| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-34页 |
| 1 猪传染性胸膜肺炎的流行危害 | 第11-12页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎流行现状 | 第11页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎危害 | 第11-12页 |
| 2 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病原学 | 第12-21页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌分类、理化性质及生长特性 | 第12-13页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌抗原与血清型 | 第13-14页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子致病性及免疫原性研究进展 | 第14-17页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌致病机理 | 第17-18页 |
| ·诊断方法 | 第18-21页 |
| 3 胸膜肺炎放线杆菌毒素研究进展 | 第21-27页 |
| ·毒素的名称和种类 | 第22页 |
| ·毒素分泌、基因结构、表达与调控及其作用 | 第22-27页 |
| 4 猪传染性胸膜肺炎免疫预防 | 第27-33页 |
| ·灭活疫苗 | 第28页 |
| ·亚单位疫苗 | 第28-29页 |
| ·GHOSTS疫苗 | 第29页 |
| ·口服疫苗 | 第29-30页 |
| ·弱毒疫苗 | 第30-33页 |
| 5 研究的目的与意义 | 第33-34页 |
| 第二章 重组转移载体PBSLNKAR的构建 | 第34-67页 |
| 1 材料 | 第34-36页 |
| ·细菌菌株 | 第34页 |
| ·质粒与载体 | 第34页 |
| ·主要药品及试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-36页 |
| 2 右同源臂,APXIANS、APXIAC和卡那霉素基因的TA克隆 | 第36-47页 |
| ·右同源臂的克隆 | 第36-41页 |
| ·APP-1 APXIANS的扩增及TA克隆 | 第41-43页 |
| ·APXIAC的扩增及克隆 | 第43-45页 |
| ·卡那霉素抗性基因的扩增及克隆 | 第45-47页 |
| 3 同源重组载体PBSLNKAR的构建 | 第47-55页 |
| ·PBSLN载体的构建 | 第47-49页 |
| ·PBSLNA载体的构建 | 第49-51页 |
| ·PBSLNKA质粒的构建 | 第51-53页 |
| ·PBSLNKAR质粒的构建 | 第53-55页 |
| 4 左同源臂、APP-1APXIN基因、卡那霉素抗性基因、APXIAC和右同源臂的PCR扩增结果 | 第55-58页 |
| ·左同源臂的PCR扩增 | 第56页 |
| ·卡那霉素抗性基因的PCR扩增 | 第56页 |
| ·右同源臂的PCR扩增 | 第56-58页 |
| ·APP-1 APXINS基因的PCR扩增 | 第58页 |
| ·APP-1 APXIAC基因的PCR扩增 | 第58页 |
| 5 重组转移载体PBSLNKAR的构建结果 | 第58-65页 |
| ·APP-1 APXINS、卡那霉素抗性基因、APXIAC基因和右同源臂的TA克隆 | 第58-62页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第62-65页 |
| 6 讨论 | 第65-67页 |
| ·重组转移载体PBSLNKAR的构建 | 第65-67页 |
| 第三章 APXIIC~-/APXIN~+基因缺失减毒株的构建 | 第67-78页 |
| 1 材料 | 第67-68页 |
| ·细菌菌株 | 第67页 |
| ·质粒与载体 | 第67页 |
| ·主要药品及试剂 | 第67页 |
| ·实验动物 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67-68页 |
| 2 方法 | 第68-69页 |
| ·重组转移载体PBSLNKAR的电转化 | 第68-69页 |
| ·基因缺失减毒株的筛选鉴定 | 第69页 |
| 3 实验结果 | 第69-72页 |
| ·卡那霉素抗性试验 | 第70页 |
| ·NAD依赖性试验 | 第70页 |
| ·溶血活性鉴定 | 第70页 |
| ·PCR鉴定 | 第70-71页 |
| ·突变株对小白鼠的致死性试验 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-78页 |
| ·基因缺失减毒株APXIIC-/KANR+的生物安全性 | 第72-73页 |
| ·亲本株、缺失基因及引入的保护性基因的选择 | 第73-75页 |
| ·重组转移载体PBSLNKAR的构建 | 第75-76页 |
| ·电转化的条件探索 | 第76-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
