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小麦与条锈菌互作机理研究及抗条锈相关基因的功能分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-19页
第一章 文献综述第19-45页
   ·小麦条锈病第19-23页
     ·小麦条锈病的危害第19页
     ·小麦条锈病的研究现状第19-23页
   ·植物与病原菌互作研究第23-30页
     ·信号分子的产生和识别第24-25页
     ·细胞内的信号转导第25-28页
     ·防卫反应的启动第28-29页
     ·寄主-锈菌互作研究第29-30页
   ·功能基因组学研究进展第30-36页
     ·功能基因组学第30-31页
     ·功能基因组学研究技术第31-36页
   ·病毒诱导的基因沉默(VIGS)第36-43页
     ·VIGS的分子机制第36-37页
     ·VIGS病毒载体的开发第37-40页
     ·VIGS在功能基因组学研究中的应用第40-42页
     ·VIGS在植物基因功能研究中的应用第42-43页
   ·本研究的目的意义和技术路线第43-45页
     ·目的意义第43-44页
     ·技术路线第44-45页
第二章 小麦与条锈菌互作的cDNA-AFLP表达谱分析第45-87页
   ·引言第45页
   ·材料、仪器与试剂第45-46页
     ·主要仪器与试剂第45-46页
     ·材料第46页
   ·实验方法第46-62页
     ·接种和培养第46页
     ·样品采集第46-47页
     ·条锈菌侵染过程观察第47页
     ·总RNA提取及mRNA纯化第47-49页
     ·cDNA-AFLP表达谱分析第49-53页
     ·cDNA-AFLP差异片段回收第53-54页
     ·差异片段二次PCR扩增及琼脂糖凝胶回收第54页
     ·差异片段的克隆第54-56页
     ·差异表达基因片段序列测定第56-57页
     ·差异表达基因片段序列分析第57-58页
     ·qRT-PCR验证cDNA-AFLP基因表达谱第58-62页
   ·结果与分析第62-82页
     ·反应型鉴定第62-64页
     ·小麦条锈菌侵染过程观察第64-65页
     ·小麦叶片总RNA提取第65页
     ·RNA浓度及纯度鉴定第65-66页
     ·mRNA质量检测第66页
     ·cDNA-AFLP 分析第66-70页
     ·ESTs序列分析第70-82页
   ·讨论第82-87页
第三章 条锈菌诱导的小麦蛋白激酶类基因的克隆及表达谱分析第87-116页
   ·前言第87-89页
   ·材料、试剂及仪器第89页
   ·实验方法第89-92页
     ·材料准备第89页
     ·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK,TaCDPK基因的克隆第89-91页
     ·生物信息学分析第91页
     ·qRT-PCR分析第91-92页
   ·结果与分析第92-98页
     ·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK基因克隆及相似性分析第92-93页
     ·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK编码蛋白的功能位点及结构域分析第93页
     ·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK编码蛋白的跨膜结构及亚细胞定位预测第93-96页
     ·氨基酸多序列比对及进化树构建第96-97页
     ·TaRLK,TaCIPK,TaLRR-RLK,TaSTK和TaCDPK基因的表达谱分析第97-98页
   ·结论与讨论第98-116页
第四章 利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)分析条锈菌诱导的小麦蛋白激酶类基因的功能第116-134页
   ·前言第116-117页
   ·材料、试剂及仪器第117-118页
     ·材料第117页
     ·试剂第117页
     ·仪器第117-118页
   ·实验方法第118-122页
     ·候选差异表达基因片段第118页
     ·VIGS载体的构建第118-121页
     ·候选基因的VIGS分析第121-122页
   ·结果与分析第122-131页
     ·候选基因的VIGS载体构建第122页
     ·体外转录第122-124页
     ·重组病毒及小麦条锈菌接种及组织学观察第124-131页
   ·结论与讨论第131-134页
第五章 条锈菌诱导的小麦PR1b、PR5 及PR10b基因的克隆及其表达调控分析第134-162页
   ·引言第134-135页
   ·材料、试剂及仪器第135页
   ·实验方法第135-142页
     ·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b基因的克隆第135-137页
     ·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b的序列分析第137页
     ·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b在条锈菌及激素诱导下的表达谱分析第137页
     ·TaPR5 的原核表达第137-140页
     ·抗体制备第140页
     ·效价检测第140-141页
     ·Western blot 分析第141页
     ·TaPR5 蛋白免疫细胞化学定位第141页
     ·TaPR5 的亚细胞定位分析第141-142页
   ·结果与分析第142-158页
     ·TaPR1b, TaPR5 和TaPR10b的克隆及分析第142-146页
     ·TaPR1b、TaPR5 及TaPR10b的序列分析第146-151页
     ·TaPR1b、TaPR5、及TaPR10b基因的表达分析第151-154页
     ·TaPR5 基因的原核表达第154-158页
   ·结论与讨论第158-162页
第六章 小麦与条锈菌互作中与过敏性反应(HR)相关基因的克隆及功能分析第162-187页
   ·引言第162-165页
   ·材料、试剂及仪器第165页
   ·实验方法第165-167页
     ·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS基因的克隆第165-166页
     ·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS的序列分析第166页
     ·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS的表达谱分析第166页
     ·TaPrx的原核表达第166-167页
     ·TaBI-1、TaDAD2 及TaLLS基因的功能分析第167页
   ·结果与分析第167-181页
     ·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx和TaELMO基因的克隆第167页
     ·TaLLS基因的克隆第167-171页
     ·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS的序列分析第171-177页
     ·TaBI-1、TaDAD2、TaPrx、TaELMO及TaLLS基因的表达分析第177页
     ·TaPrx基因的原核表达及western分析第177-178页
     ·TaBI-1、TaDAD2 及TaLLS基因的功能分析第178-181页
   ·结论与讨论第181-187页
全文结论第187-190页
参考文献第190-217页
附件第217-242页
致谢第242-243页
作者简介第243-244页

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