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金属硫蛋白基因酿酒酵母工程菌吸附铀(Ⅵ)、钍(Ⅳ)的研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第一章 绪论第7-16页
    1.1 生物吸附剂第7-8页
        1.1.1 生物吸附剂的来源第7页
        1.1.2 生物吸附法的吸附机理第7-8页
    1.2 生物吸附影响因素第8-9页
        1.2.1 吸附体系p H值的影响第8-9页
        1.2.2 温度的影响第9页
        1.2.3 共存离子的影响第9页
        1.2.4 其他因素的影响第9页
    1.3 生物吸附现状第9-10页
    1.4 金属硫蛋白及其应用第10-13页
        1.4.1 MT的结构第10-11页
        1.4.2 MT的功能第11-12页
        1.4.3 金属硫蛋白的应用第12-13页
    1.5 细胞表面展示技术的应用第13-14页
    1.6 本论文的研究目的和意义第14页
    1.7 本课题研究内容第14-16页
第二章 金属硫蛋白基因在酿酒酵母细胞表面的展示第16-28页
    2.1 主要实验仪器及试剂第16-18页
        2.1.1 实验仪器第16页
        2.1.2 试剂第16-17页
        2.1.3 药品第17页
        2.1.4 材料第17-18页
        2.1.5 培养基第18页
    2.2 实验方法第18-23页
        2.2.1 金属硫蛋白基因的获得第18页
        2.2.2 大肠杆菌质粒DNA的提取第18-19页
        2.2.3 质粒pUC57-MT与表面展示载体p YD1的双酶切第19页
        2.2.4 酶切片段的琼脂糖凝胶电泳与回收第19-20页
        2.2.5 酶切片段的连接第20页
        2.2.6 高效感受态细胞的制备第20页
        2.2.7 重组载体转化大肠杆菌第20页
        2.2.8 菌落PCR鉴定阳性克隆第20-21页
        2.2.9 酿酒酵母的活化第21页
        2.2.10 SS-DNA的制备第21页
        2.2.11 酿酒酒酵母的Li Ac/SS-DNA/PEG转化第21-22页
        2.2.12 酿酒酵母转化子的鉴定第22-23页
        2.2.13 外源蛋白的诱导表达第23页
        2.2.14 细胞免疫荧光检测第23页
    2.3 实验结果第23-28页
        2.3.1 质粒pUC57-MT与表面展示载体p YD1的提取第23-24页
        2.3.2 质粒pUC57-MT与表面展示载体p YD1的双酶切第24-25页
        2.3.3 酶切片段的连接与转化第25页
        2.3.4 菌落PCR鉴定阳性克隆第25-26页
        2.3.5 阳性克隆的测序第26页
        2.3.6 质粒pYD-MT的提取及纯化第26页
        2.3.7 酿酒酒酵母的LiAc/SS-DNA/PEG转化第26-27页
        2.3.8 酿酒酵母转化子的PCR鉴定第27页
        2.3.9 酿酒酵母转化子的荧光检测第27-28页
第三章 吸附实验第28-55页
    3.1 主要实验仪器及试剂第28页
        3.1.1 实验仪器第28页
        3.1.2 试剂第28页
    3.2 酿酒酵母工程菌吸附材料的制备第28-29页
    3.3 标准曲线的绘制及测定方法第29-30页
        3.3.1 铀的测定方法第29页
        3.3.2 铀标准曲线的绘制第29页
        3.3.3 钍的测定方法第29页
        3.3.4 钍标准曲线的绘制第29-30页
    3.4 酸性条件下酿酒酵母工程菌对铀离子的吸附第30-38页
        3.4.1 酸性条件对铀离子的吸附第30页
        3.4.2 酸度对吸附铀的影响第30-31页
        3.4.3 时间对吸附铀的影响第31-32页
        3.4.5 温度对吸附铀的影响第32-34页
        3.4.6 铀离子初始浓度对吸附铀的影响第34-35页
        3.4.7 酸性条件吸附铀吸附等温线第35-37页
        3.4.8 酸性条件吸附铀吸附动力学第37-38页
    3.5 碱性条件对铀离子的吸附第38-44页
        3.5.1 碱度对吸附铀的影响第38-39页
        3.5.2 时间对吸附铀的影响第39-40页
        3.5.3 温度对吸附铀的影响第40页
        3.5.4 铀离子初始浓度对吸附铀的影响第40-41页
        3.5.5 碱性条件吸附铀吸附等温线第41-43页
        3.5.6 碱性条件吸附铀吸附动力学第43-44页
    3.6 酿酒酵母工程菌对钍离子的吸附第44-51页
        3.6.1 pH值对吸附钍的影响第44-45页
        3.6.2 时间对吸附钍的影响第45-46页
        3.6.3 温度对吸附钍的影响第46-48页
        3.6.4 钍离子初始浓度对吸附钍的影响第48页
        3.6.5 吸附钍吸附等温线第48-50页
        3.6.6 吸附钍吸附动力学第50-51页
    3.7 研究性实验第51-55页
        3.7.1 钍离子析出实验第51页
        3.7.2 称样量对吸附体系pH值的影响第51-52页
        3.7.3 扫描电镜分析第52页
        3.7.4 傅里叶红外光谱分析第52-53页
        3.7.5 酵母工程菌失活第53-55页
第四章 共存离子对吸附的影响第55-57页
    4.1 铀、钍竞争性对吸附的影响第55-56页
        4.1.1 pH对铀、钍竞争性吸附的影响第55页
        4.1.2 铀浓度对吸附钍的影响第55-56页
    4.2 铼离子对吸附钍的影响第56-57页
第五章 结论与展望第57-59页
    5.1 结论第57-58页
    5.2 展望第58-59页
参考文献第59-65页
致谢第65-66页
附录第66页

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