摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
第1章 引言 | 第8-22页 |
1.1 GATA4与先天性心脏病的关系 | 第8-13页 |
1.1.1 GATA家族 | 第8-9页 |
1.1.2 GATA4结构域 | 第9-10页 |
1.1.3 先天性心脏病 | 第10-11页 |
1.1.4 GATA4突变对先天性心脏病的影响 | 第11-13页 |
1.2 GATA4与心脏发育和胚胎发育 | 第13-15页 |
1.2.1 GATA4在心脏发育中的作用 | 第13-14页 |
1.2.2 GATA4在胚胎发育过程中的作用 | 第14页 |
1.2.3 GATA4在心肌细胞肥大中的作用 | 第14-15页 |
1.3 GATA4与衰老和自噬的关系 | 第15-19页 |
1.3.1 衰老 | 第15-16页 |
1.3.2 自噬 | 第16-18页 |
1.3.3 GATA4对衰老和自噬的调节作用 | 第18-19页 |
1.4 课题研究目的和研究意义 | 第19-20页 |
1.5 论文结构安排 | 第20-22页 |
第2章 实验原理和实验材料 | 第22-38页 |
2.1 实验原理 | 第22-34页 |
2.1.1 外源蛋白表达、鉴定与纯化原理 | 第22-28页 |
2.1.2 蛋白质晶体学相关原理 | 第28-34页 |
2.2 实验材料 | 第34-38页 |
2.2.1 GATA4基因、实验菌株和实验质粒 | 第34页 |
2.2.2 实验仪器和耗材 | 第34-35页 |
2.2.3 实验试剂 | 第35-36页 |
2.2.4 常用培养基和缓冲液的配制 | 第36-38页 |
第3章 实验方法 | 第38-48页 |
3.1 GATA4核酸结合区蛋白的晶体学研究 | 第40-44页 |
3.1.1 GATA4核酸结合区的理化性质分析 | 第40页 |
3.1.2 GATA4核酸结合区的分子构建 | 第40-42页 |
3.1.3 GATA4核酸结合区蛋白的表达 | 第42-43页 |
3.1.4 GATA4核酸结合区蛋白的纯化 | 第43页 |
3.1.5 GATA4核酸结合区的结晶条件筛选 | 第43-44页 |
3.2 GATA4核酸结合区蛋白和dsDNA晶体学研究 | 第44-46页 |
3.2.1 GATA4核酸结合区结合的DNA | 第44页 |
3.2.2 GATA4核酸结合区蛋白和dsDNA复合物的结晶条件初筛 | 第44-45页 |
3.2.3 GATA4核酸结合区蛋白和dsDNA复合物的结晶条件优化 | 第45-46页 |
3.3 GATA4N端蛋白的晶体学研究 | 第46-48页 |
3.3.1 GATA4N端的分子构建 | 第46页 |
3.3.2 GATA4N端蛋白的表达 | 第46页 |
3.3.3 GATA4N端蛋白的纯化 | 第46-47页 |
3.3.4 GATA4N端蛋白的结晶条件筛选 | 第47-48页 |
第4章 实验结果与讨论 | 第48-60页 |
4.1 GATA4核酸结合区蛋白的结果与讨论 | 第48-51页 |
4.1.1 表达载体构建的结果与讨论 | 第48-49页 |
4.1.2 表达和纯化的结果与讨论 | 第49-51页 |
4.1.3 蛋白结晶的结果与讨论 | 第51页 |
4.2 GATA4核酸结合区蛋白和dsDNA的结果与讨论 | 第51-53页 |
4.2.1 表达和纯化的结果与讨论 | 第51-52页 |
4.2.2 蛋白和核酸结晶的结果与讨论 | 第52-53页 |
4.3 GATA4N端蛋白的结果与讨论 | 第53-58页 |
4.3.1 表达载体构建的结果与讨论 | 第53-54页 |
4.3.2 表达和纯化的结果与讨论 | 第54-57页 |
4.3.3 蛋白结晶的结果与讨论 | 第57-58页 |
4.4 蛋白晶体数据收集的结果与讨论 | 第58-60页 |
第5章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
附录 | 第70-71页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |