| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 植物开花时间调控 | 第12-17页 |
| 1.1.1 模式植物拟南芥的开花时间调控 | 第12-17页 |
| 1.1.1.1 春化途径 | 第12-13页 |
| 1.1.1.2 自主途径 | 第13-14页 |
| 1.1.1.3 光周期途径 | 第14-15页 |
| 1.1.1.4 赤霉素(GA)途径 | 第15页 |
| 1.1.1.5 年龄途径 | 第15-16页 |
| 1.1.1.6 环境温度途径 | 第16-17页 |
| 1.2 禾本科作物的春化作用 | 第17页 |
| 1.3 植物花的发育 | 第17-19页 |
| 1.3.1 花的结构 | 第18页 |
| 1.3.2 花器官的发育 | 第18-19页 |
| 1.3.2.1 ABC模型 | 第18-19页 |
| 1.3.2.2 ABCDE模型 | 第19页 |
| 1.3.2.3 四因子分子模型 | 第19页 |
| 1.4 APETALA1/FRUIFULL亚家族的进化过程 | 第19-22页 |
| 1.4.1 双子叶植物APETALA1/FRUIFULL亚家族基因功能分化 | 第20-21页 |
| 1.4.2 禾本科植物APETALA1/FRUIFULL亚家族基因功能分化 | 第21-22页 |
| 1.5 温带禾本科模式作物-二穗短柄草 | 第22页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第23页 |
| 2.1.2 植物材料培养与处理 | 第23页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 菌株和质粒 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.1 构建转基因植物表达载体 | 第24-29页 |
| 2.2.1.1 植物总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.1.2 反转录 | 第24-25页 |
| 2.2.1.3 荧光定量PCR | 第25页 |
| 2.2.1.42 ×PfuMix高保真酶PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.1.5 PCR产物胶回收 | 第26-27页 |
| 2.2.1.6 TA克隆 | 第27页 |
| 2.2.1.7 大肠杆菌感受态的制备 | 第27页 |
| 2.2.1.8 大肠杆菌的转化 | 第27-28页 |
| 2.2.1.9 质粒提取(试剂盒法) | 第28页 |
| 2.2.1.10 酶切以及连接反应 | 第28-29页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌EHA105感受态细胞的制备和质粒转化过程 | 第29-30页 |
| 2.2.2.1 制备根癌农杆菌EHA105感受态细胞 | 第29页 |
| 2.2.2.2 根癌农杆菌EHA105的质粒转化过程 | 第29-30页 |
| 2.2.3 二穗短柄草的遗传转化过程 | 第30-34页 |
| 2.2.3.1 诱导愈伤 | 第30-31页 |
| 2.2.3.2 二穗短柄草的侵染 | 第31页 |
| 2.2.3.3 二穗短柄草的共培养 | 第31-32页 |
| 2.2.3.4 二穗短柄草的筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.3.5 二穗短柄草生芽 | 第33页 |
| 2.2.3.6 二穗短柄草生根 | 第33-34页 |
| 2.2.3.7 二穗短柄草移栽 | 第34页 |
| 2.2.4 PCR鉴定转基因苗 | 第34-35页 |
| 2.2.4.1 CTAB法提取基因组 | 第34-35页 |
| 2.2.4.2 PCR检测 | 第35页 |
| 2.2.5 石蜡切片实验 | 第35-37页 |
| 2.2.5.1 材料的固定 | 第35页 |
| 2.2.5.2 材料的包埋 | 第35-36页 |
| 2.2.5.3 切片 | 第36页 |
| 2.2.5.4 染色 | 第36页 |
| 2.2.5.5 封片和观察 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-51页 |
| 3.1 APETALA1/FRUITFULL转录因子亚家族生物信息学分析 | 第37-39页 |
| 3.1.1 APETALA1/FRUITFULL转录因子亚家族系统进化树分析 | 第37-38页 |
| 3.1.2 APETALA1/FRUITFULL转录因子亚家族氨基酸序列比对 | 第38-39页 |
| 3.2 APETALA1/FRUITFULL转录因子亚家族基因的CRISPR/Cas9敲除 | 第39-51页 |
| 3.2.1 CRISPR/Cas9敲除二穗短柄草BdVRN1基因 | 第39-40页 |
| 3.2.2 vrn1.c1突变体的表型以及定量分析 | 第40-41页 |
| 3.2.3 CRISPR/Cas9敲除二穗短柄草BdFUL2基因 | 第41-42页 |
| 3.2.4 ful2.c1突变体的不同发育时期的表型分析 | 第42页 |
| 3.2.5 ful2.c1突变体结种量分析 | 第42-44页 |
| 3.2.6 ful2.c1切片观察 | 第44-45页 |
| 3.2.7 ful2.c1的互补实验和FUL2.RNAi转基因植株 | 第45-46页 |
| 3.2.8 酵母双杂交分析AP1/FUL蛋白之间以及与SEP-like蛋白的互作关系 | 第46-47页 |
| 3.2.9 小麦FUL2基因的过表达 | 第47-48页 |
| 3.2.10 CRISPR/Cas9敲除二穗短柄草BdFUL3和BdFUL4基因 | 第48-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表论文情况及成果 | 第64页 |
