| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-17页 |
| 第一部分 文献综述 | 第17-32页 |
| 第一章 疱疹病毒gC基因及其编码蛋白的研究进展 | 第17-25页 |
| 1 疱疹病毒的基因组及gC基因的结构和特性 | 第17-18页 |
| 2 疱疹病毒蛋白和gC蛋白的结构和特性 | 第18-22页 |
| 3 疱疹病毒gC与病毒的免疫及gC疫苗的研究 | 第22-25页 |
| ·疱疹病毒gC与病毒的免疫 | 第22-23页 |
| ·疱疹病毒gC疫苗的研究 | 第23-25页 |
| 第二章 鸭瘟检测技术的研究进展 | 第25-32页 |
| 1 临床诊断 | 第25页 |
| 2 实验室诊断 | 第25-31页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第25-26页 |
| ·血清学方法 | 第26-29页 |
| ·分子生物学技术 | 第29-31页 |
| 3 小结 | 第31-32页 |
| 第二部分 试验研究 | 第32-150页 |
| 第三章 鸭瘟病毒gC基因发现、克隆及分子特性分析 | 第32-57页 |
| 1 材料 | 第32-36页 |
| ·毒株和菌株 | 第32-33页 |
| ·鸭胚 | 第33页 |
| ·细胞培养试剂 | 第33页 |
| ·T克隆相关试剂 | 第33页 |
| ·斑点杂交试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·主要试剂配制方法 | 第34-36页 |
| 2 方法 | 第36-41页 |
| ·gC基因的发现 | 第36-37页 |
| ·gC基因的扩增和克隆 | 第37-39页 |
| ·DNA斑点杂交鉴定DPV gC基因 | 第39-41页 |
| 3 结果 | 第41-53页 |
| ·gC基因的发现 | 第41-43页 |
| ·gC基因的克隆和鉴定结果 | 第43-45页 |
| ·gC基因的斑点杂交结果 | 第45页 |
| ·gC生物信息学分析结果 | 第45-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| ·关于斑点杂交 | 第53页 |
| ·DPV gC基因的发现 | 第53-54页 |
| ·DPV gC的二级结构和抗原表位预测 | 第54-55页 |
| ·gC的功能和研究意义 | 第55页 |
| 5 小结 | 第55-57页 |
| 第四章 鸭瘟病毒gC基因原核表达、产物纯化及其抗体制备 | 第57-77页 |
| 1 材料 | 第57-61页 |
| ·菌株/毒株/载体 | 第57-58页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·主要试剂的配制 | 第58-60页 |
| ·主要仪器 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61-68页 |
| ·引物的设计与合成 | 第61页 |
| ·DPV gC基因的扩增 | 第61-62页 |
| ·DPV gC基因的T克隆 | 第62页 |
| ·原核表达重组质粒pET-32a-gC的构建 | 第62-64页 |
| ·重组表达质粒的小量诱导表达 | 第64-65页 |
| ·pET32a-gC重组蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| ·pET32a-gC表达产物的Western Blot检铡 | 第66-67页 |
| ·兔抗DPV gC融合蛋白高免血清的制备及IgG的提取和纯化 | 第67-68页 |
| 3 结果 | 第68-73页 |
| ·DPV基因的PCR扩增结果 | 第68页 |
| ·pMD18-gC克隆鉴定结果 | 第68-69页 |
| ·pMD18-gC的序列测定结果 | 第69页 |
| ·表达重组质粒pET-32a-gC的鉴定结果 | 第69-70页 |
| ·pET32a-gC的诱导表达结果 | 第70页 |
| ·pET32a-gC表达蛋白在宿主菌中的分布结果 | 第70页 |
| ·pET32a-gC表达蛋白纯化结果 | 第70-71页 |
| ·pET32a-gC表达产物的活性检测结果 | 第71-72页 |
| ·兔抗DPV gC融合蛋白高免血清的制备结果 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| ·DPV gC的表达载体的选择 | 第73页 |
| ·重组蛋白的表达形式 | 第73-74页 |
| ·疱疹病毒的gC蛋白的原核表达 | 第74-75页 |
| ·兔抗gC重组蛋白IgG的制备和纯化 | 第75页 |
| 5 小结 | 第75-77页 |
| 第五章 鸭瘟病毒gC基因原核表达产物免疫原性研究 | 第77-87页 |
