| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 前言及文章综述 | 第10-18页 |
| 1.1 鱼类远缘杂交 | 第10-12页 |
| 1.1.1 鱼类远缘杂交概况 | 第10页 |
| 1.1.2 三倍体鱼的育性研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2 microRNA研究进展 | 第12-15页 |
| 1.2.1 microRNA的发现和结构特征 | 第12-13页 |
| 1.2.2 microRNA的产生机制和作用机理 | 第13-14页 |
| 1.2.3 鱼类microRNA的研究 | 第14-15页 |
| 1.3 kisspeptin的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.1 kisspeptin的发现 | 第15页 |
| 1.3.2 Kisspeptin与鱼类生殖内分泌 | 第15-17页 |
| 1.4 研究意义 | 第17-18页 |
| 第二章 不同倍性鲫鲤精巢microRNA文库的构建 | 第18-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2 建库测序 | 第18-20页 |
| 2.2.1 Total RNA提取 | 第18页 |
| 2.2.2 建库测序 | 第18-20页 |
| 2.3 生物信息学分析过程 | 第20页 |
| 2.4 数据结果与分析 | 第20-38页 |
| 2.4.1 测序数据与质量评估 | 第20-23页 |
| 2.4.2 参考序列比对与sRNA的分类注释 | 第23-30页 |
| 2.4.3 miRNA表达及差异分析 | 第30-33页 |
| 2.4.4 差异显著的miRNA靶基因预测 | 第33-38页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR验证 | 第38-42页 |
| 2.5.1 实验材料和totalRNA提取 | 第38页 |
| 2.5.2 cDNA合成 | 第38-39页 |
| 2.5.3 引物合成 | 第39-40页 |
| 2.5.4 qRT-PCR反应 | 第40-41页 |
| 2.5.5 实验结果 | 第41-42页 |
| 第三章 kiss基因部分cDNA克隆及组织差异表达 | 第42-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.2.1 TotalRNA提取 | 第42页 |
| 3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第42-43页 |
| 3.2.3 引物设计以及cDNA编码区中间部分的获得 | 第43-44页 |
| 3.2.4 PCR产物的分离、回收和纯化 | 第44页 |
| 3.2.5 连接和转化 | 第44-45页 |
| 3.2.6 kiss1、kiss2基因在不同组织部位的表达 | 第45页 |
| 3.3 结果和分析 | 第45-47页 |
| 3.3.1 测序结果分析 | 第45页 |
| 3.3.2 kiss1、kiss2基因在不同组织部位的表达差异结果分析 | 第45-47页 |
| 第四章 讨论 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及获奖情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
