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飞蝗和玉米螟中细胞色素P450还原酶和细胞色素P450基因的功能研究

中文摘要第11-13页
ABSTRACT第13-15页
第一章 文献综述第16-20页
    1.1 飞蝗简介第16页
    1.2 玉米螟简介第16页
    1.3 细胞色素P450概述第16-17页
        1.3.1 內源代谢第17页
        1.3.2 外源代谢第17页
    1.4 细胞色素P450还原酶及其研究进展第17-18页
    1.5 杀虫剂与植物次生代谢物第18页
    1.6 研究目的和意义第18-20页
第二章 玉米螟转录组分析第20-31页
    2.1 实验原始数据、实验材料和方法第20-23页
        2.1.1 实验原始数据来源第20页
        2.1.2 转录组测序文库评估第20-21页
        2.1.3 转录组测序数据组装第21页
        2.1.4 Unigene功能注释第21页
        2.1.5 基因表达量分析第21页
        2.1.6 供试昆虫第21页
        2.1.7 主要试剂盒仪器设备第21页
        2.1.8 饲喂法处理,干扰亚洲玉米螟P450基因第21-23页
    2.2 实验结果第23-29页
        2.2.1 测序文库评估第23-24页
        2.2.2 原始数据质量评估第24页
        2.2.3 转录组测序数据组装第24-26页
        2.2.4 Unigene功能注释第26页
        2.2.5 表达定量分析第26-27页
        2.2.6 亚洲玉米螟的全长P450基因第27-29页
        2.2.7 饲喂法处理亚洲玉米螟第29页
    2.3 讨论第29-31页
第三章 亚洲玉米螟细胞色素P450还原酶基因的克隆与表达分析第31-42页
    3.1 实验材料和试剂第31-35页
        3.1.1 供试昆虫第31页
        3.1.2 主要试剂盒仪器设备第31-33页
        3.1.3 亚洲玉米螟细胞色素P450还原酶全长的克隆第33页
        3.1.4 序列分析第33页
        3.1.5 cDNA模板制备第33-34页
        3.1.6 实时定量PCR检测第34-35页
    3.2 实验结果与分析第35-40页
        3.2.1 亚洲玉米螟OfCPR基因的克隆第35-36页
        3.2.2 亚洲玉米螟OfCPR氨基酸序列分析第36-37页
        3.2.3 OfCPR蛋白多序列对比与进化分析第37-38页
        3.2.4 OfCPR基因差异表达分析第38-40页
    3.3 讨论第40-42页
第四章 干扰飞蝗细胞色素P450还原酶基因/细胞色素P450基因影响了飞蝗对西维因的敏感性第42-60页
    4.1 实验材料和方法第42-46页
        4.1.1 供试昆虫第42页
        4.1.2 相关试剂及仪器第42页
        4.1.3 cDNA的合成和LmCPR的克隆第42-43页
        4.1.4 LmCPR基因的生物信息学分析第43页
        4.1.5 实时定量PCR检测第43页
        4.1.6 RNAi技术干扰LmCPR第43-44页
        4.1.7 CPR酶活力检测第44页
        4.1.8 西维因检测第44-45页
        4.1.9 CYP450基因的引物设计第45页
        4.1.10 PBO处理飞蝗三龄若虫,CYP450酶活力测定第45-46页
    4.2 实验结果第46-57页
        4.2.1 LmCPR基因的克隆与序列分析第46-48页
        4.2.2 昆虫CPRs间的进化分析第48-49页
        4.2.3 LmCPR基因的表达分析第49-50页
        4.2.4 RNAi技术沉默LmCPR基因第50-51页
        4.2.5 沉默LmCPR基因后对西维因敏感性分析第51-52页
        4.2.6 P450基因特征第52-53页
        4.2.7 P450基因差异表达分析第53-54页
        4.2.8 PBO处理后影响飞蝗对西维因的敏感性第54-55页
        4.2.9 用西维因分别处理沉默Lm6HN1,Lm6HL1,Lm6HC1和Lm6HQ1的飞蝗第55-56页
        4.2.10 不同浓度西维因对Lm6HN1,Lm6HL1,Lm6HC1和Lm6HQ1四个基因的诱导表达第56-57页
    4.3 讨论第57-60页
第五章 花椒毒素对飞蝗CYP450的诱导及其解毒机制研究第60-68页
    5.1 实验材料和方法第60-62页
        5.1.1 供试昆虫第60页
        5.1.2 相关试剂第60页
        5.1.3 CYP450基因和转录因子的引物设计第60-62页
        5.1.4 花椒毒素处理飞蝗三龄若虫第62页
        5.1.5 RNAi技术干扰LmCYP第62页
    5.2 实验结果第62-67页
        5.2.1 不同浓度花椒毒素对飞蝗P450的诱导表达第62-63页
        5.2.2 Lm6FE1,Lm6HL1和Lm6FD1的解毒功能研究第63-64页
        5.2.3 生理条件下,转录因子调控CYP450基因的表达第64-65页
        5.2.4 花椒毒素诱导下,转录因子CncC和Maf调控CYP6FE1、CYP6FD1和CYP6HL1基因的表达第65-66页
        5.2.5 沉默转录因子CncC和Maf,飞蝗对花椒毒素的敏感性第66-67页
    5.3 讨论第67-68页
参考文献第68-76页
攻读学位期间取得的研究成果第76-78页
致谢第78-79页
个人简况及联系方式第79-82页

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