摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-45页 |
·小麦条锈病 | 第19-23页 |
·小麦条锈病的危害 | 第19页 |
·小麦条锈病的研究现状 | 第19-23页 |
·植物与病原菌互作研究 | 第23-30页 |
·信号分子的产生和识别 | 第24-25页 |
·细胞内的信号转导 | 第25-28页 |
·防卫反应的启动 | 第28-29页 |
·寄主-锈菌互作研究 | 第29-30页 |
·功能基因组学研究进展 | 第30-36页 |
·功能基因组学 | 第30-31页 |
·功能基因组学研究技术 | 第31-36页 |
·病毒诱导的基因沉默(VIGS) | 第36-43页 |
·VIGS的分子机制 | 第36-37页 |
·VIGS病毒载体的开发 | 第37-40页 |
·VIGS在功能基因组学研究中的应用 | 第40-42页 |
·VIGS在植物基因功能研究中的应用 | 第42-43页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第43-45页 |
·目的意义 | 第43-44页 |
·技术路线 | 第44-45页 |
第二章 小麦与条锈菌互作的cDNA-AFLP表达谱分析 | 第45-87页 |
·引言 | 第45页 |
·材料、仪器与试剂 | 第45-46页 |
·主要仪器与试剂 | 第45-46页 |
·材料 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-62页 |
·接种和培养 | 第46页 |
·样品采集 | 第46-47页 |
·条锈菌侵染过程观察 | 第47页 |
·总RNA提取及mRNA纯化 | 第47-49页 |
·cDNA-AFLP表达谱分析 | 第49-53页 |
·cDNA-AFLP差异片段回收 | 第53-54页 |
·差异片段二次PCR扩增及琼脂糖凝胶回收 | 第54页 |
·差异片段的克隆 | 第54-56页 |
·差异表达基因片段序列测定 | 第56-57页 |
·差异表达基因片段序列分析 | 第57-58页 |
·qRT-PCR验证cDNA-AFLP基因表达谱 | 第58-62页 |
·结果与分析 | 第62-82页 |
·反应型鉴定 | 第62-64页 |
·小麦条锈菌侵染过程观察 | 第64-65页 |
·小麦叶片总RNA提取 | 第65页 |
·RNA浓度及纯度鉴定 | 第65-66页 |
·mRNA质量检测 | 第66页 |
·cDNA-AFLP 分析 | 第66-70页 |
·ESTs序列分析 | 第70-82页 |
·讨论 | 第82-87页 |
第三章 条锈菌诱导的小麦蛋白激酶类基因的克隆及表达谱分析 | 第87-116页 |
·前言 | 第87-89页 |
·材料、试剂及仪器 | 第89页 |
·实验方法 | 第89-92页 |
·材料准备 | 第89页 |
·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK,TaCDPK基因的克隆 | 第89-91页 |
·生物信息学分析 | 第91页 |
·qRT-PCR分析 | 第91-92页 |
·结果与分析 | 第92-98页 |
·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK基因克隆及相似性分析 | 第92-93页 |
·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK编码蛋白的功能位点及结构域分析 | 第93页 |
·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK编码蛋白的跨膜结构及亚细胞定位预测 | 第93-96页 |
·氨基酸多序列比对及进化树构建 | 第96-97页 |
·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK基因的表达谱分析 | 第97-98页 |
·结论与讨论 | 第98-116页 |
第四章 利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)分析条锈菌诱导的小麦蛋白激酶类基因的功能 | 第116-134页 |
·前言 | 第116-117页 |
·材料、试剂及仪器 | 第117-118页 |
·材料 | 第117页 |
·试剂 | 第117页 |
·仪器 | 第117-118页 |
·实验方法 | 第118-122页 |
·候选差异表达基因片段 | 第118页 |
·VIGS载体的构建 | 第118-121页 |
·候选基因的VIGS分析 | 第121-122页 |
·结果与分析 | 第122-131页 |
·候选基因的VIGS载体构建 | 第122页 |
·体外转录 | 第122-124页 |
·重组病毒及小麦条锈菌接种及组织学观察 | 第124-131页 |
·结论与讨论 | 第131-134页 |
第五章 条锈菌诱导的小麦PR1b、PR5 及PR10b基因的克隆及其表达调控分析 | 第134-162页 |
·引言 | 第134-135页 |
·材料、试剂及仪器 | 第135页 |
·实验方法 | 第135-142页 |
·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b基因的克隆 | 第135-137页 |
·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b的序列分析 | 第137页 |
·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b在条锈菌及激素诱导下的表达谱分析 | 第137页 |
·TaPR5 的原核表达 | 第137-140页 |
·抗体制备 | 第140页 |
·效价检测 | 第140-141页 |
·Western blot 分析 | 第141页 |
·TaPR5 蛋白免疫细胞化学定位 | 第141页 |
·TaPR5 的亚细胞定位分析 | 第141-142页 |
·结果与分析 | 第142-158页 |
·TaPR1b, TaPR5 和TaPR10b的克隆及分析 | 第142-146页 |
·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b的序列分析 | 第146-151页 |
·TaPR1b、TaPR5、及TaPR10b基因的表达分析 | 第151-154页 |
·TaPR5 基因的原核表达 | 第154-158页 |
·结论与讨论 | 第158-162页 |
第六章 小麦与条锈菌互作中与过敏性反应(HR)相关基因的克隆及功能分析 | 第162-187页 |
·引言 | 第162-165页 |
·材料、试剂及仪器 | 第165页 |
·实验方法 | 第165-167页 |
·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS基因的克隆 | 第165-166页 |
·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS的序列分析 | 第166页 |
·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS的表达谱分析 | 第166页 |
·TaPrx的原核表达 | 第166-167页 |
·TaBI-1、TaDAD2 及TaLLS基因的功能分析 | 第167页 |
·结果与分析 | 第167-181页 |
·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx和TaELMO基因的克隆 | 第167页 |
·TaLLS基因的克隆 | 第167-171页 |
·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS的序列分析 | 第171-177页 |
·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS基因的表达分析 | 第177页 |
·TaPrx基因的原核表达及western分析 | 第177-178页 |
·TaBI-1、TaDAD2 及TaLLS基因的功能分析 | 第178-181页 |
·结论与讨论 | 第181-187页 |
全文结论 | 第187-190页 |
参考文献 | 第190-217页 |
附件 | 第217-242页 |
致谢 | 第242-243页 |
作者简介 | 第243-244页 |