| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-23页 |
| 1.1 飞蝗及飞蝗体壁 | 第17页 |
| 1.2 飞蝗胚胎发育中的表皮变化 | 第17-18页 |
| 1.3 飞蝗胚胎石蜡切片的改良 | 第18页 |
| 1.4 几丁质简介 | 第18页 |
| 1.5 几丁质酶及其研究进展 | 第18-20页 |
| 1.6 抗体制备 | 第20页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第20页 |
| 1.8 课题的来源及研究内容 | 第20-23页 |
| 第二章 飞蝗胚胎石蜡切片改良及胚胎表皮发育 | 第23-33页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第23页 |
| 2.1.2 相关试剂和工具酶 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要试剂和缓冲液的配制 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要设备和仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 胚胎石蜡切片技术探索 | 第25-26页 |
| 2.2.2 HE染色 | 第26页 |
| 2.2.3 飞蝗浆膜表皮观察 | 第26页 |
| 2.2.4 飞蝗预若虫表皮观察 | 第26页 |
| 2.2.5 利用几丁质染色研究飞蝗胚胎时期表皮变化 | 第26-27页 |
| 2.3 结果 | 第27-31页 |
| 2.3.1 飞蝗卵期石蜡切片技术的改良 | 第27-28页 |
| 2.3.2 飞蝗胚胎浆膜表皮发育模式 | 第28-29页 |
| 2.3.3 用几丁质染色方法研究飞蝗胚胎浆膜表皮发育模式 | 第29-30页 |
| 2.3.4 飞蝗胚胎预若虫表皮发育模式 | 第30页 |
| 2.3.5 用几丁质染色方法研究飞蝗胚胎预若虫表皮发育模式 | 第30-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 飞蝗LmCht5-1的原表达、抗体制备及验证 | 第33-49页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第33-36页 |
| 3.1.1 菌株和表达载体 | 第33页 |
| 3.1.2 相关试剂和工具酶 | 第33页 |
| 3.1.3 主要试剂和缓冲液的配制 | 第33-35页 |
| 3.1.4 主要设备和仪器 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-42页 |
| 3.2.1 LmCht5-1基因的克隆和纯化回收 | 第36页 |
| 3.2.2 pET32a-OVA-LmCht5-1重组质粒的构建和检测 | 第36页 |
| 3.2.3 目的蛋白的表达及检测 | 第36页 |
| 3.2.4 目的蛋白的纯化及检测 | 第36-37页 |
| 3.2.5 LmCht5-1多克隆抗体的制备 | 第37-38页 |
| 3.2.6 OVA-LmCht5-1效价检测 | 第38页 |
| 3.2.7 OVA-LmCht5-1抗体特异性检测 | 第38页 |
| 3.2.8 WesternBlot检测LmCht5-1抗体的特异性 | 第38-39页 |
| 3.2.9 LmCht5-1基因dsRNA引物的设计 | 第39页 |
| 3.2.10 LmCht5-1基因dsRNA的体外合成 | 第39-40页 |
| 3.2.11 LmCht5-1基因dsRNA的显微注射 | 第40-41页 |
| 3.2.12 LmCht5-1基因沉默效率的检测 | 第41-42页 |
| 3.2.13 免疫组化检测 LmCht5-1 抗体的特异性 | 第42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-47页 |
| 3.3.1 飞蝗LmCht5-1高免疫活性载体构建 | 第42-43页 |
| 3.3.2 OVA-LmCht5-1蛋白表达与纯化 | 第43-45页 |
| 3.3.3 OVA-LmCht5-1抗体制备及效价检测 | 第45页 |
| 3.3.4 OVA-LmCht5-1抗体特异性检测 | 第45-46页 |
| 3.3.5 注射 ds LmCht5-1 对飞蝗 LmCht5-1 转录和蛋白水平表达的影响 | 第46页 |
| 3.3.6 免疫组化检测 OVA-Lm Cht5-1 抗体的特异性 | 第46-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 飞蝗LmCht5-1胚胎期的组织定位和功能分析 | 第49-57页 |
| 4.1 实验材料和试剂 | 第49-50页 |
| 4.1.1 供试昆虫 | 第49页 |
| 4.1.2 相关试剂和工具酶 | 第49页 |
| 4.1.3 主要试剂和缓冲液的配制 | 第49页 |
| 4.1.4 主要设备和仪器 | 第49-50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 4.2.1 LmCht5-1基因dsRNA引物的设计 | 第50页 |
| 4.2.2 LmCht5-1基因dsRNA的体外合成 | 第50页 |
| 4.2.3 LmCht5-1 基因 ds RNA 的显微注射 | 第50页 |
| 4.2.4 LmCht5-1基因沉默效率的检测 | 第50页 |
| 4.2.5 LmCht5-1在飞蝗胚胎期的组织定位 | 第50-51页 |
| 4.2.6 飞蝗胚胎固定和透射电镜观察 | 第51页 |
| 4.2.7 显微注射、观察存活率 | 第51页 |
| 4.2.8 取样 HE、免疫组化和电镜观察 | 第51页 |
| 4.3 实验结果 | 第51-55页 |
| 4.3.1 LmCht5-1基因沉默效率的检测 | 第51-52页 |
| 4.3.2 LmCht5-1在飞蝗胚胎期的组织定位分析 | 第52-53页 |
| 4.3.3 LmCht5-1基因对飞蝗胚胎发育的影响 | 第53页 |
| 4.3.4 注射 ds Lm Cht5-1 后胚胎 HE 染色结果 | 第53-54页 |
| 4.3.5 注射 ds Lm Cht5-1 后胚胎免疫组化结果 | 第54-55页 |
| 4.3.6 注射 ds Lm Cht5-1 后胚胎扫描电镜结果 | 第55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-57页 |
| 全文总结 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 个人简况及联系方式 | 第65-66页 |
