| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-22页 |
| 1 古菌概述 | 第9-10页 |
| 2 RNase H研究进展 | 第10-21页 |
| ·RNase H的发现、类型及在生命体中的作用 | 第10-12页 |
| ·古菌中RNase H的研究进展 | 第12-15页 |
| ·RNase H的酶活性特征 | 第15-21页 |
| ·RNase H的催化机制 | 第15-16页 |
| ·金属离子对RNase H活性的影响 | 第16-19页 |
| ·RNase H中的保守氨基酸位点 | 第19-21页 |
| 3 研究内容、目的和意义 | 第21-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第21页 |
| ·研究思路和内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-30页 |
| 1 材料 | 第22-26页 |
| ·供试菌株 | 第22页 |
| ·酶、试剂和试剂盒 | 第22页 |
| ·供试抗生素 | 第22页 |
| ·引物及寡核苷酸 | 第22-24页 |
| ·供试质粒 | 第24-25页 |
| ·其余缓冲液、试剂 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| ·分子生物学基本操作 | 第26页 |
| ·融合蛋白的亲和纯化 | 第26-28页 |
| ·大肠杆菌BL21-CondonPlus感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·表达质粒的构建与转化 | 第27-28页 |
| ·蛋白的透析 | 第28页 |
| ·Bradford测定蛋白质浓度 | 第28页 |
| ·酶活性测定变性胶检测反应产物 | 第28-30页 |
| 第三章 结果与分析 | 第30-42页 |
| 1 ST0519基因的克隆、蛋白质纯化、活性检测 | 第30-34页 |
| ·ST0519基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·ST0519基因从基因组的扩增 | 第30页 |
| ·ST0519基因克隆载体的转化与验证 | 第30-31页 |
| ·ST0519蛋白质表达纯化 | 第31-32页 |
| ·野生型蛋白质的活性分析 | 第32-34页 |
| ·野生型蛋白质作用的底物 | 第32-33页 |
| ·温度、不同金属离子及浓度对蛋白质活性的影响 | 第33-34页 |
| 2 ST0519基因突变体载体的构建、蛋白质纯化和活性分析 | 第34-42页 |
| ·ST0519突变体基因克隆 | 第35页 |
| ·ST0519突变体蛋白质结构域和突变位点总结 | 第35-36页 |
| ·ST0519突变体蛋白质纯化 | 第36-37页 |
| ·突变体蛋白质活性分析 | 第37-40页 |
| ·蛋白质三维结构模拟 | 第40-42页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第42-45页 |
| 1 总结 | 第42页 |
| 2. 讨论 | 第42-45页 |
| ·ST0519的基本特征研究 | 第42-43页 |
| ·ST0519关键氨基酸位点的鉴定 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 发表论文情况 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |