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鸭群中REV感染的流行病学调查及囊膜糖蛋白基因的序列分析

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
前言第14-33页
 一、禽网状内皮组织增生症综述第14-32页
  1. 病原学第14-19页
  2. REV 的生活周期第19-21页
  3. 流行病学第21页
  4. 病毒的传播第21-22页
  5. 症状及病理变化第22-24页
  6. REV 的致病病理与免疫第24-25页
  7. REV 引起的感染和免疫抑制第25-29页
  8. REV 感染的诊断第29-31页
  9. REV 预防和控制第31-32页
 二、本研究的目的及意义第32-33页
实验一、REV 核酸探针的标记和敏感性、特异性检测第33-40页
 1 材料和方法第33-36页
   ·材料第33页
     ·仪器和试剂第33页
     ·PCR 引物第33页
   ·方法第33-36页
     ·env 基因的克隆和序列测定第33-34页
     ·探针的标记第34-35页
     ·标记探针的敏感性检测第35-36页
     ·标记探针的特异性检测第36页
 2 结果第36-38页
   ·PCR 结果第36-37页
   ·PCR 产物的克隆和序列测定第37页
   ·核酸探针的敏感性试验结果第37-38页
   ·核酸探针的特异性试验结果第38页
 3 讨论第38-40页
实验二、群中REV 感染的流行病学调查第40-51页
 1 材料和方法第40-45页
   ·材料第40页
     ·病料来源第40页
     ·检测试剂第40页
   ·病毒的分离第40-42页
     ·CEF 的制备第41页
     ·病毒的分离第41页
     ·IFA检测第41-42页
   ·组织 DNA 的提取第42页
   ·REV 囊膜糖蛋白基因序列的 PCR 扩增第42-44页
     ·PCR 扩增引物的设计和合成第42-43页
     ·PCR 扩增体系第43-44页
     ·PCR 反应条件第44页
     ·nest-PCR 反应第44页
     ·琼脂糖凝胶电泳第44页
   ·核酸杂交第44-45页
 2. 结果第45-49页
   ·样品中传染性REV 的检测第45-46页
   ·组织 DNA 直接斑点分子杂交第46页
   ·PCR 及nest-PCR 对 REV env 基因的检测结果第46-47页
   ·nest-PCR 产物特异性验证第47-48页
   ·不同器官与地区来源样品检出率比较第48-49页
 3. 讨论第49-51页
实验三、禽网状内皮组织增殖症病毒囊膜糖蛋白基因的克隆及序列分析第51-76页
 1. 材料和方法第51-57页
   ·材料第51页
     ·病料来源第51页
     ·分子生物学试剂第51页
   ·PCR用模板的制备第51-52页
   ·引物设计与合成第52页
   ·nest-PCR 扩增env 基因片段第52-53页
   ·目的片段PCR产物DNA电泳第53-54页
   ·PCR 产物的回收与定量第54页
   ·DNA 的连接反应第54页
   ·TG1 大肠杆菌感受态细胞的制备第54-55页
   ·连接产物的转化第55页
   ·质粒 DNA 的提取第55-56页
   ·重组质粒 DNA 的酶切鉴定第56-57页
   ·阳性克隆序列测定与比较分析第57页
 2. 结果第57-74页
   ·env 基因nest-PCR 扩增结果第57页
   ·阳性克隆双酶切结果第57-58页
   ·env 基因片段的测序结果与比较分析第58-74页
     ·env 基因片段的测序结果第59-63页
     ·nest-PCR 后序列比较结果第63-73页
     ·env 基因片段同源性比较第73-74页
     ·env 基因片段进化树分析第74页
 3. 讨论第74-76页
参考文献第76-92页
结论第92-93页
硕士期间发表论文第93-94页
致谢第94页

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