摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
英文缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-30页 |
1.1 CRISPR/Cas系统介绍 | 第12-18页 |
1.1.1 CRISPR/Cas系统的起源 | 第12页 |
1.1.2 CRISPR/Cas系统的结构与分类 | 第12-14页 |
1.1.3 CRISPR/Cas9系统的工作机制 | 第14-16页 |
1.1.4 CRISPR/Cas9系统的研究进展 | 第16-18页 |
1.1.5 CRISPR/Cas9系统的脱靶效应 | 第18页 |
1.2 昆虫性信息素结合蛋白及其功能 | 第18-26页 |
1.2.1 昆虫嗅觉感受机制概述 | 第18-21页 |
1.2.2 性信息素结合蛋白分类及进化 | 第21-22页 |
1.2.3 鳞翅目昆虫性信息素结合蛋白 | 第22-23页 |
1.2.4 性信息素结合蛋白的生理功能 | 第23-24页 |
1.2.5 性信息素结合蛋白与性信息素的结合和释放机制 | 第24-26页 |
1.3 二化螟及其性信息素防治 | 第26-29页 |
1.3.1 二化螟的为害及防治 | 第26-27页 |
1.3.2 二化螟防治中性信息素的应用 | 第27-28页 |
1.3.3 二化螟性信息素结合蛋白的研究进展 | 第28-29页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第29-30页 |
第二章 利用CRISPR/Cas9系统对二化螟PBP1和PBP3基因的敲除 | 第30-62页 |
2.1 实验材料 | 第31-34页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第31页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第31-32页 |
2.1.3 主要试剂 | 第32-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-43页 |
2.2.1 PBP1、PBP3基因靶标位点的确定 | 第34-36页 |
2.2.2 PBP1和PBP3-sgRNA的体外合成 | 第36-38页 |
2.2.3 Cas9 mRNA的体外合成 | 第38-39页 |
2.2.4 二化螟卵的显微注射 | 第39页 |
2.2.5 注射卵块突变检测 | 第39-41页 |
2.2.6 脱靶效应检测 | 第41-42页 |
2.2.7 后代突变品系筛选 | 第42-43页 |
2.3 结果与分析 | 第43-60页 |
2.3.1 靶标位点的选择以及sgRNA、Cas9 mRNA的合成 | 第43-44页 |
2.3.2 二化螟卵显微注射及突变检测 | 第44-47页 |
2.3.3 CsupPBP1、CsupPBP3突变品系筛选 | 第47-58页 |
2.3.4 CsupPBP1、CsupPBP3基因脱靶效应检测 | 第58-60页 |
2.4 结论与讨论 | 第60-62页 |
第三章 CsupPBP1和CsupPBP3突变品系触角电位反应测定 | 第62-72页 |
3.1 实验材料 | 第63-64页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第63页 |
3.1.2 主要实验仪器 | 第63-64页 |
3.1.3 测定的气味物质 | 第64页 |
3.2 实验方法 | 第64-66页 |
3.2.1 信息素组分配制 | 第64页 |
3.2.2 触角电位反应测定 | 第64-66页 |
3.3 结果与分析 | 第66-69页 |
3.3.1 试虫基因型检测 | 第66-67页 |
3.3.2 触角电位反应测定 | 第67-69页 |
3.4 结论与讨论 | 第69-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-86页 |
致谢 | 第86-88页 |
附录: 攻读硕士期间学位论文发表情况 | 第88页 |