| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·DEK蛋白 | 第10页 |
| ·端粒酶 | 第10-11页 |
| ·端粒酶的作用 | 第10-11页 |
| ·端粒酶活性的检测方法 | 第11页 |
| ·RNA干扰 | 第11-12页 |
| ·RNA干扰的机制 | 第11-12页 |
| ·shRNA载体 | 第12页 |
| ·DEK与宫颈癌的关系 | 第12页 |
| ·DEK与肿瘤相关信号通路 | 第12-13页 |
| ·DEK蛋白与端粒酶作用机制的设想 | 第13-14页 |
| ·研究的意义 | 第14页 |
| ·研究目的和内容 | 第14-15页 |
| ·研究目的 | 第14-15页 |
| ·研究内容 | 第15页 |
| ·技术路线 | 第15-16页 |
| 2 实验材料 | 第16-19页 |
| ·细胞培养相关材料 | 第16页 |
| ·细菌培养相关材料 | 第16页 |
| ·质粒 | 第16-17页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第17-19页 |
| 3 实验方法 | 第19-32页 |
| ·载体的扩增 | 第19-22页 |
| ·HeLa细胞的复苏、培养与冻存 | 第22-23页 |
| ·转染Hela细胞 | 第23页 |
| ·细胞中DEK蛋白水平的检测(1)——Western blot | 第23-26页 |
| ·细胞中DEK蛋白水平的检测(2)——免疫组化 | 第26-27页 |
| ·免疫组化条件的确定 | 第26-27页 |
| ·转染Hela细胞 | 第27页 |
| ·免疫组化检验处理过细胞的DEK蛋白表达情况 | 第27页 |
| ·端粒酶活性的测定 | 第27-28页 |
| ·细胞端粒酶或组织标本端粒酶的提取 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28页 |
| ·银染 | 第28页 |
| ·检测mRNA水平基因表达——荧光定量PCR | 第28-32页 |
| ·细胞RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR合成cDNA第一条链 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30-32页 |
| 4 实验结果 | 第32-43页 |
| ·载体的鉴定 | 第32-33页 |
| ·转染条件的确定 | 第33-34页 |
| ·Western Blot检测 | 第34-36页 |
| ·免疫荧光检测 | 第36-37页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第37页 |
| ·荧光定量PCR | 第37-43页 |
| 5 讨论 | 第43-45页 |
| ·蛋白水平检测 | 第43页 |
| ·端粒酶活性检测 | 第43页 |
| ·荧光定量PCR | 第43-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录A | 第49-51页 |
| 附录B | 第51-52页 |
| 附录C | 第52-53页 |
| 作者简历 | 第53-55页 |
| 学位论文数据集 | 第55页 |