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影响奶牛健康养殖的乳腺炎葡萄球菌研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第15-44页
    1.1 奶牛健康养殖和抗病营养第15-17页
        1.1.1 健康养殖和抗病营养的概念第15-16页
        1.1.2 奶牛健康养殖的内涵第16页
        1.1.3 奶牛健康养殖的意义第16-17页
        1.1.4 奶牛健康养殖模式下的疾病防控第17页
    1.2 奶牛乳腺炎第17-24页
        1.2.1 奶牛乳腺防御系统第18-20页
        1.2.2 奶牛乳腺炎的分类和临床症状第20-21页
        1.2.3 奶牛乳腺炎的危害第21-24页
    1.3 奶牛乳腺炎的主要病原第24-26页
        1.3.1 奶牛乳腺炎的传染性病原第24-25页
        1.3.2 奶牛乳腺炎的环境性病原第25-26页
    1.4 金黄色葡萄球菌分型第26-30页
        1.4.1 金黄色葡萄球菌的表型分型第26-27页
        1.4.2 金黄色葡萄球菌的基因分型第27-29页
        1.4.3 金黄色葡萄球菌特异功能集团基因的多态性分型第29-30页
    1.5 葡萄球菌的耐药性研究进展第30-35页
        1.5.1 葡萄球菌耐药现状第30-31页
        1.5.2 葡萄球菌耐药性产生的原因第31-34页
        1.5.3 耐甲氧西林葡萄球菌研究进展第34-35页
    1.6 大环类酯类-林可酰胺类-链阳菌素类抗生素与细菌耐药性第35-37页
        1.6.1 大环类酯类-林可酰胺类-链阳菌素类抗生素的分类第35-36页
        1.6.2 大环类酯类-林可酰胺类-链阳菌素类抗生素的耐药机制第36页
        1.6.3 大环类酯类-林可酰胺类-链阳菌素类抗生素耐药表型第36-37页
        1.6.4 大环类酯类-林可酰胺类-链阳菌素类抗生素耐药基因型第37页
    1.7 整合子/基因盒系统与细菌耐药性第37-43页
        1.7.1 整合子简介第37-38页
        1.7.2 整合子的结构第38页
        1.7.3 整合子的分类第38-39页
        1.7.4 耐药基因盒的种类第39-41页
        1.7.5 整合子对基因盒的捕获第41页
        1.7.6 耐药基因盒的表达第41-42页
        1.7.7 整合子/基因盒系统在耐药传播中的作用第42页
        1.7.8 整合子/基因盒的检测方法第42-43页
    1.9 本研究的目的意义和主要研究内容第43-44页
第二章 奶牛乳腺炎源葡萄球菌的分离鉴定及耐药谱研究第44-62页
    2.1 实验材料第44-47页
        2.1.2 药品与试剂第44-45页
        2.1.3 培养基和试剂配制第45页
        2.1.4 基因克隆及转化用溶液第45页
        2.1.5 琼脂糖凝胶电泳所用溶液第45页
        2.1.6 引物和序列第45-46页
        2.1.7 主要设备及仪器第46-47页
    2.2 实验方法第47-52页
        2.2.1 临床乳腺炎奶牛及乳区选择第47页
        2.2.2 奶样采集第47页
        2.2.3 奶样处理第47页
        2.2.4 增菌培养第47页
        2.2.5 葡萄球菌的分离第47页
        2.2.6 葡萄球菌的生化鉴定第47-48页
        2.2.7 金黄色葡萄球菌的分子鉴定第48-49页
        2.2.8 凝固酶阴性葡萄球菌的分子鉴定第49页
        2.2.9 耐甲氧西林葡萄球菌分离和鉴定第49-50页
        2.2.10 菌株抗生素敏感性试验第50-52页
        2.2.11 耐甲氧西林葡萄球菌最低抑菌浓度试验第52页
    2.3 结果第52-58页
        2.3.1 奶牛乳腺炎源葡萄球菌的分离鉴定结果第52-53页
        2.3.2 奶牛乳腺炎源葡萄球菌的分子鉴定结果第53-54页
        2.3.3 奶牛乳腺炎源葡萄球菌的耐药谱研究结果第54-55页
        2.3.4 奶牛乳腺炎源耐苯唑西林葡萄球菌第55-58页
    2.4 讨论第58-60页
        2.4.1 葡萄球菌分离鉴定第58-59页
        2.4.2 葡萄球菌耐药性分析第59-60页
