| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩写词 | 第11-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-26页 |
| 1 蛋白质组与蛋白质组学 | 第13-14页 |
| 2 植物蛋白质组学 | 第14-19页 |
| ·植物发育蛋白质组学 | 第15-18页 |
| ·植物组织器官蛋白质组学 | 第15-16页 |
| ·植物亚细胞蛋白组学 | 第16-18页 |
| ·植物生理蛋白质组学 | 第18-19页 |
| 3 植物成花逆转的研究 | 第19-24页 |
| ·植物成花逆转的研究进展 | 第19-20页 |
| ·龙眼成花逆转研究进展 | 第20-24页 |
| ·龙眼的花芽分化 | 第21页 |
| ·龙眼的成花逆转 | 第21-24页 |
| ·影响龙眼成花逆转的因素 | 第22-24页 |
| ·龙眼成花逆转的研究现状 | 第24页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 龙眼成花逆转花芽差异蛋白质组分析 | 第26-60页 |
| 1 试验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26-27页 |
| ·主要生化试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| 2 试验方法 | 第27-33页 |
| ·相关溶液的配置 | 第27-28页 |
| ·酚抽法（Phe）制备蛋白质干粉 | 第28-29页 |
| ·样品处理 | 第29页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第29-30页 |
| ·标准曲线制作 | 第29页 |
| ·蛋白含量测定 | 第29-30页 |
| ·双向凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·第一向固相化pH梯度等电聚焦电泳 | 第30页 |
| ·胶条平衡 | 第30页 |
| ·第二向SDS-PAGE 垂直平板电泳 | 第30-31页 |
| ·染色 | 第31页 |
| ·凝胶扫描及分析 | 第31页 |
| ·差异点的确定 | 第31-32页 |
| ·蛋白质胶内酶解 | 第32页 |
| ·差异蛋白MALDI-TOF-TOF/MS 分析及数据库检索鉴定 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-53页 |
| ·双向电泳基本条件的确定 | 第33-36页 |
| ·蛋白质含量标准曲线 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶浓度选择 | 第33-34页 |
| ·第一向IEF 等电聚焦pH 范围的选择 | 第34-35页 |
| ·上样量的确定 | 第35-36页 |
| ·聚焦时间的确定 | 第36页 |
| ·龙眼正常成花与成花逆转的花芽蛋白质2-DE 差异分析 | 第36-45页 |
| ·成花逆转不同时期花芽蛋白质的2-DE 分析 | 第36-39页 |
| ·正常成花与成花逆转花芽蛋白质的2-DE 分析 | 第39-45页 |
| ·龙眼花芽差异蛋白MALDI-TOF-TOF / MS 鉴定 | 第45-53页 |
| 4 讨论 | 第53-59页 |
| ·物质和能量的代谢相关蛋白 | 第53-55页 |
| ·转录和翻译相关蛋白 | 第55-56页 |
| ·次生代谢相关蛋白 | 第56-57页 |
| ·调控相关蛋白 | 第57页 |
| ·胁迫相关蛋白 | 第57-58页 |
| ·细胞骨架 | 第58页 |
| ·其他蛋白 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 第三章 龙眼成花逆转相关基因的克隆与表达分析 | 第60-103页 |
| 1 试验材料 | 第60-62页 |
| ·植物材料 | 第60页 |
| ·菌株、载体、酶及各种试剂 | 第60页 |
| ·主要仪器设备 | 第60-62页 |
| 2 试验方法 | 第62-73页 |
| ·总RNA 提取纯化 | 第62页 |
| ·SDS 法提取龙眼花芽总RNA | 第62页 |
| ·总 RNA 纯度的测定 | 第62页 |
| ·目的基因保守区克隆 | 第62-65页 |
| ·cDNA 合成 | 第62-63页 |
| ·RT-PCR | 第63-64页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第64页 |
| ·目的片段与T 载体的连接转化及鉴定 | 第64-65页 |
| ·RACE | 第65-67页 |
| ·cDNA 合成 | 第65-66页 |
| ·RT-PCR | 第66-67页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第67页 |
| ·目的片段与T 载体的连接转化及鉴定 | 第67页 |
| ·序列分析 | 第67页 |
| ·目的基因 ORF 克隆 | 第67页 |
| ·半定量 RT-PCR | 第67-68页 |
| ·RNA 定量 | 第67-68页 |
| ·RT-PCR | 第68页 |
| ·目的基因原核表达 | 第68-72页 |
| ·目的基因全开放阅读框的克隆 | 第68-69页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第69页 |
| ·质粒载体的提取 | 第69-70页 |
| ·BL21 感受态细胞制备 | 第70页 |
| ·表达载体构建 | 第70-71页 |
| ·目的基因转化 BL21 | 第71页 |
| ·IPTG诱导目的基因表达 | 第71页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE | 第71-72页 |
| ·Western blotting | 第72-73页 |
| ·相关溶液配制 | 第72页 |
| ·目的蛋白的SDS－PAGE | 第72页 |
| ·目的蛋白电转移 | 第72页 |
| ·免疫反应 | 第72-73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-99页 |
| ·目的基因全长cDNA 的克隆及序列分析 | 第73-89页 |
| ·花芽总RNA 质量 | 第73页 |
| ·α-微管蛋白(α-tublin)全长 cDNA 的克隆及序列分析 | 第73-77页 |
| ·花青素合酶(anthocyanidin synthase ANS)全长 cDNA 克隆及序列分析 | 第77-81页 |
| ·14-3-3 全长cDNA 克隆及序列分析 | 第81-85页 |
| ·转醛醇酶(transaldolase TAL)全长 cDNA 克隆及序列分析 | 第85-89页 |
| ·目的基因在正常成花与成花逆转花芽中的RT-PCR分析 | 第89-92页 |
| ·目的基因在E.coli 中的表达 | 第92-97页 |
| ·α-tublin 在E.coli 中的表达 | 第92-93页 |
| ·ANS 在E.coli 中的表达 | 第93-94页 |
| ·14-3-3 在E.coli 中的表达 | 第94-96页 |
| ·TAL 在E.coli 中的表达 | 第96-97页 |
| ·Western blotting | 第97-99页 |
| ·Western blotting 鉴定α-tublin 表达 | 第97-98页 |
| ·Western blotting 鉴定14-3-3 表达 | 第98-99页 |
| 4 讨论 | 第99-102页 |
| 5 结论 | 第102-103页 |
| 展望 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 附图1 | 第116-117页 |
| 附录1 | 第117-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
