| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-14页 |
| ·背景与意义 | 第11页 |
| ·scFv的研究进展 | 第11-12页 |
| ·scFv的生物学活性 | 第11-12页 |
| ·scFv在AD治疗中的应用 | 第12页 |
| ·本实验的创新点和研究策略 | 第12-14页 |
| ·本实验的创新点 | 第12-13页 |
| ·本实验的研究策略 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-30页 |
| ·材料 | 第14-19页 |
| ·细胞、载体和宿主菌 | 第14页 |
| ·具酶与试剂盒 | 第14页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要溶液的配制 | 第16-18页 |
| ·DNA合成和测序 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-30页 |
| ·技术路线 | 第19页 |
| ·单链抗体scFv片段的构建 | 第19-21页 |
| ·用原核细胞系统验证单链抗体的可表达性 | 第21-26页 |
| ·哺乳动物细胞表达及细胞株的建立 | 第26-29页 |
| ·稳定表达单链抗体的生物学活性 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-44页 |
| ·单链抗体scFv片段的拼接 | 第30-31页 |
| ·原核表达体系验证单链抗体的可表达性 | 第31-36页 |
| ·pET30a(+)-scFv原核表达载体的构建及鉴定 | 第31-32页 |
| ·单链抗体原核表达 | 第32-33页 |
| ·原核表达单链抗体的纯化及鉴定 | 第33-36页 |
| ·单链抗体哺乳动物细胞表达及细胞株的建立 | 第36-40页 |
| ·单链抗体真核表达质粒的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| ·筛选培养基中潮霉素浓度的选择 | 第37页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第37-39页 |
| ·稳定表达单链抗体细胞株的筛选及建立 | 第39-40页 |
| ·细胞株稳定表达单链抗体生物学活性、性质及功能鉴定 | 第40-44页 |
| ·间接ELISA分析单链抗体识别抗原的能力 | 第40-41页 |
| ·斑点印迹分析单链抗体识别抗原的能力 | 第41-42页 |
| ·单链抗体对Aβ42寡聚体细胞毒性的抑制 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| ·单链抗体基因的构建 | 第44-45页 |
| ·scFv结构形式 | 第44-45页 |
| ·Linker的选择 | 第45页 |
| ·单链抗体识别抗原能力的实验结果比较 | 第45-46页 |
| ·单链抗体真核表达体系与原核表达体系的比较 | 第46-48页 |
| 5结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 附录A | 第52-54页 |
| 作者简历 | 第54-56页 |
| 学位论文数据集 | 第56页 |