    2.5 小结第60-62页
第三章 奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌分子分型研究第62-72页
    3.1 实验材料第62-63页
        3.1.1 菌株第62页
        3.1.2 主要试剂第62-63页
        3.1.3 基因克隆及转化用溶液第63页
        3.1.4 琼脂糖凝胶电泳所用溶液第63页
        3.1.5 主要设备及仪器第63页
    3.2 实验方法第63-66页
        3.2.1 试验菌株DNA的提取第63页
        3.2.2 蛋白A基因重复序列分型第63-64页
        3.2.3 多位点序列分型(Multiple Locus Sequence Typing, MLST)第64-65页
        3.2.4 耐甲氧西林葡萄球菌SCCmec分型第65-66页
    3.3 结果第66-69页
        3.3.1 蛋白A基因(spa)重复序列分型结果第66-67页
        3.3.2 多位点序列分型结果第67-68页
        3.3.3 菌株MLST和spa序列型分析第68-69页
        3.3.4 耐甲氧西林葡萄球菌SCCmec分型结果第69页
    3.4 讨论第69-71页
    3.5 小结第71-72页
第四章 大环内酯类-林可酰胺类-链阳菌素类抗生素耐药研究第72-88页
    4.1 实验材料第72-74页
        4.1.1 菌株来源第72页
        4.1.2 药品与试剂第72页
        4.1.3 基因克隆及转化用溶液第72-73页
        4.1.4 琼脂糖凝胶电泳所用溶液第73页
        4.1.5 引物和序列第73-74页
        4.1.6 主要设备及仪器第74页
    4.2 实验方法第74-77页
        4.2.1 琼脂稀释法测定细菌对MLS类抗生素的最低抑菌浓度第74-75页
        4.2.2 E-Test法测定细菌红霉素和克林霉素最低抑菌浓度第75-76页
        4.2.3 葡萄球菌对MLS类抗生素最低抑菌浓度的判断标准第76页
        4.2.4 D试验第76-77页
        4.2.5 葡萄球菌对MLS类抗生素耐药基因检测第77页
    4.3 结果第77-84页
        4.3.1 奶牛乳腺炎源葡萄球菌对MLS类抗生素的耐药性第77-81页
        4.3.2 奶牛乳腺炎源葡萄球菌对MLS类抗生素的耐药表型第81-82页
        4.3.3 奶牛乳腺炎源葡萄球菌对MLS类抗生素耐药基因的检出情况第82-84页
        4.3.4 奶牛乳腺炎源葡萄球菌MLS类抗生素耐药表型和基因型的关联分析第84页
    4.4 讨论第84-87页
    4.5 小结第87-88页
第五章 奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌耐药性整合子研究第88-103页
    5.1 材料第88-89页
        5.1.1 试验菌株第88页
        5.1.2 试剂及配制第88-89页
        5.1.3 引物和序列第89页
        5.1.4 主要设备及仪器第89页
    5.2 实验方法第89-92页
        5.2.1 奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌整合子的检测第89-91页
        5.2.2 整合子阳性菌株基因盒的检测及鉴定第91-92页
    5.3 结果第92-99页
        5.3.1 奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌不同类型整合子的检测及分析第92-94页
        5.3.2 I型整合子/基因盒可变区扩增结果及序列分析第94-96页
        5.3.3 奶牛乳腺炎源金黄色葡萄球菌中I整合子/基因盒的流行情况第96-99页
    5.4 讨论第99-101页
    5.5 小结第101-103页
第六章 论文总结第103-106页
    6.1 结论第103-104页
    6.2 创新之处第104页
    6.3 进一步研究的课题第104-106页
参考文献第106-118页
附录第118-127页
缩略词第127-128页
致谢第128-129页
个人简介第129页

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