| 内容提要 | 第1-12页 |
| 第1章 以组氨酸为活性中心的蛋白酪氨酸磷酸酶的研究 | 第12-72页 |
| 第一节 前言 | 第12-27页 |
| ·蛋白质磷酸酶 | 第12-17页 |
| ·蛋白质磷酸酶分类 | 第12-13页 |
| ·PTPs 的催化结构域 | 第13-15页 |
| ·PTPs 结构决定的底物识别和活性调节 | 第15-17页 |
| ·T 细胞受体信号通路抑制因子（Suppressor of T cell receptor signaling， STS）家族 | 第17-25页 |
| ·STS-1 和 STS-2 的发现 | 第17-18页 |
| ·STS-1 和STS-2 的基因结构 | 第18页 |
| ·STS-1 和STS-2 的分布 | 第18-19页 |
| ·蛋白结构和蛋白间相互作用 | 第19-22页 |
| ·STS 家族的功能 | 第22-25页 |
| ·研究目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二节 STS-1/2 PGM 结构域的克隆、表达和纯化 | 第27-47页 |
| ·实验材料 | 第27-29页 |
| ·实验菌株和质粒 | 第27页 |
| ·实验用试剂 | 第27页 |
| ·实验用溶液 | 第27-29页 |
| ·实验用仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-38页 |
| ·实验流程图 | 第29-31页 |
| ·RNA 的提取和cDNA 的合成 | 第31页 |
| ·STS-1 PGM 片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·STS-1 克隆载体的构建 | 第32-33页 |
| ·STS-1PGM 结构域表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·STS-2 PGMS、STS-2 PGM 和STS-2 PGML 片段的扩增使用引物 | 第34-35页 |
| ·STS-2 克隆载体的构建 | 第35-36页 |
| ·表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第三节 STS-1/2 PGM 结构域的表征 | 第47-58页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47页 |
| ·实验用试剂和仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·反应体系的确立 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白的Km 和Kcat 值的测定 | 第48页 |
| ·最适pH 值的确定 | 第48-49页 |
| ·最适离子浓度的确定 | 第49-50页 |
| ·最适温度的确定 | 第50页 |
| ·米氏常数（Km）和转换数（Kcat）的测定 | 第50页 |
| ·实验结果 | 第50-57页 |
| ·最适pH 值的确定 | 第50-52页 |
| ·最适离子浓度的确定 | 第52-53页 |
| ·Km 和Kcat 的测定结果 | 第53-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第四节 STS-1/2PGM 结构域的磷酸酶活性研究 | 第58-67页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·实验用细胞 | 第58页 |
| ·实验用试剂 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-59页 |
| ·GST-JAKS 的构建 | 第58-59页 |
| ·STS-1 PGM 和STS-2 PGM 的磷酸酶活性的体外检测 | 第59页 |
| ·STS-1 PGM 和STS-2 PGM 磷酸酶活性的细胞内检测 | 第59页 |
| ·实验结果 | 第59-67页 |
| ·GST-JAKS 的构建 | 第59-60页 |
| ·STS-1 PGM 和STS-2 PGM 的磷酸酶活性的体外检测 | 第60-62页 |
| ·STS-1 PGM 和STS-2 PGM 磷酸酶活性的细胞内检测 | 第62-64页 |
| ·STS-1 PGM 和STS-2 PGM 之间的相互作用 | 第64-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 第2章 小鼠LC3 与细胞自嗜的关系的研究 | 第72-91页 |
| 第一节 前言 | 第72-78页 |
| ·细胞死亡 | 第72页 |
| ·细胞凋亡 | 第72页 |
| ·细胞自嗜 | 第72-75页 |
| ·微管相关蛋白1 轻链3（Microtubule-associated proteinl liaght chain 3，LC3）和细胞自嗜的关系 | 第75-77页 |
| ·研究目的和意义 | 第77-78页 |
| 第二节 实验材料 | 第78-80页 |
| ·实验材料 | 第78-80页 |
| ·实验菌株和质粒 | 第78页 |
| ·实验用试剂 | 第78页 |
| ·实验用溶液 | 第78-79页 |
| ·实验用仪器 | 第79-80页 |
| 第三节 实验方法 | 第80-82页 |
| ·小鼠微管相关蛋白1 的轻链b（LC36）的克隆 | 第80-81页 |
| ·真核细胞转染，细胞自嗜的诱导和细胞荧光染色 | 第81-82页 |
| 第四节 实验结果和讨论 | 第82-87页 |
| ·mLC3b 的分子克隆结果 | 第82-84页 |
| ·EGFP-mLC3b 的表达 | 第84页 |
| ·EGFP-mLC3b 在细胞自嗜情况下的分布 | 第84-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 中文摘要 | 第93-96页 |
| ABSTRACT | 第96-97页 |
