| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 致谢 | 第13-24页 |
| 第一章 绪论 | 第24-40页 |
| ·琥珀酸的性质 | 第24页 |
| ·琥珀酸的物理性质 | 第24页 |
| ·琥珀酸的化学性质 | 第24页 |
| ·琥珀酸的应用 | 第24-25页 |
| ·琥珀酸在化学品领域的应用 | 第24-25页 |
| ·琥珀酸在食品领域的应用 | 第25页 |
| ·琥珀酸在医药卫生领域的应用 | 第25页 |
| ·琥珀酸的生产方法 | 第25-26页 |
| ·琥珀酸的化学法制备 | 第25页 |
| ·琥珀酸的生物法制备 | 第25-26页 |
| ·琥珀酸的微生物发酵研究进展 | 第26-30页 |
| ·菌种分离筛选方面 | 第27页 |
| ·菌种关键酶分析方面 | 第27页 |
| ·代谢工程及其在琥珀酸产生菌中的应用研究 | 第27-28页 |
| ·菌种选育方面 | 第28页 |
| ·生物质发酵及调控方面 | 第28-30页 |
| ·需要解决的科学问题 | 第30页 |
| ·研究内容 | 第30-31页 |
| ·研究结果应用前景 | 第31页 |
| ·研究的课题来源 | 第31页 |
| ·本文研究思路 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-40页 |
| 第二章 菌株的分离、鉴定及初步发酵 | 第40-53页 |
| ·前言 | 第40页 |
| ·材料与方法 | 第40-44页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第40-41页 |
| ·菌种分离 | 第41-42页 |
| ·菌种鉴定 | 第42-44页 |
| ·菌种初步发酵 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·菌种分离 | 第44-45页 |
| ·菌种鉴定 | 第45-50页 |
| ·菌种初步发酵 | 第50页 |
| ·结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第三章 原始菌株的代谢分析 | 第53-73页 |
| ·前言 | 第53页 |
| ·材料与方法 | 第53-58页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第53页 |
| ·碳源利用分析 | 第53-54页 |
| ·丙二酸对酶的竞争性抑制分析 | 第54页 |
| ·氟乙酸抑制分析 | 第54页 |
| ·相关酶活分析 | 第54-57页 |
| ·相关酶基因分析 | 第57页 |
| ·代谢底物检测 | 第57页 |
| ·代谢产物检测 | 第57页 |
| ·代谢通量分析 | 第57-58页 |
| ·代谢节点分析 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-69页 |
| ·木糖利用结果分析 | 第58-59页 |
| ·酶活分析方法的建立 | 第59页 |
| ·丙二酸对酶的竞争性抑制分析 | 第59-60页 |
| ·氟乙酸抑制分析 | 第60页 |
| ·相关酶活分析 | 第60-61页 |
| ·相关酶基因分析 | 第61-63页 |
| ·代谢通量分析 | 第63-69页 |
| ·代谢节点分析 | 第69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第四章 降低乙酸副产物选育 | 第73-84页 |
| ·前言 | 第73-74页 |
| ·诱变方法 | 第73页 |
| ·突变株的筛选 | 第73页 |
| ·突变株的表征 | 第73-74页 |
| ·材料与方法 | 第74-75页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第74页 |
| ·发酵培养 | 第74页 |
| ·筛选培养基 | 第74页 |
| ·糖检测 | 第74页 |
| ·有机酸检测 | 第74页 |
| ·磷乙酰转移酶酶活检测 | 第74页 |
| ·~(60)Co γ辐射诱变 | 第74页 |
| ·Pta途径缺陷型菌株的筛选 | 第74-75页 |
| ·突变基因的序列分析 | 第75页 |
| ·结果与分析 | 第75-82页 |
| ·~(60)Co γ射线对菌株的致死曲线 | 第75-76页 |
| ·突变株的筛选 | 第76-78页 |
| ·突变株与出发株的乙酸生成比较 | 第78-79页 |
| ·突变株与出发株的琥珀酸生成比较 | 第79页 |
| ·突变株与出发株的整体代谢通量比较 | 第79-81页 |
| ·突变株与出发株的磷乙酰转移酶酶活比较 | 第81-82页 |
