| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 小麦和小麦条锈病 | 第12-16页 |
| 1.1 小麦 | 第12页 |
| 1.2 小麦条锈病 | 第12-16页 |
| 1.2.1 小麦条锈菌的生活史和侵染循环 | 第13-14页 |
| 1.2.2 小麦条锈菌夏孢子侵染过程 | 第14-15页 |
| 1.2.3 小麦条锈病的发生和危害 | 第15-16页 |
| 2 植物抗病基因的类型及研究进展 | 第16-17页 |
| 3 小麦-条锈菌互作的分子生物学研究 | 第17-22页 |
| 3.1 小麦抗条锈病基因的发掘 | 第17-20页 |
| 3.2 小麦抗条锈病基因的克隆 | 第20-21页 |
| 3.2.1 苗期抗条锈病基因 | 第21页 |
| 3.2.2 成株期抗条锈病基因 | 第21页 |
| 3.3 抗条锈病基因之间的连锁关系 | 第21-22页 |
| 3.4 小麦抗条锈病相关基因的克隆 | 第22页 |
| 4 高通量测序和筛选技术在植物基因组学中的应用 | 第22-24页 |
| 4.1 高通量测序技术的类型 | 第22页 |
| 4.2 基因芯片技术在植物中的应用 | 第22-23页 |
| 4.3 SNP芯片技术在植物中的应用 | 第23-24页 |
| 5 比较基因组学的研究和应用 | 第24-25页 |
| 6 小麦基因组测序技术与研究进展 | 第25-26页 |
| 7 病毒诱导基因沉默(VIGS)技术的原理和应用 | 第26-27页 |
| 8 本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| 9 技术路线 | 第28-30页 |
| 第二章 利用SNP芯片和比较基因组学筛选Yr26所在染色体区段间的抗病候选基因 | 第30-38页 |
| 1 材料与方法 | 第30-33页 |
| 1.1 试验材料 | 第30-31页 |
| 1.2 试验方法 | 第31-33页 |
| 1.2.1 CTAB法提取小麦基因组DNA | 第31页 |
| 1.2.2 小麦全基因组SNP分型芯片 | 第31-32页 |
| 1.2.3 候选基因的表达特征分析 | 第32-33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.1 利用90KSNP芯片筛选Yr26基因所在染色体区段的候选基因 | 第33-36页 |
| 2.2 利用660KSNP芯片筛选Yr26基因所在染色体区段的候选基因 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 利用92R137转录组数据和比较基因组学方法筛选Yr26所在染色体区间内的抗病候选基因 | 第38-50页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| 1.1 试验材料 | 第38-39页 |
| 1.2 试验方法 | 第39页 |
| 1.2.1 Trizol (Invitrogen公司)法提取小麦RNA(同第二章) | 第39页 |
| 1.2.2 小麦mRNA测序技术Illumina HiSeq~(TM) 2000测序系统 | 第39页 |
| 1.2.3 CTAB法提小麦DNA(同第二章) | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-48页 |
| 2.1 与Yr26基因紧密连锁的21个标记在中国春1A/1B/1D基因组数据库中的定位 | 第39-42页 |
| 2.2 Yr26区段内NBS-LRR基因的筛选 | 第42-47页 |
| 2.2.1 与节节麦DD基因组数据库比对筛选候选基因 | 第42-44页 |
| 2.2.2 与中国春1B基因组数据库比对筛选候选基因 | 第44-46页 |
| 2.2.3 在IWGSC 1A-7D基因组数据库中在线比对筛选候选基因 | 第46-47页 |
| 2.3 Yr26区段内NBS-LRR基因的克隆分析 | 第47-48页 |
| 2.4 Yr26区段内NBS-LRR基因的标记开发 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 小麦抗条锈病基因TRLP2的功能分析 | 第50-76页 |
| 1 材料与方法 | 第51-63页 |
| 1.1 实验材料 | 第51页 |
| 1.2 实验方法 | 第51-63页 |
| 1.2.1 TaRLP2基因的筛选 | 第51页 |
| 1.2.2 TaRLP2基因的保守引物和特异性引物设计 | 第51-52页 |
| 1.2.3 TaRLP2的克隆 | 第52-55页 |
| 1.2.4 TaRLP2的表达分析 | 第55页 |
| 1.2.5 TaRLP2的亚细胞定位分析 | 第55-56页 |
| 1.2.6 TaRLP2的VIGS功能分析 | 第56-60页 |
| 1.2.7 TaRLP2转基因功能分析 | 第60-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-73页 |
| 2.1 TaRLP2基因的筛选和克隆 | 第63-65页 |
| 2.2 TaRLP2基因的表达特征分析 | 第65-66页 |
| 2.3 TaRLP2基因的亚细胞定位 | 第66页 |
| 2.4 TaRLP2的VIGS功能分析 | 第66-71页 |
| 2.4.1 BSMV: TaRLP2重组载体的构建 | 第66-68页 |
| 2.4.2 重组病毒的线性化和体外转录 | 第68-69页 |
| 2.4.3 接种病毒和接种后病毒表型观察 | 第69页 |
| 2.4.4 基因沉默叶片接种条锈菌后的表型观察 | 第69-71页 |
| 2.5 TaRLP2的遗传转化 | 第71-73页 |
| 2.5.1 TaRLP2的过表达载体构建 | 第71-72页 |
| 2.5.2 TaRLP2转基因植株的获得 | 第72页 |
| 2.5.3 T_0代转基因植株的PCR鉴定 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-76页 |
| 全文结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 附录 | 第96-98页 |
