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水稻OsVDAC4互作蛋白筛选及OsVDAC5启动子表达模式分析

摘要第5-6页
Abstract第6页
第一章 文献综述第9-17页
    1.1 VDACs蛋白第9-13页
        1.1.1 VDACs蛋白的结构第9-10页
        1.1.2 VDACs蛋白的功能第10-12页
        1.1.3 本实验室OsVDACs研究进展第12-13页
    1.2 蛋白质互作研究方法第13-15页
    1.3 启动子的研究第15-16页
    1.4 本研究的目的及意义第16-17页
第二章 OsVDAC4互作蛋白的筛选第17-33页
    2.1 实验材料、试剂与仪器第17-19页
        2.1.1 实验材料第17-18页
        2.1.2 实验试剂与仪器第18-19页
        2.1.3 相关PCR引物第19页
    2.2 实验方法第19-23页
        2.2.1 诱饵蛋白载体构建第19-21页
        2.2.2 诱饵蛋白载体的筛选第21-22页
        2.2.3 筛选合适3-AT浓度抑制假阳性第22页
        2.2.4 OsVDAC4互作蛋白的筛选第22页
        2.2.5 阳性鉴定第22-23页
    2.3 结果与分析第23-31页
        2.3.1 日本晴幼穗RNA的提取第23页
        2.3.2 目的片段的获得第23-24页
        2.3.3 重组质粒pBT3-N-OsVDAC4和pBT3-SUC-OsVDAC4的鉴定第24-25页
        2.3.4 OsVDAC4诱饵蛋白载体的筛选第25-26页
        2.3.5 文库筛选前严谨性的优化第26-27页
        2.3.6 互作蛋白的筛选第27页
        2.3.7 酵母阳性鉴定第27-28页
        2.3.8 测序后质粒进一步验证第28-29页
        2.3.9 相关蛋白生物信息学分析第29-31页
    2.4 结论第31-33页
第三章 OsVDAC5启动子的克隆及表达模式分析第33-53页
    3.1 实验材料、试剂及仪器第33-34页
        3.1.1 实验材料第33-34页
        3.1.2 实验试剂及仪器第34页
        3.1.3 相关PCR引物第34页
    3.2 实验方法第34-41页
        3.2.1 载体构建第34-40页
        3.2.2 水稻遗传转化第40页
        3.2.3 转基因植株阳性鉴定第40-41页
        3.2.4 阳性植株的GFP荧光观察第41页
    3.3 结果与分析第41-52页
        3.3.1 顺式作用元件预测第41-44页
        3.3.2 pMD18-T-pA载体构建第44页
        3.3.3 DX2181-5'部分缺失启动子片段系列载体构建第44-46页
        3.3.4 农杆菌的阳性鉴定第46-48页
        3.3.5 水稻遗传转化及T0代转基因植株的阳性鉴定第48-49页
        3.3.6 阳性植株启动子片段表达分析第49-52页
    3.4 结论第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58页

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