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桦褐孔菌多糖纯化、结构及其抗肿瘤机制研究

缩写符号说明第1-5页
摘要第5-7页
Abstract第7-15页
第一章 绪论第15-34页
   ·桦褐孔菌概况第15-19页
     ·桦褐孔菌的分布、形态特征第15-16页
     ·桦褐孔菌的生物学特性第16页
     ·桦褐孔菌的化学成分第16-17页
     ·桦褐孔菌的药用价值第17-18页
     ·桦褐孔菌民间利用的历史和现状第18-19页
   ·桦褐孔菌多糖的研究现状第19-21页
     ·桦褐孔菌多糖的提取方法第19-20页
     ·药理作用第20-21页
   ·多糖抗肿瘤机制研究进展第21-24页
     ·免疫调节作用第21-22页
     ·对肿瘤细胞的直接抑制作用第22页
     ·抑制肿瘤细胞蛋白质和核酸的合成第22页
     ·诱导肿瘤细胞凋亡第22-23页
     ·影响癌基因的表达第23页
     ·改变肿瘤细胞膜的生长特性第23页
     ·对肿瘤细胞端粒酶的影响第23-24页
     ·抗氧化、清除自由基的作用第24页
   ·立题背景与意义第24-25页
   ·本论文研究的主要内容第25页
 参考文献第25-34页
第二章 桦褐孔菌多糖提取工艺研究第34-53页
   ·引言第34-35页
   ·材料与仪器第35页
     ·材料第35页
     ·主要试剂第35页
     ·主要仪器第35页
   ·试验方法第35-40页
     ·桦褐孔菌的化学组成分析第35页
     ·原料预处理第35页
     ·IOP提取工艺流程第35-36页
     ·水浸提IOP条件的正交试验设计第36页
     ·超声-微波辅助提取IOP第36-37页
     ·超声-微波辅助提取优化试验第37-38页
     ·IOP的得率、纯度计算第38页
     ·多糖的保留率计算第38页
     ·蛋白质的脱除率计算第38页
     ·脱色率计算第38页
     ·传统水浸提与超声-微波辅助提取的比较第38页
     ·多糖粗提物的初步纯化第38-40页
     ·IOP的紫外-可见光谱分析第40页
     ·数据统计分析第40页
   ·结果与讨论第40-50页
     ·桦褐孔菌的化学组成分析第40页
     ·水浸提条件的正交试验优化结果第40-41页
     ·水浸提验证试验第41页
     ·响应曲面试验设计与试验结果第41-42页
     ·拟合模型的建立第42-43页
     ·回归模型检验第43-45页
     ·回归方程的优化第45-46页
     ·最佳工艺条件的确定第46-47页
     ·超声-微波辅助提取与水浸提法的比较第47-48页
     ·脱蛋白方法的比较第48页
     ·脱色材料的选择第48-49页
     ·聚酰胺色谱柱对IOP中蛋白质的脱除效果(紫外-可见光谱分析)第49-50页
   ·本章小结第50页
 参考文献第50-53页
第三章 桦褐孔菌粗多糖的理化性质及其抗肿瘤活性评价第53-66页
   ·引言第53页
   ·材料与仪器第53-54页
     ·试验材料第53页
     ·主要试剂第53页
     ·主要试验仪器第53-54页
   ·试验方法第54-56页
     ·多糖理化性质第54页
     ·多糖化学组分分析第54页
     ·单糖组成分析第54-55页
     ·IOP的相对分子质量分布测定第55页
     ·IOP溶液黏度性质第55页
     ·IOP的抗肿瘤活性评价第55-56页
     ·数据统计分析第56页
   ·结果与讨论第56-63页
     ·IOP的理化性质第56-57页
     ·IOP化学组分分析第57页
     ·IOP单糖组成第57-59页
     ·IOP相对分子质量分布第59页
     ·IOP溶液黏度性质第59-62页
     ·IOP的抗肿瘤作用评价第62-63页
   ·本章小结第63-64页
 参考文献第64-66页
第四章 桦褐孔菌多糖分离纯化及其抗肿瘤活性组分筛选第66-78页
   ·引言第66页
   ·材料与仪器第66页
     ·试验材料第66页
     ·主要试剂第66页
     ·主要仪器第66页
   ·试验方法第66-68页
     ·DEAE-SepharoseCL-6B离子交换柱分级纯化第66-67页
