| 本论文创新性工作 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| 英文摘要 | 第9-16页 |
| 英文缩写词汇含义说明 | 第16-25页 |
| 第一部分 文献综述 | 第25-40页 |
| 第一章 蛋白质组学及主要病毒蛋白质组学的研究进展 | 第25-40页 |
| 摘要 | 第25-26页 |
| 1.蛋白质组学的产生 | 第26-28页 |
| 2.蛋白质组学的研究技术 | 第28-35页 |
| 3.病毒蛋白质组的研究概况 | 第35-38页 |
| 4.蛋白质研究技术中尚存在的问题 | 第38-40页 |
| 第二部分 试验研究 | 第40-184页 |
| 第二章 鸭瘟病毒的纯化及其超微结构研究 | 第40-48页 |
| 摘要 | 第40页 |
| 1.试验材料 | 第40-41页 |
| 2.试验方法 | 第41-42页 |
| ·病毒增殖 | 第41-42页 |
| ·病毒纯化 | 第42页 |
| ·电镜观察 | 第42页 |
| 3.试验结果 | 第42-45页 |
| ·病毒的增殖与纯化 | 第42-43页 |
| ·病毒粒子的电镜观察 | 第43-45页 |
| 4.分析与讨论 | 第45-47页 |
| 5.小结 | 第47-48页 |
| 第三章 鸭瘟病毒蛋白质组二维电泳特性 | 第48-78页 |
| 摘要 | 第48-50页 |
| 1.试验材料 | 第50-51页 |
| 2.试验方法 | 第51-56页 |
| ·抗DPV高免血清的制备与纯化 | 第51-52页 |
| ·鸭瘟病毒蛋白质组二维电泳模型的建立与优化 | 第52-54页 |
| ·鸭瘟病毒蛋白质组二维电泳分离与免疫印迹分析 | 第54页 |
| ·鸭瘟病毒免疫原性蛋白质谱鉴定与分析 | 第54-56页 |
| 3 试验结果 | 第56-73页 |
| ·抗DPV抗体IgG纯化结果及鸭瘟病毒蛋白质组样品含量 | 第56-57页 |
| ·DPV感染DEF蛋白质组2-DE模型建立与优化 | 第57-62页 |
| ·鸭瘟病毒蛋白质组2-DE分离与免疫印迹分析 | 第62-64页 |
| ·鸭瘟病毒免疫原性蛋白质质谱鉴定与分析 | 第64-73页 |
| 4.分析与讨论 | 第73-76页 |
| 5.小结 | 第76-78页 |
| 第四章 鸭瘟病毒UL24基因的发现、克隆及分子特性分析 | 第78-103页 |
| 摘要 | 第78页 |
| 1.试验材料 | 第78-79页 |
| 2.试验方法 | 第79-84页 |
| ·质谱解析蛋白序列扩增鸭瘟病毒基因与分析 | 第79-81页 |
| ·兼并引物扩增获取测序基因片段杂交验证 | 第81-83页 |
| ·DPV-UL24全基因的扩增及其生物信息学分析 | 第83-84页 |
| 3.试验结果 | 第84-98页 |
| ·质谱蛋白序列部分基因的扩增、测序及其分析 | 第84-87页 |
| ·鸭瘟病毒UL24基因的扩增与测序 | 第87页 |
| ·扩增核酸序列生物信息学分析 | 第87-98页 |
| 4.讨论与分析 | 第98-101页 |
| 5.小结 | 第101-103页 |
| 第五章 鸭瘟病毒UL24基因原核表达、产物纯化及其抗体制备 | 第103-119页 |
| 摘要 | 第103-104页 |
| 1.试验材料 | 第104页 |
| 2.试验方法 | 第104-109页 |
| ·pET32a(+)/DPV-UL24原核表达质粒构建与诱导表达 | 第104-107页 |
| ·重组质粒pET32a(+)/DPV-UL24原核表达产物纯化与蛋白复性 | 第107-108页 |
| ·兔抗融合表达蛋白pET32a(+)/DPV-UL24抗体的制备与纯化 | 第108-109页 |
| 3.试验结果 | 第109-114页 |
| ·DPV-UL24基因片段扩增结果 | 第109页 |
| ·原核表达质粒pET32a(+)/DPV-UL24的构建与鉴定结果 | 第109-110页 |
| ·重组质粒pET32a(+)/DPV-UL24的诱导表达及其优化结果 | 第110-112页 |
