摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1. A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)概述 | 第13-16页 |
·流感病毒的分类与命名 | 第13页 |
·A型流感病毒的基因组结构及编码蛋白 | 第13-15页 |
·禽流感病毒及其危害 | 第15-16页 |
2. 禽流感病毒的变异及其公共卫生学意义 | 第16-25页 |
·AIV与人类历史上的流感大流行 | 第16-17页 |
·H5、H7和H9亚型的AIV直接感染人事件 | 第17-20页 |
·AIV的变异机制 | 第20-21页 |
·与AIV致病性和宿主范围的扩大相关的机制 | 第21-24页 |
·集约化的养殖方式加速了AIV的变异 | 第24-25页 |
第二章 鸡源H9N2亚型禽流感病毒的系统进化和HA抗原性分析 | 第25-68页 |
1. 引言 | 第25-26页 |
2. 材料 | 第26-29页 |
·H9亚型AIV分离毒株 | 第26-27页 |
·阳性血清和质粒 | 第27页 |
·SPF鸡胚和SPF鸡 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27-28页 |
·试剂配制 | 第28页 |
·主要试剂试剂配制 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
3. 方法 | 第29-36页 |
·鸡源H9亚型禽流感病毒株的鉴定和纯化 | 第29页 |
·H9亚型禽流感分离株的基本生物学特性 | 第29页 |
·H9亚型AIV全基因组序列扩增的RT-PCR引物设计 | 第29-31页 |
·禽流感病毒分离株全基因组的序列测定及系统进化分析 | 第31-35页 |
·禽流感病毒分离株HA抗原相关性分析 | 第35-36页 |
4. 结果和讨论 | 第36-66页 |
·H9亚型禽流感病毒的基本生物学特性 | 第36-37页 |
·H9毒株的克隆测序和系统进化分析 | 第37-53页 |
·H9N2分离毒株的推导氨基酸序列的分子特征 | 第53-55页 |
·H9N2分离毒株的基因型分析 | 第55-60页 |
·A型流感病毒PB1-F2蛋白的系统进化分析 | 第60-65页 |
·AIV分离毒株的交叉血凝抑制试验结果和分析 | 第65-66页 |
5. 小结 | 第66-68页 |
第三章 禽流感病毒NA亚型分型的荧光定量RT-PCR方法研究 | 第68-90页 |
1. 引言 | 第68-69页 |
2. 材料 | 第69-70页 |
·毒株、载体和感受态细胞 | 第69页 |
·主要试剂、载体和材料 | 第69页 |
·主要仪器设备 | 第69-70页 |
·生物学软件 | 第70页 |
3. 方法 | 第70-76页 |
·禽流感病毒NA分型引物的设计及RT-PCR扩增 | 第70页 |
·各NA亚型AIV基因组RNA的提取,RT-PCR扩增和克隆 | 第70-73页 |
·荧光定量PCR(R-PCR)验证NA分型引物的特异性 | 第73-74页 |
·荧光定量RT-PCR(RRT-PCR) | 第74-76页 |
4. 结果与分析 | 第76-87页 |
·NA克隆和R-PCR的结果 | 第76-78页 |
·Primer Pool和使用R-PCR检测NA分型引物特异性的结果 | 第78-83页 |
·体外转录RNA的浓度和拷贝数 | 第83页 |
·一步法荧光定量RT-PCR的灵敏度和特异性试验结果 | 第83-87页 |
5. 讨论 | 第87-88页 |
6. 小结 | 第88-90页 |
本研究的主要创新点 | 第90-91页 |
结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-106页 |
附件1 | 第106-107页 |
附件2 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
攻读学位期间发表的学位论文目录 | 第109页 |