| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第13-21页 |
| 0.1 结直肠癌 | 第13-14页 |
| 0.2 核心蛋白聚糖 | 第14-17页 |
| 0.3 活化素C | 第17-18页 |
| 0.4 Activins/Smad信号转导通路与AP-1 | 第18-20页 |
| 0.5 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第1章 DCN与活化素C的调节关系研究 | 第21-33页 |
| 1.1 引言 | 第21页 |
| 1.2 实验材料 | 第21-25页 |
| 1.2.1 动物模型、细胞株、DCN表达质粒和对照质粒、生化试剂和耗材 | 第21-22页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 1.2.3 试剂的配制 | 第23-25页 |
| 1.3 实验方法及步骤 | 第25-30页 |
| 1.3.1 DCN缺失小鼠肠上皮细胞的获取 | 第25页 |
| 1.3.2 HCT116和HEK293细胞的培养 | 第25-26页 |
| 1.3.3 DCN表达质粒的转染 | 第26-27页 |
| 1.3.4 蛋白质稳定性分析实验 | 第27页 |
| 1.3.5 肠上皮细胞及体外培养细胞总蛋白质的提取 | 第27页 |
| 1.3.6 细胞总蛋白质浓度的测定（BCA法） | 第27-28页 |
| 1.3.7 蛋白质免疫印迹（Western Blot） | 第28-30页 |
| 1.4 实验结果与讨论 | 第30-32页 |
| 1.5 结论 | 第32-33页 |
| 第2章 活化素C在结直肠癌细胞中的生物学功能研究 | 第33-43页 |
| 1 引言 | 第33页 |
| 2 实验材料 | 第33-34页 |
| 1.2.1 细胞系、活化素C表达质粒、RNA干扰序列、生化试剂和耗材 | 第33-34页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第34页 |
| 1.2.3 试剂的配制 | 第34页 |
| 3 实验方法及步骤 | 第34-37页 |
| 1.3.1 MTT法检测细胞存活率 | 第34-35页 |
| 1.3.2 Westen Blot检测细胞增殖 | 第35页 |
| 1.3.3 划痕实验 | 第35-36页 |
| 1.3.4 细胞小室实验 | 第36-37页 |
| 4 实验结果与讨论 | 第37-42页 |
| 1.4.1 重组活化素C蛋白促进结直肠癌细胞的增殖、迁徙和转移 | 第37-38页 |
| 1.4.2 转染活化素C表达质粒蛋白促进结直肠癌细胞的增殖、迁徙和转移 | 第38-40页 |
| 1.4.3 RNA干扰活化素C表达抑制结直肠癌细胞的增殖、迁徙和转移 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 第3章 活化素C促进结直肠癌细胞的生长、迁徙和转移作用的潜在机制研究 | 第43-47页 |
| 1 引言 | 第43页 |
| 2 实验材料 | 第43-44页 |
| 3 实验方法 | 第44-45页 |
| 1.3.1 重组活化素C蛋白处理HCT116细胞 | 第44页 |
| 1.3.2 活化素C表达质粒转染HCT116细胞 | 第44页 |
| 1.3.3 RNA干扰活化素C处理HCT116细胞 | 第44-45页 |
| 1.3.4 Western blot | 第45页 |
| 4 实验结果与讨论 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 第4章 DCN对活化素C介导的ERK/c-Fos和JNK/c-Jun信号转导通路的影响研究 | 第47-53页 |
| 1 引言 | 第47页 |
| 2 实验材料 | 第47页 |
| 3 实验方法及步骤 | 第47-49页 |
| 1.3.1 DCN缺失小鼠肠上皮细胞的获取 | 第47-48页 |
| 1.3.2 DCN表达质粒转染HCT116和HEK293细胞 | 第48页 |
| 1.3.3 DCN表达质粒与si-RNA共转染HCT116细胞 | 第48页 |
| 1.3.4 肠上皮细胞及体外培养细胞总蛋白质的提取 | 第48-49页 |
| 1.3.5 蛋白质免疫印迹（Western Blot） | 第49页 |
| 4 实验结果与讨论 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-53页 |
| 第5章 DCN与活化素C的分子交互作用研究 | 第53-62页 |
| 1 引言 | 第53页 |
| 2 实验材料 | 第53-54页 |
| 1.2.1 生化试剂和耗材 | 第53-54页 |
| 1.2.2 主要仪器设备 | 第54页 |
| 1.2.3 试剂的配制 | 第54页 |
| 3 实验方法及步骤 | 第54-59页 |
| 1.3.1 p Ds-Red-DCN质粒的构建 | 第54-57页 |
| 1.3.2 免疫共沉淀（Co-IP）实验 | 第57-58页 |
| 1.3.3 荧光共定位实验 | 第58-59页 |
| 4 实验结果与讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 第6章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第70-71页 |