| ·突变株与出发株的磷乙酰转移酶基因分析 | 第82页 |
| ·结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第五章 降低乙醇副产物选育 | 第84-93页 |
| ·前言 | 第84-85页 |
| ·材料与方法 | 第85-86页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第85页 |
| ·培养基 | 第85页 |
| ·乙醇脱氢酶基因克隆 | 第85页 |
| ·乙醇脱氢酶基因测序 | 第85页 |
| ·乙醇脱氢酶基因体外定点突变 | 第85页 |
| ·乙醇脱氢酶突变基因胞内重组 | 第85页 |
| ·突变株的筛选 | 第85-86页 |
| ·突变株的突变基因表征 | 第86页 |
| ·突变株的乙醇脱氢酶酶活测定 | 第86页 |
| ·突变株的代谢糖测定 | 第86页 |
| ·突变株的代谢有机酸测定 | 第86页 |
| ·结果与分析 | 第86-91页 |
| ·adh基因的克隆测序 | 第86-87页 |
| ·adh基因的定点突变及胞内重组 | 第87-88页 |
| ·阳性突变株的筛选 | 第88页 |
| ·突变株的乙醇脱氢酶基因及酶活 | 第88-89页 |
| ·突变株的代谢通量 | 第89-91页 |
| ·结论 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-93页 |
| 第六章 突变株的代谢调控 | 第93-107页 |
| ·前言 | 第93-94页 |
| ·材料与方法 | 第94-95页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第94页 |
| ·发酵培养基 | 第94页 |
| ·代谢平衡分析 | 第94页 |
| ·H_2调控H供体平衡 | 第94页 |
| ·ORP调控细胞O/R平衡 | 第94页 |
| ·EMP/HMP流量比调控 | 第94-95页 |
| ·五、六碳糖共发酵调控 | 第95页 |
| ·转氢酶基因分析 | 第95页 |
| ·转氢酶酶活分析 | 第95页 |
| ·磷酸果糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶及代谢通量分析 | 第95页 |
| ·结果与分析 | 第95-105页 |
| ·代谢平衡分析 | 第95-96页 |
| ·H_2调控结果 | 第96-98页 |
| ·ORP调控结果 | 第98-100页 |
| ·转氢酶基因及酶活分析(EMP/HMP流量比调控可行性分析) | 第100-101页 |
| ·EMP/HMP流量比调控结果 | 第101-103页 |
| ·五、六碳糖共代谢调控结果 | 第103-105页 |
| ·结论 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-107页 |
| 第七章 突变株的发酵条件优化 | 第107-122页 |
| ·前言 | 第107页 |
| ·发酵条件 | 第107页 |
| ·优化方法 | 第107页 |
| ·材料与方法 | 第107-109页 |
| ·主要设备、试剂、及发酵检测 | 第107-108页 |
| ·主要因素考察 | 第108页 |
| ·培养基优化正交设计 | 第108页 |
| ·代谢调控因子的响应曲面优化设计 | 第108-109页 |
| ·神经网络模型的建立 | 第109页 |
| ·结果与分析 | 第109-119页 |
| ·培养基优化正交试验 | 第109-112页 |
| ·代谢调控因子的响应曲面优化设计 | 第112-117页 |
| ·神经网络分析 | 第117-119页 |
| ·结论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-122页 |
| 第八章 发酵动力学 | 第122-139页 |
| ·前言 | 第122页 |
| ·发酵动力学研究内容 | 第122页 |
| ·发酵动力学模型 | 第122页 |
| ·材料与方法 | 第122-123页 |
| ·基本设备、试剂、发酵及检测 | 第122页 |
| ·发酵动力学模型分析方法 | 第122-123页 |
| ·结果与分析 | 第123-137页 |
| ·菌体生长动力学分析 | 第123-133页 |
| ·产物合成动力学分析 | 第133-137页 |
| ·结论 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-139页 |
| 第九章 结论与展望 | 第139-142页 |
| ·研究的主要结论 | 第139-140页 |
| ·论文的创新点 | 第140页 |
| ·展望 | 第140-142页 |
| 学位期间参加的相关研究内容 | 第142-143页 |