 | 第64-65页 |
·全长cDNA DQ090946 的Northern 杂交 | 第65-66页 |
3 结论与讨论 | 第66-68页 |
第五章 结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
个人简介 | 第79页 |