| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略词表(Abbreviation) | 第15-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-29页 |
| 1.1 钼在农业生产中的重要性 | 第16-17页 |
| 1.1.1 缺钼对作物生长产生的不利影响 | 第16页 |
| 1.1.2 解决作物钼缺乏的有效措施 | 第16-17页 |
| 1.2 钼在植物中的生理功能 | 第17-21页 |
| 1.2.1 植物中钼辅因子的合成 | 第17-19页 |
| 1.2.2 植物中钼酶的生理功能 | 第19-20页 |
| 1.2.3 植物中钼、氮关系的研究 | 第20-21页 |
| 1.3 不同作物钼吸收转运以及分配基因型差异 | 第21-22页 |
| 1.3.1 不同作物钼吸收累积的基因型差异 | 第21页 |
| 1.3.2 不同作物钼分配的基因型差异 | 第21-22页 |
| 1.4 植物中钼酸盐转运机制研究 | 第22-24页 |
| 1.4.1 植物专一钼酸盐转运蛋白 | 第22-23页 |
| 1.4.2 植物钼、磷、硫共转运蛋白 | 第23-24页 |
| 1.5 转录组学在植物营养研究中的应用 | 第24-26页 |
| 1.5.1 转录组学技术 | 第24-25页 |
| 1.5.2 转录组学技术在植物营养研究中的应用 | 第25-26页 |
| 1.6 代谢组学在植物养分胁迫研究的应用 | 第26-29页 |
| 1.6.1 植物代谢组学研究方法 | 第26-27页 |
| 1.6.2 植物营养胁迫研究中所应用的代谢组学 | 第27-29页 |
| 2 研究意义、内容及技术路线 | 第29-33页 |
| 2.1 研究意义 | 第29-30页 |
| 2.2 研究内容 | 第30-32页 |
| 2.2.1 大豆钼高、低效品种筛选 | 第30页 |
| 2.2.2 大豆钼高、低效品种钼吸收、转运及分配差异 | 第30页 |
| 2.2.3 大豆钼高、低效品种响应缺钼胁迫的转录组学分析 | 第30页 |
| 2.2.4 大豆钼转运基因的克隆及酵母异源表达功能验证 | 第30-31页 |
| 2.2.5 大豆钼高、低效品种钼转运候选基因的表达差异 | 第31页 |
| 2.2.6 大豆钼高效品种响应钼的代谢组学研究 | 第31-32页 |
| 2.3 技术路线 | 第32-33页 |
| 3 大豆钼高、低效品种筛选 | 第33-48页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 材料与方法 | 第33-35页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 3.2.2 试验设计 | 第34-35页 |
| 3.2.3 分析指标及方法 | 第35页 |
| 3.2.4 数据分析 | 第35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-46页 |
| 3.3.1 大豆钼高、低效大豆品种初步筛选 | 第35-43页 |
| 3.3.2 大豆钼高、低效品种复筛试验 | 第43-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.5 总结 | 第47-48页 |
| 4 大豆钼高、低效品种钼吸收、转运及分配差异 | 第48-54页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 材料与方法 | 第48-49页 |
| 4.2.1 试验材料 | 第48页 |
| 4.2.2 试验设计 | 第48页 |
| 4.2.3 分析指标及方法 | 第48-49页 |
| 4.2.4 数据分析 | 第49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-52页 |
| 4.3.1 大豆钼高、低效品种不同生育期各部位钼含量差异 | 第49-50页 |
| 4.3.2 大豆钼高、低效品种不同生育期钼吸收累积差异 | 第50-51页 |
| 4.3.3 大豆钼高、低效品种不同生育期各部位钼分配差异 | 第51-52页 |
| 4.3.4 大豆钼高、低效品种根向地上部钼迁移系数差异 | 第52页 |
| 4.4 讨论 | 第52-53页 |
| 4.5 总结 | 第53-54页 |
| 5 大豆钼高、低效品种响应缺钼胁迫的转录组学分析 | 第54-98页 |
| 5.1 引言 | 第54页 |
| 5.2 材料与方法 | 第54-57页 |
| 5.2.1 试验材料 | 第54页 |
| 5.2.2 试验设计 | 第54-55页 |
| 5.2.3 钼含量分析 | 第55页 |
| 5.2.4 Illumina Hiseq X-ten平台转录组建库测序流程 | 第55-57页 |
| 5.2.5 转录组测序信息分析流程 | 第57页 |
| 5.3 结果与分析 | 第57-94页 |
| 5.3.1 大豆钼高、低效品种缺钼条件下生长状况 | 第57-58页 |
| 5.3.2 测序数据质量评估 | 第58-60页 |
