摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略名词及重要蛋白注释表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·砷和砷的化合物 | 第11-12页 |
·砷的用途及危害 | 第12页 |
·砷污染现状 | 第12-13页 |
·微生物对砷的代谢作用 | 第13-19页 |
·微生物的As(V)还原 | 第13-15页 |
·微生物的三价砷甲基化 | 第15页 |
·微生物的三价砷氧化 | 第15-19页 |
·砷污染的微生物修复 | 第19-20页 |
·研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料和方法 | 第21-35页 |
·菌株与质粒 | 第21-22页 |
·培养基、试剂和抗生素 | 第22-24页 |
·样品来源 | 第24页 |
·三价砷氧化菌的分离和筛选 | 第24页 |
·三价砷氧化菌16S rRNA基因扩增和测序 | 第24-26页 |
·细菌总DNA的抽提 | 第24-25页 |
·16S rRNA基因扩增 | 第25页 |
·CaCl_2制备大肠杆菌感受态细胞 | 第25页 |
·16S rRNA基因PCR产物TA克隆 | 第25-26页 |
·三价砷氧化菌的三价砷和重金属离子最小抑制浓度(MIC) | 第26页 |
·三价砷氧化酶基因部分片段扩增 | 第26页 |
·分离三价砷氧化酶基因簇序列 | 第26-29页 |
·GW2三价砷氧化酶基因簇 | 第26-28页 |
·NO1三价砷氧化酶基因簇 | 第28-29页 |
·菌株三价砷氧化相关基因的敲除 | 第29-33页 |
·构建敲除载体 | 第29-31页 |
·GW2和NO1具有利福平抗性的突变菌株筛选 | 第31页 |
·三价砷氧化相关基因的敲除菌株筛选 | 第31-32页 |
·互补实验 | 第32-33页 |
·细菌三价砷氧化能力测定 | 第33-34页 |
·三价砷氧化酶基因簇的表达 | 第34-35页 |
·GW2菌株总RNA的提取 | 第34页 |
·GW2菌株总RNA反转录 | 第34-35页 |
·三价砷氧化酶基因簇的表达 | 第35页 |
·基因注释及序列分析 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-48页 |
·菌种的分离和鉴定 | 第35-36页 |
·三价砷氧化菌的三价砷和重金属离子最小抑制浓度(MIC) | 第36-37页 |
·三价砷氧化酶基因簇序列测定 | 第37-40页 |
·三价砷氧化酶基因部分片段序列 | 第37-38页 |
·GW2三价砷氧化酶基因完整序列 | 第38-39页 |
·NO1菌三价砷氧化酶基因序列 | 第39-40页 |
·基因注释与分析 | 第40-43页 |
·三价砷氧化相关基因的敲除 | 第43-45页 |
·互补实验 | 第45-46页 |
·野生型和基因突变型菌株三价砷氧化曲线 | 第46-47页 |
·GW2菌株基因共转录分析 | 第47-48页 |
4 讨论与展望 | 第48-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
致谢 | 第60页 |