     ·SepharoseCL-6B凝胶柱分级纯化第67页
     ·Sephadex G-200凝胶柱分级纯化第67页
     ·纯度鉴定和相对分子质量分布第67页
     ·单糖组成分析第67页
     ·紫外光谱(UV)分析第67页
     ·IOP级分抗肿瘤活性筛选第67页
     ·数据分析第67-68页
   ·结果与讨论第68-76页
     ·IOP的DEAE-SepharoseCL-6B离子交换分级纯化第68页
     ·IOP经DEAE-SepharoseCL-6B柱层析各组分对肿瘤细胞的抑制作用第68-69页
     ·IOP3的凝胶柱分级纯化及活性成份筛选第69-71页
     ·IOP3a紫外扫描图谱第71页
     ·IOP3a第二次凝胶柱色谱分离第71-72页
     ·IOP3a纯度鉴定及相对分子质量分布第72-73页
     ·IOP1的凝胶柱分级纯化及活性成份筛选第73-75页
     ·IOP1b纯度鉴定及相对分子质量分布第75页
     ·IOP1b的单糖组成第75-76页
   ·本章小结第76页
 参考文献第76-78页
第五章 桦褐孔菌多糖IOP3a抗肿瘤活性及其机制研究第78-96页
   ·引言第78-79页
   ·材料与仪器第79页
     ·试验材料第79页
     ·主要试剂第79页
     ·主要仪器第79页
   ·实验方法第79-82页
     ·IOP3a体内抗肿瘤活性及其机制第79-81页
     ·IOP3诱导肿瘤细胞凋亡及其机制第81-82页
     ·数据处理第82页
   ·结果与讨论第82-93页
     ·荷瘤裸鼠移植瘤生长曲线第82-83页
     ·IOP3a对裸鼠Jurkat肉瘤的抑制作用第83页
     ·IOP3a对荷瘤裸鼠免疫器官指数的影响第83-84页
     ·IOP3a对荷瘤裸鼠外周血WBC和淋巴细胞的影响第84页
     ·组织病理学观察第84-85页
     ·IOP3a对裸鼠Jurkat肿瘤组织中Bax和Bcl-2基因蛋白表达的影响第85-86页
     ·光学显微镜下凋亡细胞形态学观察第86-87页
     ·荧光显微镜下凋亡细胞形态学第87页
     ·扫描电镜观察IOP3a对不同细胞的形态影响第87-88页
     ·流式细胞仪FITC-Annexin Ⅴ/PI双染色法检测细胞凋亡率第88-90页
     ·蛋白质印迹法检测Cytc的释放第90页
     ·蛋白质印迹法检测caspase-3蛋白的表达的变化第90-92页
     ·DNA ladder第92-93页
   ·本章小结第93-94页
 参考文献第94-96页
第六章 桦褐孔菌多糖IOP3a结构鉴定第96-111页
   ·引言第96页
   ·材料与方法第96页
     ·材料第96页
     ·主要试剂第96页
     ·主要设备第96页
   ·试验方法第96-98页
     ·IOP3a的理化性质第96-97页
     ·化学组成分析第97页
     ·甲基化分析第97-98页
     ·NMR分析第98页
     ·IOP3a高级结构第98页
     ·热重分析第98页
   ·结果与讨论第98-109页
     ·IOP3a的理化性质第98-99页
     ·IOP3a的化学组成第99页
     ·IOP3a的中性单糖组成分析第99-100页
     ·IOP3a的甲基化分析第100-101页
     ·~1HNMR和~(13)CNMR分析第101-103页
     ·COSY45、TOCSY和HMBC 2DNMR分析第103-104页
     ·IOP3a红外光谱测定第104-105页
     ·IOP3a的一级结构表征第105-106页
     ·IOP3a高级结构第106-108页
     ·IOP3a的热重分析第108-109页
   ·本章小结第109页
 参考文献第109-111页
主要结论第111-113页
展望第113-114页
论文主要创新点第114-115页
致谢第115-116页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第116-117页
附录:IOP3a甲基化质谱图第117-119页

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