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小麦受条锈菌侵染后防卫基因的表达特征及其克隆

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-13页
第一章 文献综述第13-36页
 1 小麦条锈病第13-15页
   ·小麦条锈病的起源与分布第13页
   ·小麦条锈病的研究现状第13-15页
 2 植物抗病的分子生物学研究第15-27页
   ·植物抗病机制第15-17页
   ·植物抗病基因的类型、结构与功能第17-21页
     ·植物抗病基因的类型第17页
     ·植物抗病基因的结构与功能第17-21页
   ·植物抗病基因克隆的方法第21-24页
     ·图位克隆法第21-22页
     ·转座子标签法(Transposon tagging)第22-23页
     ·抗病基因同源序列法第23-24页
     ·mRNA差异显示第24页
   ·植物防卫基因第24-27页
     ·植物防卫基因第24-25页
     ·已克隆的防卫反应基因第25页
     ·防卫反应基因的结构特点第25页
     ·防卫反应基因的表达,调控第25-27页
 3 病程相关蛋白与植物抗病性的研究进展第27-34页
   ·几丁质酶与植物的抗病性第28-31页
   ·β-1,3-葡聚糖酶与植物的抗病性第31-34页
     ·β-1,3-葡聚糖酶在体外的抑菌作用第31-32页
     ·β-1,3-葡聚糖酶的诱导及其活性与植物的抗病性第32-33页
     ·转入β-1,3-葡聚糖酶基因植物的抗病性第33页
     ·β-1,3-葡聚糖酶与几丁质酶的协同性第33-34页
 4 本研究的目的意义第34-36页
第二章 小麦叶片总RNA的提取第36-41页
 1 材料与方法第36-39页
   ·生化试剂第36-37页
   ·实验仪器第37页
   ·供试小麦品种及材料准备第37页
   ·小麦叶片总RNA 的提取与纯化第37-39页
     ·小麦叶片总RNA 的提取第37-38页
     ·小麦叶片总RNA 的纯化第38页
     ·小麦叶片总RNA 的纯度测定第38页
     ·小麦叶片总RNA 的完整性检测第38-39页
 2 结果与分析第39-40页
   ·总RNA 的完整性及纯度检测第39-40页
     ·1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测结果第39-40页
     ·甲醛变性电泳检测结果第40页
 3 结论与讨论第40-41页
第三章 小麦受条锈菌侵染后防卫基因的表达特征第41-52页
 1 材料与方法第41-44页
   ·仪器第41页
   ·试剂第41-42页
   ·供试菌种和小麦品种第42页
   ·接种和培养第42页
   ·取样及取样量第42页
   ·取样时间第42页
   ·不同组合和不同取样时间小麦叶片总RNA 的提取第42页
   ·Northern blotting 分析第42-44页
     ·cDNA 杂交探针的制备第43页
     ·探针的回收第43页
     ·RNA 甲醛变性电泳第43页
     ·RNA 印迹转移第43-44页
     ·杂交第44页
     ·洗膜第44页
     ·杂交显色第44页
 2 结果与分析第44-49页
   ·cDNA 杂交探针的检测结果第44-45页
   ·Northern 杂交结果第45-49页
     ·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-1(PR-1homologue)防卫基因在转录水平上的表达特征第45-46页
     ·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-2(β-1,3-glucanase)防卫基因在转录水平上的表达特征第46-47页
     ·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-3(chitinase)防卫基因在转录水平上的表达特征第47-48页
     ·受条锈菌侵染后小麦叶片中PR-5(thaumatin)防卫基因在转录水平上的表达特征第48-49页
 3 结论与讨论第49-52页
第四章 β-1,3-葡聚糖酶基因全长CDNA的克隆及其表达特征第52-68页
 1 材料与方法第52-59页
   ·用于全长cDNA 克隆的小麦材料第52页
   ·生化试剂第52-53页
   ·菌株第53页
   ·材料准备第53页
   ·小麦叶片总RNA 的提取第53页
   ·RT-PCR 克隆-β1,3-葡聚糖酶基因第53-55页
     ·第一链cDNA 的合成第53页
     ·RT-PCR 扩增β-1,3-葡聚糖酶基因第53-54页
     ·PCR 扩增产物的回收第54页
     ·PCR 产物的载体连接反应第54页
     ·感受态细胞的制备及连接产物的转化第54页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第54-55页
     ·cDNA 片段的测序及序列分析第55页
   ·全长cDNA 的克隆第55-58页
     ·5’RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 与3’RACE 特异引物设计第55页
     ·3’RACE第55-56页
     ·5’RACE第56-57页
     ·RACE产物克隆测序及序列分析第57-58页
   ·全长cDNA 的Northern 杂交分析第58-59页
     ·试剂第58页
     ·小麦材料的准备及总RNA 的提取第58页
     ·Northern 杂交方法第58-59页
 2 结果与分析第59-66页
   ·RT-PCR 扩增-β1,3-葡聚糖酶基因第59页
   ·cDNA 片段的核酸序列分析第59-61页
   ·5’RACE 与3’RACE第61-62页
   ·全长cDNA 序列及序列分析第62-64页
   ·核酸序列分析及推导的氨基酸序列分析第64-65页
   ·全长cDNA DQ090946 的Northern 杂交第65-66页
 3 结论与讨论第66-68页
第五章 结论第68-70页
参考文献第70-78页
致谢第78-79页
个人简介第79页

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