| 摘要 | 第3-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 缩略词英汉对照表 | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 口蹄疫病毒 | 第10-11页 |
| 1.1.1 概述 | 第10页 |
| 1.1.2.蹄疫病毒分子结构及其特性 | 第10-11页 |
| 1.2 天然免疫系统 | 第11-12页 |
| 1.2.1 概述 | 第11页 |
| 1.2.2 PRRs与PAMPs | 第11-12页 |
| 1.2.3 RLRs的分子结构 | 第12页 |
| 1.3 RNA病毒阻断RIG-I样受体识别ds RNA机制研究进展 | 第12-20页 |
| 1.3.1 不同RLRs识别ds RNA的差异 | 第12-14页 |
| 1.3.2 RLRs的激活及其介导的信号转导 | 第14-15页 |
| 1.3.3 RNA病毒阻断RLRs识别ds RNA的策略 | 第15-17页 |
| 1.3.4 A型流感病毒逃避RLRs通路的机制 | 第17-18页 |
| 1.3.5 冠状病毒逃避RLRs通路的机制 | 第18-19页 |
| 1.3.6 黄病毒属病毒逃避RLRs通路的机制 | 第19页 |
| 1.3.7.蹄疫病毒逃避天然免疫通路的机制 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 猪RIG-I真核表达载体的构建及其表达鉴定 | 第21-30页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 细胞、菌株和载体 | 第21页 |
| 2.1.2 各种酶类和生物试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 试剂的配制 | 第22页 |
| 2.1.5 引物设计与合成 | 第22-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 细胞RNA提取及反转录 | 第23页 |
| 2.2.2 猪RIG-I基因的克隆及真核表达质粒的构建 | 第23-25页 |
| 2.2.3 p-RIG-I-myc质粒的转染 | 第25页 |
| 2.2.4 蛋白免疫印迹(western blotting) | 第25-26页 |
| 2.2.5 间接免疫荧光（indirect fluorescence assay，IFA） | 第26页 |
| 2.3 结果 | 第26-28页 |
| 2.3.1 猪RIG-I CDS序列扩增 | 第26-27页 |
| 2.3.2 猪RIG-I真核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.3.3 猪RIG-I真核表达质粒的表达验证 | 第28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 FMDV感染对RIG-I表达的影响 | 第30-38页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 毒株、细胞和质粒 | 第30页 |
| 3.1.2 各种酶类和生物试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 试剂的配制 | 第31页 |
| 3.1.5 引物设计与合成 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-33页 |
| 3.2.1 病毒感染及病毒滴度测定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 质粒转染 | 第32页 |
| 3.2.3 细胞RNA提取及反转录 | 第32-33页 |
| 3.2.4 蛋白免疫印迹(western blotting) | 第33页 |
| 3.2.5 实时荧光定量 PCR（SYBR& | 第33页 |
| 3.3 结果 | 第33-36页 |
| 3.3.1 FMDV感染上调RIG-I转录 | 第33-34页 |
| 3.3.2 过表达RIG-I可以抑制FMDV的复制 | 第34-35页 |
| 3.3.3 下调表达RIG-I能够促进FMDV的复制 | 第35页 |
| 3.3.4 FMDV感染抑制猪RIG-I的表达 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 FMDV 2B蛋白对RIG-I降解作用的研究 | 第38-45页 |
| 4.1 材料 | 第38-39页 |
| 4.1.1 毒株、细胞和质粒 | 第38页 |
| 4.1.2 各种酶类和生物试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第39页 |
| 4.1.4 试剂的配制 | 第39页 |
| 4.1.5 引物设计与合成 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 病毒感染 | 第39页 |
| 4.2.2 质粒转染 | 第39-40页 |
| 4.2.3 细胞RNA提取、反转录及实时荧光定量PCR | 第40页 |
| 4.2.4 蛋白免疫印迹(western blotting) | 第40页 |
| 4.2.5 间接免疫荧光（indirect fluorescence assay，IFA） | 第40页 |
| 4.3 结果 | 第40-43页 |
| 4.3.1 FMDV 2B蛋白发挥降解RIG-I的作用 | 第40页 |
| 4.3.2 FMDV 2B蛋白可以剂量依赖性降解外源RIG-I | 第40-41页 |
| 4.3.3 FMDV 2B蛋白羧基端发挥降解RIG-I的作用 | 第41-42页 |
| 4.3.4 FMDV 2B蛋白能够剂量依赖性的抑制内源性RIG-I的转录与表达 | 第42-43页 |
| 4.3.5 FMDV 2B蛋白氨基端抑制RIG-I m RNA的转录 | 第43页 |
| 4.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 2B蛋白降解RIG-I的分子机制 | 第45-50页 |
| 5.1 材料 | 第45-46页 |
| 5.1.1 细胞和质粒 | 第45页 |
| 5.1.2 各种酶类和生物试剂 | 第45页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 5.1.4 试剂的配制 | 第45-46页 |
| 5.2 方法 | 第46-47页 |
| 5.2.1 间接免疫荧光（indirect fluorescence assay，IFA） | 第46页 |
| 5.2.2 免疫共沉淀实验（Co-IP） | 第46页 |
| 5.2.3 蛋白酶体和溶酶体抑制实验 | 第46-47页 |
| 5.2.4 蛋白免疫印迹(western blotting) | 第47页 |
| 5.3 结果 | 第47-48页 |
| 5.3.1 2B蛋白与RIG-I共定位研究 | 第47页 |
| 5.3.2 2B蛋白和RIG-I能够产生互作 | 第47-48页 |
| 5.3.3 2B降解RIG-I不利用蛋白酶体和溶酶体途径 | 第48页 |
| 5.4 讨论 | 第48-50页 |
| 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59-60页 |
| 导师简介 | 第60-61页 |