| 1 材料 | 第77-78页 |
| ·菌株/毒株 | 第77-78页 |
| ·试验动物 | 第78页 |
| ·主要试剂 | 第78页 |
| ·主要仪器 | 第78页 |
| 2 方法 | 第78-79页 |
| ·gC表达蛋白免疫原的制备 | 第78页 |
| ·试验动物分组与免疫 | 第78页 |
| ·血清抗体检测试验 | 第78-79页 |
| ·攻毒保护试验 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-84页 |
| ·人工感染鸭不同时间血清ELISA抗体效价 | 第79-82页 |
| ·鸭抗DPV gC血清中和抗体效价消长变化 | 第82-83页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-86页 |
| ·关于重组蛋白疫苗的研究 | 第84-85页 |
| ·关于DPV gC重组蛋白免疫效力 | 第85-86页 |
| 5 小结 | 第86-87页 |
| 第六章 抗鸭瘟病毒gC基因原核表达蛋白抗体介导的免疫组化检测DPV的研究和应用 | 第87-100页 |
| 1 材料 | 第88-90页 |
| ·毒株 | 第88页 |
| ·实验动物 | 第88页 |
| ·抗体 | 第88页 |
| ·仪器 | 第88页 |
| ·试剂 | 第88页 |
| ·主要试剂的配置 | 第88-90页 |
| 2 方法 | 第90-92页 |
| ·DPV的增殖 | 第90页 |
| ·兔抗鸭瘟病毒gC基因原核表达蛋白抗体的制备及其IgG提取 | 第90页 |
| ·麻鸭的人工感染DPV实验 | 第90页 |
| ·SP免疫组化染色方法的建立和优化 | 第90-91页 |
| ·DPV全病毒抗体检测鸭瘟的间接酶免疫组化法(IP)的建立和应用 | 第91页 |
| ·SP法检测DPV抗原于鸭体组织器官及细胞的定植分布规律 | 第91-92页 |
| 3 结果 | 第92-96页 |
| ·SP酶免疫组化染色方法的建立和优化结果 | 第92-93页 |
| ·间接酶免疫组化法和SP法的比较结果 | 第93-94页 |
| ·SP法检测DPV抗原于鸭组织及细胞的定植分布规律的结果 | 第94-96页 |
| 4 讨论 | 第96-99页 |
| ·SP免疫组化方法的建立和优化 | 第96-97页 |
| ·SP法与DPV全病毒抗体检测鸭瘟的间接酶免疫组化法比较 | 第97-98页 |
| ·SP法对DPV抗原的定位及DPV的分布规律 | 第98-99页 |
| 5 小结 | 第99-100页 |
| 第七章 抗鸭瘟病毒gC基因原核表达蛋白抗体介导的免疫荧光检测DPV的研究和应用 | 第100-109页 |
| 1 材料 | 第100-101页 |
| ·毒株 | 第100页 |
| ·实验动物 | 第100页 |
| ·抗体 | 第100-101页 |
| ·仪器 | 第101页 |
| ·试剂 | 第101页 |
| 2 方法 | 第101-103页 |
| ·人工感染DPV鸭组织的采样、包埋及切片 | 第101页 |
| ·间接免疫荧光检测DPV方法的建立与优化 | 第101-103页 |
| 3 结果 | 第103-106页 |
| ·免疫荧光组化法建立和优化结果 | 第103-104页 |
| ·检测DPV的定植和动态分布规律的结果 | 第104-106页 |
| 4 讨论 | 第106-108页 |
| ·关于DPV gC的免疫荧光技术 | 第106-107页 |
| ·关于荧光抗体技术 | 第107页 |
| ·免疫荧光和免疫组化的比较 | 第107-108页 |
| 5 小结 | 第108-109页 |
| 第八章 免疫组化和荧光对gC在鸭瘟强毒感染雏鸭组织中的表达时相与定位研究 | 第109-115页 |
| 1 材料 | 第109-110页 |
| ·毒株 | 第109页 |
| ·实验动物 | 第109-110页 |
| ·抗体 | 第110页 |
| ·仪器 | 第110页 |
| ·试剂 | 第110页 |
| 2 方法 | 第110-111页 |
| ·动物人工感染DPV及采样、组织包埋及切片 | 第110页 |
| ·兔抗DPV高免血清的制备及其IgG纯化 | 第110页 |
| ·基于gC蛋白SP法检测DPV方法的建立与优化 | 第110页 |
| ·基于gC蛋白间接免疫荧光检测DPV方法的建立与优化 | 第110页 |
| ·gC基因在鸭组织蛋白表达时相、侵染过程与定位分布 | 第110-111页 |
| 3 结果 | 第111-112页 |
| ·gC基因在鸭组织蛋白表达时相、浸染过程与定位分布 | 第111-112页 |
| 4 讨论 | 第112-114页 |
| ·关于疱疹病毒gC的表达和调控 | 第112页 |
| ·关于DPV蛋白的表达时相 | 第112-114页 |