| 5.3.3 RNA测序数据与参考基因组比对结果 | 第60-61页 |
| 5.3.4 样本间相关性分析 | 第61页 |
| 5.3.5 缺钼响应差异基因统计分析 | 第61-63页 |
| 5.3.6 缺钼响应差异基因功能分析 | 第63-71页 |
| 5.3.7 缺钼响应的钼吸收转运相关基因分析 | 第71-75页 |
| 5.3.8 缺钼响应的氮代谢相关基因及代谢途径分析 | 第75-83页 |
| 5.3.9 缺钼响应的转录因子与蛋白激酶相关基因分析 | 第83-91页 |
| 5.3.10 缺钼响应的抗氧化途径分析 | 第91-94页 |
| 5.4 讨论 | 第94-96页 |
| 5.5 结论 | 第96-98页 |
| 6 大豆钼转运基因的克隆及酵母异源表达功能验证 | 第98-114页 |
| 6.1 引言 | 第98-99页 |
| 6.2 材料与方法 | 第99-105页 |
| 6.2.1 试验材料及来源 | 第99页 |
| 6.2.2 试剂及酶 | 第99-100页 |
| 6.2.3 大豆钼转运基因生物信息学分析 | 第100页 |
| 6.2.4 RNA的提取 | 第100-101页 |
| 6.2.5 cDNA的合成 | 第101页 |
| 6.2.6 引物设计及PCR扩增 | 第101-102页 |
| 6.2.7 入门载体和酵母表达载体构建 | 第102-103页 |
| 6.2.8 酵母表达载体酿酒酵母INVSC1转化 | 第103页 |
| 6.2.9 GmMOT2瞬时表达试验 | 第103-104页 |
| 6.2.10 酵母钼吸收试验 | 第104页 |
| 6.2.11 酵母中钼含量测定 | 第104页 |
| 6.2.12 数据分析 | 第104-105页 |
| 6.3 结果与分析 | 第105-111页 |
| 6.3.1 大豆钼酸盐转运候选基因生物信息学分析 | 第105-107页 |
| 6.3.2 大豆钼转运候选基因钼吸收能力分析 | 第107-108页 |
| 6.3.3 大豆钼转运候选基因酵母中钼吸收特性 | 第108-109页 |
| 6.3.4 大豆钼转运基因酵母中表达特性 | 第109-110页 |
| 6.3.5 GmMOT2在烟草叶片和洋葱表皮细胞的亚细胞定位 | 第110-111页 |
| 6.4 讨论 | 第111-113页 |
| 6.5 总结 | 第113-114页 |
| 7 大豆钼高、低效品种钼转运候选基因的表达差异 | 第114-124页 |
| 7.1 引言 | 第114-115页 |
| 7.2 材料与方法 | 第115-117页 |
| 7.2.1 试验材料 | 第115页 |
| 7.2.2 缺钼诱导条件下钼转运候选基因表达试验 | 第115页 |
| 7.2.3 SO_4~(2-)和WO_4~(2-)竞争下钼转运候选基因表达试验 | 第115页 |
| 7.2.4 不同生育期钼转运候选基因表达试验 | 第115-116页 |
| 7.2.5 RT-PCR分析 | 第116-117页 |
| 7.2.6 数据分析 | 第117页 |
| 7.3 结果与分析 | 第117-121页 |
| 7.3.1 缺钼条件下大豆钼转运候选基因表达 | 第117-118页 |
| 7.3.2 竞争离子SO_4~(2-)和WO_4~(2-)对大豆钼转运候选基因表达的影响 | 第118-119页 |
| 7.3.3 大豆钼转运候选基因在不同生育期的表达规律 | 第119-121页 |
| 7.4 讨论 | 第121-123页 |
| 7.5 总结 | 第123-124页 |
| 8 大豆钼高效品种累积高钼的代谢组学分析 | 第124-139页 |
| 8.1 引言 | 第124-125页 |
| 8.2 材料与方法 | 第125-127页 |
| 8.2.1 试验材料 | 第125页 |
| 8.2.2 试验设计 | 第125页 |
| 8.2.3 钼含量分析 | 第125页 |
| 8.2.4 代谢组学分析 | 第125-126页 |
| 8.2.5 数据分析 | 第126-127页 |
| 8.3 结果与分析 | 第127-136页 |
| 8.3.1 大豆生长状况以及不同部位钼含量差异 | 第127页 |
| 8.3.2 大豆叶片和根中代谢组学PCA和OPLS-DA分析 | 第127-130页 |
| 8.3.3 大豆根中响应钼的代谢物以及代谢途径 | 第130-131页 |
| 8.3.4 大豆叶片中响应钼的代谢物及代谢途径 | 第131-136页 |
| 8.4 讨论 | 第136-138页 |
| 8.5 总结 | 第138-139页 |
| 9 全文讨论、总结及展望 | 第139-144页 |
| 9.1 全文讨论 | 第139-141页 |
| 9.2 主要结论 | 第141-143页 |
| 9.3 创新之处 | 第143页 |
| 9.4 研究展望 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-160页 |
| 附录Ⅰ 大豆钼转运同源基因序列 | 第160-163页 |
| 附录Ⅱ LC-MS离子峰图 | 第163-168页 |
| 附录Ⅲ 科研成果 | 第168-169页 |
| 致谢 | 第169-171页 |
