| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第1章 引言 | 第8-28页 |
| ·FocA | 第8-10页 |
| ·甲酸在细胞内的代谢 | 第8-9页 |
| ·甲酸转运蛋白FocA | 第9-10页 |
| ·结构生物学 | 第10-20页 |
| ·蛋白质三维结构的测定方法 | 第11-12页 |
| ·X 射线晶体学 | 第12-20页 |
| ·X 射线晶体学概述 | 第12-13页 |
| ·X 射线晶体学解析蛋白质三维结构 | 第13-20页 |
| ·膜蛋白 | 第20-28页 |
| ·膜蛋白概述 | 第20页 |
| ·膜转运蛋白的功能和分类 | 第20-24页 |
| ·膜蛋白结构生物学研究现状 | 第24-28页 |
| ·研究进展概述 | 第24-25页 |
| ·膜蛋白结构解析的瓶颈 | 第25-28页 |
| 第2章 FocA 分子结构和功能机制的研究方法 | 第28-51页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建 | 第28-31页 |
| ·实验材料与仪器 | 第28-29页 |
| ·实验步骤 | 第29-31页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第31-34页 |
| ·实验材料与仪器 | 第31页 |
| ·实验步骤 | 第31-34页 |
| ·FocA 重组蛋白在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·裂解细胞 | 第32页 |
| ·膜组分的分离 | 第32页 |
| ·膜蛋白的抽提 | 第32页 |
| ·亲和层析 | 第32-33页 |
| ·分子筛层析 | 第33页 |
| ·蛋白的浓缩及定量 | 第33-34页 |
| ·结晶条件的筛选与晶体优化 | 第34-42页 |
| ·结晶条件筛选 | 第34-36页 |
| ·晶体优化 | 第36-38页 |
| ·重原子衍生型晶体的获得 | 第38-40页 |
| ·实验材料与仪器 | 第40页 |
| ·实验步骤 | 第40-42页 |
| ·悬滴法长晶体的基本步骤 | 第40页 |
| ·结晶条件筛选和优化的基本流程 | 第40-41页 |
| ·重原子浸泡法基本步骤 | 第41-42页 |
| ·数据收集与结构解析 | 第42-43页 |
| ·功能机制的体外研究 | 第43-51页 |
| ·脂质体 | 第43-46页 |
| ·停流仪实验 | 第46-48页 |
| ·实验材料和仪器 | 第48-49页 |
| ·实验步骤 | 第49-51页 |
| ·重组脂质体的制备步骤 | 第49页 |
| ·水分子通透性的检测 | 第49-50页 |
| ·甲酸分子通透性的检测 | 第50-51页 |
| 第3章 FocA 分子结构和功能机制的研究结果与分析 | 第51-81页 |
| ·FocA 重组蛋白的表达与纯化 | 第51-53页 |
| ·FocA 的结晶条件的筛选与优化 | 第53-59页 |
| ·全长FocA 晶体的初筛 | 第53-54页 |
| ·全长FocA 晶体的优化 | 第54-55页 |
| ·V8 处理后FocA 晶体的筛选与优化 | 第55-57页 |
| ·重原子衍生型晶体的获得 | 第57-59页 |
| ·FocA 的晶体结构和功能机制分析 | 第59-81页 |
| ·FocA 整体结构 | 第62-64页 |
| ·FocA 单体的结构 | 第64-68页 |
| ·与水通道蛋白的结构相似性 | 第68-72页 |
| ·通道沿途的氨基酸残基 | 第72-74页 |
| ·限制性位点 | 第74-76页 |
| ·水分子和甲酸通透性的检测 | 第76-78页 |
| ·讨论与展望 | 第78-81页 |
| 第4章 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第86页 |