| ·融合表达蛋白pET32a(+)/DPV-UL24的纯化结果 | 第112-113页 |
| ·兔抗DPV-UL24血清制备结果 | 第113-114页 |
| 4.分析与讨论 | 第114-117页 |
| 5.小结 | 第117-119页 |
| 第六章 鸭瘟病毒UL24基因原核表达产物免疫原性研究 | 第119-130页 |
| 摘要 | 第119-120页 |
| 1.试验材料 | 第120页 |
| 2.试验方法 | 第120-121页 |
| ·试验动物分组与免疫 | 第120-121页 |
| ·攻毒保护试验 | 第121页 |
| ·血清抗体检测试验 | 第121页 |
| 3.试验结果 | 第121-127页 |
| ·人工感染鸭不同时间血清ELISA抗体效价 | 第121-123页 |
| ·鸭抗DPV-UL24血清中和抗体效价消长变化 | 第123-124页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第124-127页 |
| 4.分析与讨论 | 第127-129页 |
| 5.小结 | 第129-130页 |
| 第七章 DPV-UL24蛋白抗体介导的免疫组化检测人工感染鸭瘟病毒后UL24基因在鸭组织中的表达时相与定位研究 | 第130-142页 |
| 摘要 | 第130-131页 |
| 1.试验材料 | 第131页 |
| 2.试验方法 | 第131-133页 |
| ·试验动物人工感染DPV及样品采集 | 第131-132页 |
| ·样品组织包埋及切片 | 第132页 |
| ·间接免疫组化检测DPV-UL24基因编码蛋白方法的建立与优化 | 第132-133页 |
| ·间接免疫组化检测DPV-UL24基因编码蛋白方法的临床应用 | 第133页 |
| ·人工感染DPV后DPV-UL24基因在鸭组织蛋白表达时相、侵染过程与定位分布 | 第133页 |
| ·结果判定 | 第133页 |
| 3.试验结果 | 第133-136页 |
| ·免疫组化检测人工感染后鸭组织DPV-UL24基因编码蛋白方法的建立与优化 | 第133-134页 |
| ·免疫组化检测DPV-UL24基因编码蛋白方法的临床应用 | 第134页 |
| ·免疫组化方法检测在人工感染DPV后DPV-UL24基因在鸭组织蛋白表达时相、侵染过程与定位分布 | 第134-136页 |
| 4.分析与讨论 | 第136-140页 |
| 5.小结 | 第140-142页 |
| 第八章 DPV-UL24蛋白抗体介导的免疫荧光检测人工感染鸭瘟病毒后UL24基因在鸭组织中的表达时相与定位研究 | 第142-150页 |
| 摘要 | 第142页 |
| 1.试验材料 | 第142-143页 |
| 2.试验方法 | 第143-144页 |
| ·动物人工感染DPV及采样、组织包埋及切片 | 第143页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV-UL24基因编码蛋白方法的建立与优化 | 第143页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV-UL24基因编码蛋白方法的临床应用 | 第143页 |
| ·免疫荧光方法检测人工感染DPV后DPV-UL24基因在鸭组织蛋白表达时相、侵染过程与定位分布 | 第143-144页 |
| ·结果判定 | 第144页 |
| 3.试验结果 | 第144-146页 |
| ·免疫荧光检测人工感染鸭瘟病毒后鸭组织DPV-UL24基因编码蛋白方法的建立与优化 | 第144页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV-UL24基因编码蛋白方法的临床应用 | 第144页 |
| ·免疫荧光检测在人工感染DPV后DPV-UL24基因在鸭组织蛋白表达时相、侵染过程与定位分布 | 第144-146页 |
| 4.分析与讨论 | 第146-148页 |
| 5.小结 | 第148-150页 |
| 第九章 抗鸭瘟病毒UL24基因原核表达蛋白抗体介导的ELISA检测DPV抗原的研究和应用 | 第150-160页 |
