| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-15页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-27页 |
| ·染色体分离技术及其应用研究 | 第16-19页 |
| ·染色体分离技术的基本原理 | 第16页 |
| ·染色体分离技术的程序 | 第16-18页 |
| ·染色体分离技术在植物中的应用 | 第18-19页 |
| ·荧光原位杂交技术的发展及其在植物中的应用研究 | 第19-25页 |
| ·荧光原位杂交技术的基本原理 | 第19-20页 |
| ·荧光原位杂交技术的操作步骤 | 第20页 |
| ·荧光原位杂交技术的特点 | 第20-21页 |
| ·荧光原位杂交技术的发展 | 第21-22页 |
| ·DNA纤维荧光原位杂交 | 第22-23页 |
| ·荧光原位杂交技术在植物研究中的应用 | 第23-25页 |
| ·荧光原位杂交技术在棉花基因组研究中的应用 | 第25-26页 |
| ·基因组荧光原位杂交 | 第25页 |
| ·BAC克隆荧光原位杂交 | 第25页 |
| ·重复序列DNA荧光原位杂交 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 第二章 棉花单染色体分离及染色体涂色研究 | 第27-45页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·棉花材料 | 第27页 |
| ·酶和生化试剂 | 第27-28页 |
| ·切割仪器耗材 | 第28页 |
| ·实验所用SSR引物 | 第28页 |
| ·方法 | 第28-36页 |
| ·有丝分裂中期染色体制片 | 第28-29页 |
| ·有丝分裂中期染色体膜载片的制备 | 第29-31页 |
| ·单染色体的显微分离 | 第31页 |
| ·Sau 3A接头的制备及LA-PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·DOP-PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·扩增产物的琼脂糖电泳检测 | 第33页 |
| ·Southern杂交验证 | 第33-34页 |
| ·SSR引物扩增验证 | 第34-36页 |
| ·荧光原位杂交验证 | 第36页 |
| ·染色体涂色 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·中期染色体玻璃制片 | 第36-37页 |
| ·中期染色体膜制片 | 第37页 |
| ·单染色体显微分离 | 第37-38页 |
| ·LA-PCR扩增产物的检测 | 第38页 |
| ·DOP-PCR扩增产物的检测 | 第38-39页 |
| ·Southern杂交验证 | 第39-40页 |
| ·SSR引物扩增验证 | 第40页 |
| ·荧光原位杂交验证 | 第40页 |
| ·染色体涂色 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| ·染色体玻璃制片 | 第41页 |
| ·染色体膜制片 | 第41-43页 |
| ·单染色体显微切割 | 第43页 |
| ·扩增产物的获得 | 第43页 |
| ·扩增产物的验证 | 第43-44页 |
| ·染色体涂色研究 | 第44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第三章 棉花单染色体文库的构建和RGA克隆 | 第45-59页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·棉花材料 | 第45页 |
| ·酶和生化试剂 | 第45页 |
| ·切割仪器耗材 | 第45页 |
| ·质粒和载体 | 第45页 |
| ·实验所用引物 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-49页 |
| ·有丝分裂中期染色体膜载片的制备 | 第45-46页 |
| ·染色体的显微分离 | 第46页 |
| ·Sau 3A接头的制备及LA-PCR扩增 | 第46页 |
| ·琼脂糖电泳检测 | 第46页 |
| ·Southern杂交验证 | 第46页 |
| ·SSR引物扩增验证 | 第46页 |
| ·荧光原位杂交验证 | 第46页 |
| ·单染色体文库的构建 | 第46-48页 |
| ·单染色体R基因同源序列的克隆及分析 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-55页 |
| ·染色体膜制片的准备和目标染色体的确定 | 第49页 |
| ·染色体的显微分离 | 第49-50页 |
| ·染色体DNA的体外扩增 | 第50页 |
| ·Southern杂交验证 | 第50-51页 |
| ·SSR引物扩增验证 | 第51页 |
| ·荧光原位杂交验证 | 第51-52页 |
| ·文库的构建 | 第52页 |
| ·文库的初步分析 | 第52页 |
| ·R基因同源序列的扩增 | 第52-53页 |
| ·Southern验证 | 第53页 |
| ·克隆、酶切归类和测序 | 第53页 |
| ·R基因同源序列的比较和聚类分析 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| ·染色体膜制片的制备 | 第55-56页 |
| ·目标染色体的识别和显微分离 | 第56页 |
| ·单染色体的扩增和验证 | 第56-57页 |
| ·文库的构建及其分析 | 第57页 |
| ·R基因同源序列克隆 | 第57-58页 |
| ·R基因同源序列的聚类分析 | 第58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第四章 棉花DNA纤维FISH技术体系建立及其应用研究 | 第59-72页 |
| ·材料与方法 | 第59-63页 |
| ·材料 | 第59页 |
| ·黄化子叶的准备 | 第59页 |
| ·细胞核的提取 | 第59-60页 |
| ·DNA纤维的制备 | 第60页 |
| ·有丝分裂中期染色体玻璃载片的制备 | 第60页 |
| ·粗线期染色体玻璃载片的制备 | 第60页 |
| ·45S rDNA的提取 | 第60页 |
| ·BAC-DNA的提取 | 第60页 |
| ·端粒序列的获得 | 第60-61页 |
| ·相关探针的标记 | 第61页 |
| ·有丝分裂中期染色体双色荧光原位杂交 | 第61页 |
| ·粗线期染色体双色荧光原位杂交 | 第61-62页 |
| ·DNA纤维双色荧光原位杂交 | 第62页 |
| ·DNA纤维荧光原位杂交 | 第62-63页 |
| ·结果与分析 | 第63-68页 |
| ·细胞核的提取 | 第63-64页 |
| ·DNA纤维的制备 | 第64页 |
| ·粗线期染色体的制备 | 第64-65页 |
| ·45S rDNA和BAC-DNA的提取 | 第65页 |
| ·端粒序列的扩增 | 第65页 |
| ·有丝分裂中期染色体双色荧光原位杂交 | 第65-66页 |
| ·粗线期染色体双色荧光原位杂交 | 第66页 |
| ·DNA纤维双色荧光原位杂交 | 第66-67页 |
| ·DNA纤维荧光原位杂交 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| ·细胞核的提取 | 第68-70页 |
| ·DNA纤维的制备 | 第70页 |
| ·有丝分裂中期染色体双色荧光原位杂交 | 第70页 |
| ·粗线期染色体双色荧光原位杂交 | 第70-71页 |
| ·DNA纤维荧光原位杂交 | 第71页 |
| ·DNA纤维双色荧光原位杂交 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 全文结论 | 第72-88页 |
| ·全文结论 | 第72-73页 |
| ·进一步工作设想 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-88页 |
| 附录 | 第88-95页 |
| 附录1 测序结果 | 第88-89页 |
| 附录2 核苷酸比对结果 | 第89-91页 |
| 附录3 氨基酸序列 | 第91-92页 |
| 附录4 氨基酸比对结果 | 第92-93页 |
| 附录5 相关试剂配制 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 作者简介 | 第96-97页 |