| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第10-34页 |
| 1.1 ABA | 第11-17页 |
| 1.1.1 ABA 的发现及功能 | 第12-14页 |
| 1.1.2 ABA 的合成及降解 | 第14-15页 |
| 1.1.3 关于 ABA 类似物的研究 | 第15-17页 |
| 1.2 ABA 信号通路中重要因子 | 第17-22页 |
| 1.3 ABA 受体的研究 | 第22-32页 |
| 1.3.1 FCA 的相关研究 | 第23页 |
| 1.3.2 ABAR 的相关研究 | 第23页 |
| 1.3.3 GCR2 的相关研究 | 第23-24页 |
| 1.3.4 GTG 的相关研究 | 第24-26页 |
| 1.3.5 PYR/PYL/RCAR 被发现为 ABA 受体 | 第26-32页 |
| 1.4 本文的研究意义 | 第32页 |
| 1.5 本文研究工作要解决的问题 | 第32-34页 |
| 第2章 ABA 受体 PYL 及相关蛋白结构的解析过程 | 第34-54页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.3 实验试剂 | 第35-37页 |
| 2.3.1 实验所用菌株 | 第35-36页 |
| 2.3.2 实验常用载体 | 第36页 |
| 2.3.3 实验常用培养基、缓冲液、试剂盒 | 第36-37页 |
| 2.3.4 分子克隆常用试剂盒及酶 | 第37页 |
| 2.4 实验方法 | 第37-54页 |
| 2.4.1 分子克隆 | 第37-41页 |
| 2.4.2 突变体的构建 | 第41页 |
| 2.4.3 蛋白小量试表达 | 第41-42页 |
| 2.4.4 蛋白的大量表达纯化 | 第42-45页 |
| 2.4.4.1 限制性内切酶处理以寻找蛋白截短体 | 第43-44页 |
| 2.4.4.2 根据软件预测设计蛋白截短体 | 第44-45页 |
| 2.4.5 蛋白晶体的初筛、优化 | 第45-46页 |
| 2.4.6 解决蛋白晶体相位问题 | 第46-47页 |
| 2.4.7 数据收集与结构解析 | 第47页 |
| 2.4.8 等温量热滴定法测定蛋白质-小分子相互作用 | 第47-48页 |
| 2.4.9 凝胶排阻层析柱测定蛋白-蛋白相互作用 | 第48页 |
| 2.4.10 Pull-down 法测定蛋白-蛋白相互作用 | 第48-49页 |
| 2.4.11 表面等离子共振法测定蛋白质-蛋白质相互作用 | 第49-51页 |
| 2.4.12 凝胶排阻层析测定蛋白分子量 | 第51-52页 |
| 2.4.13 多角度静态光散射测定蛋白分子量 | 第52页 |
| 2.4.14 分析超速离心法测定蛋白分子量 | 第52页 |
| 2.4.15 体外测量去磷酸化酶活性 | 第52-54页 |
| 第3章 脱落酸受体 PYL 蛋白家族相关的结构生物学研究 | 第54-114页 |
| 3.1 PYL 蛋白介导的 ABA 信号通路机理 | 第54-77页 |
| 3.1.1 脱落酸受体 PYL 及 ABA-PYL-PP2Cs 蛋白的表达纯化 | 第54-58页 |
| 3.1.2 apo-PYL2 与 ABA-PYL2 的晶体结构及分析 | 第58-66页 |
| 3.1.3 (+)-ABA 结合对 PYL2 构象带来的影响 | 第66-68页 |
| 3.1.4 (+)-ABA-PYL1-ABI1 的晶体结构 | 第68-71页 |
| 3.1.5 ABA 依赖的 PYL1 对 ABI1 活性的抑制 | 第71-74页 |
| 3.1.6 总结 | 第74-77页 |
| 3.2 Pyrabactin 对 PYL 蛋白家族的作用机制 | 第77-96页 |
| 3.2.1 Pyrabactin-PYL1 的晶体结构 | 第78-82页 |
| 3.2.2 PYL 对小分子的认知 | 第82-87页 |
| 3.2.3 Pyrabactin-PYL2 的晶体结构 | 第87-92页 |
| 3.2.4 Pyrabactin 对 PYL1 和 PYL2 的选择机制 | 第92-96页 |
| 3.2.5 总结 | 第96页 |
| 3.3 关于 PYL10 的结构生物学研究 | 第96-114页 |
| 3.3.1 PYL 在有无 ABA 情况下对 PP2Cs 活性的抑制 | 第97-99页 |
| 3.3.2 PYL10 体外可与 PP2C 直接相互作用 | 第99-101页 |
| 3.3.3 PYL 体外寡聚化状态 | 第101-108页 |
| 3.3.4 PYL10-HAB1 晶体结构 | 第108-111页 |
| 3.3.5 PYL10 不依赖 ABA 对 PP2C 作用的机制 | 第111-112页 |
| 3.3.6 总结 | 第112-114页 |
| 第4章 论文总结及讨论 | 第114-121页 |
| 4.1 本文研究结论及创新点 | 第114-116页 |
| 4.1.1 PYL 通过 ABA 对下游信号通路调控的分子机制 | 第114-115页 |
| 4.1.2 Pyrabactin 系列研究揭示了其结合及选择性机制 | 第115-116页 |
| 4.1.3 独立于 ABA 发挥作用的 PYL 亚类 | 第116页 |
| 4.2 本文解析的蛋白质结构 PDB 编号 | 第116-117页 |
| 4.3 其他领域已取得的成果 | 第117-118页 |
| 4.4 PYL 家族研究仍待解决的问题 | 第118-121页 |
| 4.4.1 进化层面分析 ABA 依赖的 PYL 的生理学功能 | 第118页 |
| 4.4.2 PYL 之间是否存在相互调节 | 第118-119页 |
| 4.4.3 其他 ABA 受体的存在 | 第119页 |
| 4.4.4 蛋白后修饰在 ABA 信号通路中的作用 | 第119-120页 |
| 4.4.5 对其他农作物中的 ABA 受体研究 | 第120页 |
| 4.4.6 设计可应用的 ABA 类似物小分子 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第131页 |