| 摘要 | 第150-151页 |
| 1.试验材料 | 第151页 |
| 2.试验方法 | 第151-153页 |
| ·兔抗DPV-UL24抗体和鸭抗DPV-UL24抗体的制备与纯化 | 第151页 |
| ·样品的处理 | 第151-152页 |
| ·抗DPV-UL24蛋白抗体介导的抗原捕获-ELISA方法的建立 | 第152页 |
| ·抗DPV-UL24蛋白抗体介导的抗原捕获-ELISA方法的优化 | 第152-153页 |
| ·AC-ELISA阴阳性临界值的确定 | 第153页 |
| ·抗原捕获ELISA方法性能评价 | 第153页 |
| ·抗DPV-UL24蛋白抗体介导的抗原捕获ELISA方法的应用 | 第153页 |
| 3.试验结果 | 第153-157页 |
| ·抗原捕获ELISA检测DPV方法的建立与优化 | 第153-155页 |
| ·AC-ELISA阴阳性临界值的确定 | 第155页 |
| ·抗原捕获ELISA方法性能评价 | 第155-156页 |
| ·抗原捕获ELISA检测DPV方法的应用 | 第156-157页 |
| 4.分析与讨论 | 第157-158页 |
| 5.小结 | 第158-160页 |
| 第十章 鸭瘟病毒UL24基因原核表达蛋白作为包备抗原ELISA检测DPV抗体的研究和应用 | 第160-170页 |
| 摘要 | 第160-161页 |
| 1.试验材料 | 第161页 |
| 2.试验方法 | 第161-162页 |
| ·DPV-UL24基因原核表达蛋白的获得与纯化 | 第161页 |
| ·DPV-UL24基因原核表达蛋白作为包被抗原ELISA方法的建立 | 第161-162页 |
| ·间接ELISA方法检测DPV抗体的应用 | 第162页 |
| 3.试验结果 | 第162-166页 |
| ·DPV-UL24表达蛋白间接ELISA方法的建立 | 第162-166页 |
| ·临床血清样品检测结果 | 第166页 |
| 4.分析与讨论 | 第166-168页 |
| 5.小结 | 第168-170页 |
| 第十一章 基于鸭瘟病毒UL24基因PCR方法的建立和应用 | 第170-177页 |
| 1.试验材料 | 第170-171页 |
| 2.试验方法 | 第171-172页 |
| ·核酸DNA的提取 | 第171页 |
| ·DPV-UL24基因PCR检测DPV方法的建立与优化 | 第171-172页 |
| ·DPV-UL24基因PCR方法对病料组织的检测 | 第172页 |
| 3.试验结果 | 第172-174页 |
| ·引物对DPV强毒株核酸进行PCR扩增的结果 | 第172页 |
| ·DPV-UL24基因PCR检测DPV方法灵敏性试验 | 第172-173页 |
| ·DPV-UL24基因PCR检测DPV方法的特异性试验 | 第173-174页 |
| 4.分析与讨论 | 第174-175页 |
| 5.小结 | 第175-177页 |
| 第十二章 建立基于鸭瘟病毒UL24基因的免疫组化、免疫荧光和抗原捕获ELISA、PCR检测DPV方法的比较 | 第177-184页 |
| 1.试验材料与方法 | 第177页 |
| 2.试验结果 | 第177-180页 |
| ·建立基于DPV-UL24基因检测方法的特异性 | 第177页 |
| ·建立基于DPV-UL24基因检测方法的敏感性 | 第177-179页 |
| ·建立基于DPV-UL24基因检测方法对临床鸭瘟病料检测结果 | 第179-180页 |
| 3.讨论与分析 | 第180-182页 |
| 4.小结 | 第182-184页 |
| 第三部分 结论 | 第184-186页 |
| 第四部分 参考文献 | 第186-203页 |
| 第五部分 致谢 | 第203-204页 |
| 作者简介 | 第204-205页 |
| 附表 | 第205-216页 |
| 附图 | 第216-234页 |
| 附图 1——免疫组化版图 | 第216-223页 |
| 附图 2——免疫荧光版图 | 第223-231页 |
| 附图 3——基因测序图 | 第231-234页 |
