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食酸菌属中三价砷氧化细菌As(Ⅲ)氧化酶基因和调控基因的功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略名词及重要蛋白注释表第10-11页
1 前言第11-21页
   ·砷和砷的化合物第11-12页
   ·砷的用途及危害第12页
   ·砷污染现状第12-13页
   ·微生物对砷的代谢作用第13-19页
     ·微生物的As(V)还原第13-15页
     ·微生物的三价砷甲基化第15页
     ·微生物的三价砷氧化第15-19页
   ·砷污染的微生物修复第19-20页
   ·研究目的和意义第20-21页
2 材料和方法第21-35页
   ·菌株与质粒第21-22页
   ·培养基、试剂和抗生素第22-24页
   ·样品来源第24页
   ·三价砷氧化菌的分离和筛选第24页
   ·三价砷氧化菌16S rRNA基因扩增和测序第24-26页
     ·细菌总DNA的抽提第24-25页
     ·16S rRNA基因扩增第25页
     ·CaCl_2制备大肠杆菌感受态细胞第25页
     ·16S rRNA基因PCR产物TA克隆第25-26页
   ·三价砷氧化菌的三价砷和重金属离子最小抑制浓度(MIC)第26页
   ·三价砷氧化酶基因部分片段扩增第26页
   ·分离三价砷氧化酶基因簇序列第26-29页
     ·GW2三价砷氧化酶基因簇第26-28页
     ·NO1三价砷氧化酶基因簇第28-29页
   ·菌株三价砷氧化相关基因的敲除第29-33页
     ·构建敲除载体第29-31页
     ·GW2和NO1具有利福平抗性的突变菌株筛选第31页
     ·三价砷氧化相关基因的敲除菌株筛选第31-32页
     ·互补实验第32-33页
   ·细菌三价砷氧化能力测定第33-34页
   ·三价砷氧化酶基因簇的表达第34-35页
     ·GW2菌株总RNA的提取第34页
     ·GW2菌株总RNA反转录第34-35页
     ·三价砷氧化酶基因簇的表达第35页
   ·基因注释及序列分析第35页
3 结果与分析第35-48页
   ·菌种的分离和鉴定第35-36页
   ·三价砷氧化菌的三价砷和重金属离子最小抑制浓度(MIC)第36-37页
   ·三价砷氧化酶基因簇序列测定第37-40页
     ·三价砷氧化酶基因部分片段序列第37-38页
     ·GW2三价砷氧化酶基因完整序列第38-39页
     ·NO1菌三价砷氧化酶基因序列第39-40页
   ·基因注释与分析第40-43页
   ·三价砷氧化相关基因的敲除第43-45页
   ·互补实验第45-46页
   ·野生型和基因突变型菌株三价砷氧化曲线第46-47页
   ·GW2菌株基因共转录分析第47-48页
4 讨论与展望第48-51页
参考文献第51-60页
致谢第60页

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