| 5 小结 | 第114-115页 |
| 第九章 抗鸭瘟病毒gC基因原核表达蛋白抗体介导的ELISA检测DPV抗原的研究和应用 | 第115-125页 |
| 1 材料 | 第115-116页 |
| ·毒/菌株 | 第115-116页 |
| ·主要试剂 | 第116页 |
| ·ELISA试剂的配制 | 第116页 |
| ·主要仪器 | 第116页 |
| 2 方法 | 第116-119页 |
| ·兔抗DPV gC抗体的制备与纯化 | 第116-117页 |
| ·样品的处理 | 第117页 |
| ·抗DPV gC蛋白抗体介导的抗原捕获ELISA方法的建立 | 第117-119页 |
| ·抗DPV gC蛋白抗体介导的抗原捕获ELISA方法的应用 | 第119页 |
| 3 结果 | 第119-122页 |
| ·抗原捕获ELISA检测DPV方法的建立与优化结果 | 第119-122页 |
| ·AC-ELISA检测DPV方法的应用 | 第122页 |
| 4 讨论 | 第122-124页 |
| ·关于DPV的检测 | 第122-123页 |
| ·关于ELISA的建立 | 第123-124页 |
| 5 小结 | 第124-125页 |
| 第十章 鸭瘟病毒gC基因原核表达蛋白作为包备抗原ELISA检测DPV抗体的研究和应用 | 第125-136页 |
| 1 材料 | 第126-127页 |
| ·毒株 | 第126页 |
| ·血清 | 第126页 |
| ·主要试剂 | 第126页 |
| ·ELISA试剂的配制 | 第126页 |
| ·主要仪器 | 第126-127页 |
| 2 方法 | 第127-129页 |
| ·DPV gC基因原核表达蛋白的获得与纯化 | 第127页 |
| ·DPV gC基因原核表达蛋白作为包被抗原间接ELISA方法的建立 | 第127-128页 |
| ·间接ELISA方法检测DPV抗体的应用 | 第128-129页 |
| 3 结果 | 第129-133页 |
| ·DPV gC表达蛋白间接ELISA方法的建立 | 第129-132页 |
| ·临床血清的检测结果 | 第132-133页 |
| 4 讨论 | 第133-134页 |
| ·关于疱疹病毒的gC蛋白 | 第133页 |
| ·关于gC-ELISA的建立 | 第133-134页 |
| 5 小结 | 第134-136页 |
| 第十一章 检测DPV gC基因PCR方法的建立与应用 | 第136-144页 |
| 1.材料 | 第136-137页 |
| ·毒/菌株 | 第136-137页 |
| ·组织病料 | 第137页 |
| ·主要试剂 | 第137页 |
| ·主要仪器 | 第137页 |
| 2.方法 | 第137-139页 |
| ·PCR引物 | 第137页 |
| ·毒/菌株DNA模板的提取 | 第137-138页 |
| ·PCR反应体系的建立 | 第138-139页 |
| ·PCR灵敏性检验 | 第139页 |
| ·PCR特异性检验 | 第139页 |
| ·感染病料的检测 | 第139页 |
| 3 结果 | 第139-142页 |
| ·gC基因引物对DPV强、弱毒DNA的检测结果 | 第139-140页 |
| ·PCR灵敏性试验结果 | 第140-141页 |
| ·PCR特异性试验结果 | 第141页 |
| ·感染病料的检测结果 | 第141-142页 |
| 4 讨论 | 第142-143页 |
| 5 小结 | 第143-144页 |
| 第十二章 基于鸭瘟病毒gC基因的ELISA、免疫组化、免疫荧光和PCR检测方法的比较 | 第144-150页 |
| 1 材料 | 第144页 |
| ·毒株 | 第144页 |
| ·组织病料 | 第144页 |
| 2 方法 | 第144-145页 |
| ·基于鸭瘟病毒gC基因检测方法的建立 | 第144-145页 |
| ·组织病料的检测 | 第145页 |
| 3 结果 | 第145-147页 |
| ·基于DPV gC基因四种检测方法的特异性 | 第145页 |
| ·四种检测方法对DPV攻毒组织检测比较结果 | 第145-146页 |
| ·建立基于gC基因检测方法对临床鸭瘟病料检测结果 | 第146-147页 |
| 4 讨论 | 第147-149页 |
| ·基于gC基因检测方法的敏感性 | 第147页 |
| ·检测DPV病原方法的比较 | 第147-148页 |
| ·基于gC基因检测方法的比较 | 第148-149页 |
| 5 小结 | 第149-150页 |
| 第三部分 结论 | 第150-151页 |
| 第四部分 参考文献 | 第151-163页 |
| 第五部分 致谢 | 第163-165页 |
| 第六部分 附图 | 第165-177页 |
| 第六章 附图 | 第165-172页 |
| 第七章 附图 | 第172-177页 |
| 第八章 附图 | 第177页 |
