摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
1.1 VDACs蛋白 | 第9-13页 |
1.1.1 VDACs蛋白的结构 | 第9-10页 |
1.1.2 VDACs蛋白的功能 | 第10-12页 |
1.1.3 本实验室OsVDACs研究进展 | 第12-13页 |
1.2 蛋白质互作研究方法 | 第13-15页 |
1.3 启动子的研究 | 第15-16页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
第二章 OsVDAC4互作蛋白的筛选 | 第17-33页 |
2.1 实验材料、试剂与仪器 | 第17-19页 |
2.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.2 实验试剂与仪器 | 第18-19页 |
2.1.3 相关PCR引物 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 诱饵蛋白载体构建 | 第19-21页 |
2.2.2 诱饵蛋白载体的筛选 | 第21-22页 |
2.2.3 筛选合适3-AT浓度抑制假阳性 | 第22页 |
2.2.4 OsVDAC4互作蛋白的筛选 | 第22页 |
2.2.5 阳性鉴定 | 第22-23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-31页 |
2.3.1 日本晴幼穗RNA的提取 | 第23页 |
2.3.2 目的片段的获得 | 第23-24页 |
2.3.3 重组质粒pBT3-N-OsVDAC4和pBT3-SUC-OsVDAC4的鉴定 | 第24-25页 |
2.3.4 OsVDAC4诱饵蛋白载体的筛选 | 第25-26页 |
2.3.5 文库筛选前严谨性的优化 | 第26-27页 |
2.3.6 互作蛋白的筛选 | 第27页 |
2.3.7 酵母阳性鉴定 | 第27-28页 |
2.3.8 测序后质粒进一步验证 | 第28-29页 |
2.3.9 相关蛋白生物信息学分析 | 第29-31页 |
2.4 结论 | 第31-33页 |
第三章 OsVDAC5启动子的克隆及表达模式分析 | 第33-53页 |
3.1 实验材料、试剂及仪器 | 第33-34页 |
3.1.1 实验材料 | 第33-34页 |
3.1.2 实验试剂及仪器 | 第34页 |
3.1.3 相关PCR引物 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-41页 |
3.2.1 载体构建 | 第34-40页 |
3.2.2 水稻遗传转化 | 第40页 |
3.2.3 转基因植株阳性鉴定 | 第40-41页 |
3.2.4 阳性植株的GFP荧光观察 | 第41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-52页 |
3.3.1 顺式作用元件预测 | 第41-44页 |
3.3.2 pMD18-T-pA载体构建 | 第44页 |
3.3.3 DX2181-5'部分缺失启动子片段系列载体构建 | 第44-46页 |
3.3.4 农杆菌的阳性鉴定 | 第46-48页 |
3.3.5 水稻遗传转化及T0代转基因植株的阳性鉴定 | 第48-49页 |
3.3.6 阳性植株启动子片段表达分析 | 第49-52页 |
3.4 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58页 |