| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| ·脂肪酶概述 | 第7-8页 |
| ·国内外研究进展 | 第8-10页 |
| ·脂肪酶分子生物学研究进展 | 第8页 |
| ·根霉脂肪酶的克隆表达 | 第8-10页 |
| ·根霉脂肪酶的应用 | 第10-11页 |
| ·本课题研究背景、意义和课题来源 | 第11页 |
| ·本课题研究内容 | 第11-14页 |
| ·本课题研究思路 | 第11-12页 |
| ·研究方法 | 第12页 |
| ·研究内容 | 第12-14页 |
| 第二章 华根霉脂肪酶基因的克隆及表达载体的构建 | 第14-23页 |
| ·前言 | 第14页 |
| ·材料与方法 | 第14-19页 |
| ·菌株与质粒 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·培养基与溶液 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-19页 |
| ·结果与讨论 | 第19-21页 |
| ·华根霉基因组DNA 的提取 | 第19页 |
| ·proRCL、mRCL 基因的PCR 扩增 | 第19-20页 |
| ·pMD19-proRCL 及pMD19-mRCL 克隆质粒的构建 | 第20-21页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第21页 |
| ·本章小结 | 第21-23页 |
| 第三章 华根霉前导肽和成熟肽脂肪酶的表达优化和纯化 | 第23-35页 |
| ·前言 | 第23页 |
| ·材料与方法 | 第23-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基与溶液 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-34页 |
| ·pET28-proRCL 和pET28-mRCL 的初步表达 | 第28-29页 |
| ·ProRCL 和MRCL 的优化表达 | 第29-33页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第四章 重组脂肪酶的酶学性质研究 | 第35-46页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-44页 |
| ·pH 对重组脂肪酶活力的影响 | 第37页 |
| ·pH 对重组脂肪酶稳定性的影响 | 第37-38页 |
| ·温度对重组脂肪酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·温度对重组脂肪酶稳定性的影响 | 第39页 |
| ·重组脂肪酶的脂肪酸链长专一性 | 第39-40页 |
| ·金属离子、鳌合剂等对重组脂肪酶活力的影响 | 第40-41页 |
| ·重组脂肪酶的有机溶剂稳定性 | 第41-42页 |
| ·重组脂肪酶的动力学常数 | 第42-44页 |
| ·本章小结 | 第44-46页 |
| 主要结论 | 第46-47页 |
| 展望 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 附录1：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52-53页 |
| 附录2: 基因序列测定 | 第53-55页 |
