附表 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 简介 | 第12页 |
1.2 PRRSV编码蛋白及功能 | 第12-14页 |
1.2.1 PRRSV编码的非结构蛋白及功能 | 第12-14页 |
1.2.2 PRRSV编码的结构蛋白及功能 | 第14页 |
1.3 PRRSV NSP2的遗传变异 | 第14-16页 |
1.4 PRRSV的免疫学特征 | 第16-18页 |
1.4.1 PRRS的先天性免疫应答 | 第16-17页 |
1.4.2 PRRS的适应性免疫应答 | 第17-18页 |
1.5 PRRSV的防治 | 第18页 |
1.6 研究目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 PRRSV GSWW/2015株NSP2缺失病毒的拯救与鉴定 | 第20-32页 |
2.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.1 病毒、细胞、载体与抗体 | 第20页 |
2.1.2 主要试剂及仪器 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-26页 |
2.2.1 NSP2缺失区域与引物的设计 | 第20-21页 |
2.2.2 基因合成与感染性克隆的构建 | 第21-23页 |
2.2.3 全长质粒线性化及DNA体外转录 | 第23-25页 |
2.2.4 缺失病毒的拯救与传代 | 第25页 |
2.2.5 拯救病毒的鉴定 | 第25-26页 |
2.3 实验结果 | 第26-30页 |
2.3.1 pGS-AB-D13/D14重组质粒的鉴定 | 第26-27页 |
2.3.2 缺失病毒的拯救与传代 | 第27页 |
2.3.3 缺失病毒的鉴定 | 第27-30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 亲本病毒与缺失病毒的生物学特性分析 | 第32-40页 |
3.1 实验材料 | 第32页 |
3.1.1 病毒株和细胞 | 第32页 |
3.1.2 主要试剂及仪器 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-36页 |
3.2.1 引物设计与合成 | 第32-33页 |
3.2.2 病毒的复制动力学曲线测定 | 第33-34页 |
3.2.3 亲本病毒与拯救病毒TCID_(50)的测定 | 第34页 |
3.2.4 病毒感染PAM细胞后相关细胞因子的表达 | 第34-36页 |
3.2.5 数据分析 | 第36页 |
3.3 实验结果 | 第36-38页 |
3.3.1 病毒的复制动力学曲线 | 第36页 |
3.3.2 病毒的TCID_(50)测定 | 第36-37页 |
3.3.3 不同缺失病毒细胞因子表达的异同 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
第四章 全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
作者简历 | 第49页 |