中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第14-33页 |
一、禽网状内皮组织增生症综述 | 第14-32页 |
1. 病原学 | 第14-19页 |
2. REV 的生活周期 | 第19-21页 |
3. 流行病学 | 第21页 |
4. 病毒的传播 | 第21-22页 |
5. 症状及病理变化 | 第22-24页 |
6. REV 的致病病理与免疫 | 第24-25页 |
7. REV 引起的感染和免疫抑制 | 第25-29页 |
8. REV 感染的诊断 | 第29-31页 |
9. REV 预防和控制 | 第31-32页 |
二、本研究的目的及意义 | 第32-33页 |
实验一、REV 核酸探针的标记和敏感性、特异性检测 | 第33-40页 |
1 材料和方法 | 第33-36页 |
·材料 | 第33页 |
·仪器和试剂 | 第33页 |
·PCR 引物 | 第33页 |
·方法 | 第33-36页 |
·env 基因的克隆和序列测定 | 第33-34页 |
·探针的标记 | 第34-35页 |
·标记探针的敏感性检测 | 第35-36页 |
·标记探针的特异性检测 | 第36页 |
2 结果 | 第36-38页 |
·PCR 结果 | 第36-37页 |
·PCR 产物的克隆和序列测定 | 第37页 |
·核酸探针的敏感性试验结果 | 第37-38页 |
·核酸探针的特异性试验结果 | 第38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
实验二、群中REV 感染的流行病学调查 | 第40-51页 |
1 材料和方法 | 第40-45页 |
·材料 | 第40页 |
·病料来源 | 第40页 |
·检测试剂 | 第40页 |
·病毒的分离 | 第40-42页 |
·CEF 的制备 | 第41页 |
·病毒的分离 | 第41页 |
·IFA检测 | 第41-42页 |
·组织 DNA 的提取 | 第42页 |
·REV 囊膜糖蛋白基因序列的 PCR 扩增 | 第42-44页 |
·PCR 扩增引物的设计和合成 | 第42-43页 |
·PCR 扩增体系 | 第43-44页 |
·PCR 反应条件 | 第44页 |
·nest-PCR 反应 | 第44页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
·核酸杂交 | 第44-45页 |
2. 结果 | 第45-49页 |
·样品中传染性REV 的检测 | 第45-46页 |
·组织 DNA 直接斑点分子杂交 | 第46页 |
·PCR 及nest-PCR 对 REV env 基因的检测结果 | 第46-47页 |
·nest-PCR 产物特异性验证 | 第47-48页 |
·不同器官与地区来源样品检出率比较 | 第48-49页 |
3. 讨论 | 第49-51页 |
实验三、禽网状内皮组织增殖症病毒囊膜糖蛋白基因的克隆及序列分析 | 第51-76页 |
1. 材料和方法 | 第51-57页 |
·材料 | 第51页 |
·病料来源 | 第51页 |
·分子生物学试剂 | 第51页 |
·PCR用模板的制备 | 第51-52页 |
·引物设计与合成 | 第52页 |
·nest-PCR 扩增env 基因片段 | 第52-53页 |
·目的片段PCR产物DNA电泳 | 第53-54页 |
·PCR 产物的回收与定量 | 第54页 |
·DNA 的连接反应 | 第54页 |
·TG1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
·连接产物的转化 | 第55页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第55-56页 |
·重组质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第56-57页 |
·阳性克隆序列测定与比较分析 | 第57页 |
2. 结果 | 第57-74页 |
·env 基因nest-PCR 扩增结果 | 第57页 |
·阳性克隆双酶切结果 | 第57-58页 |
·env 基因片段的测序结果与比较分析 | 第58-74页 |
·env 基因片段的测序结果 | 第59-63页 |
·nest-PCR 后序列比较结果 | 第63-73页 |
·env 基因片段同源性比较 | 第73-74页 |
·env 基因片段进化树分析 | 第74页 |
3. 讨论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-92页 |
结论 | 第92-93页 |
硕士期间发表论文 | 第93-94页 |
致谢 | 第94页 |