| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-25页 |
| 1 猪传染性胃肠炎和猪呼吸道冠状病毒概述 | 第11-13页 |
| 2 猪传染性胃肠炎病毒分子生物学研究进展 | 第13-19页 |
| 3 猪传染性胃肠炎病毒与猪呼吸道冠状病毒的鉴别诊断 | 第19-24页 |
| 4 本实验的目的和意义 | 第24-25页 |
| 1.材料 | 第25-27页 |
| ·病毒和细胞 | 第25页 |
| ·质粒与菌株 | 第25页 |
| ·血清 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-27页 |
| 2.方法 | 第27-35页 |
| ·表达菌株pET32a-SBC和pET32a-N的复苏与鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组质粒pET32a-SBC的复苏与鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组质粒pET32a-N的复苏与鉴定 | 第28页 |
| ·重组pET32a-SBC和pET32a-N的表达 | 第28-30页 |
| ·原核表达质粒在大肠杆菌中的表达及表达产物的SDS-PAGE | 第29页 |
| ·重组蛋白活性分析 | 第29-30页 |
| ·重组SBC和N蛋白的纯化及含量测定 | 第30页 |
| ·间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体的方法建立与优化 | 第30-33页 |
| ·间接ELISA方法的操作程序及判定标准 | 第31页 |
| ·间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体的反应条件优化 | 第31-33页 |
| ·间接ELISA特异性试验 | 第33页 |
| ·间接ELISA重复性试验 | 第33页 |
| ·临床猪血清检测 | 第33页 |
| ·血清中和试验 | 第33-35页 |
| 3. 结果 | 第35-52页 |
| ·重组pET32a-SBC的PCR和双酶切鉴定 | 第35页 |
| ·重组pET32a-N的PCR和双酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒pET32a-SBC和pET32a-N表达结果 | 第36-38页 |
| ·重组SBC和N蛋白的SDS-PAGE结果 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白Western-blotting鉴定 | 第37-38页 |
| ·间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体方法的最佳反应条件 | 第38-47页 |
| ·以重组SBC蛋白为抗原的ELISA最佳反应条件的确定 | 第38-42页 |
| ·以重组N蛋白为抗原的ELISA最佳反应条件的确定 | 第42-46页 |
| ·SBC蛋白包被孔阴阳性临界值的确定 | 第46页 |
| ·N蛋白包被孔阴阳性临界值的确定 | 第46-47页 |
| ·间接ELISA检测TGEV与PRCV抗体方法的特异性试验 | 第47-48页 |
| ·间接ELISA重复性试验 | 第48-49页 |
| ·临床猪血清检测 | 第49-50页 |
| ·ELISA临床检测与血清中和试验对照比较 | 第50-52页 |
| ·SBC蛋白包被孔实验结果与血清中和试验对照比较 | 第50-51页 |
| ·N蛋白包被孔实验结果与血清中和试验对照比较 | 第51-52页 |
| 4.讨论 | 第52-55页 |
| ·蛋白质纯化 | 第52页 |
| ·选择TGEV SBC和N的原因 | 第52-53页 |
| ·表达载体的选择 | 第53页 |
| ·ELISA反应的最佳条件 | 第53-54页 |
| ·ELISA诊断和血清中和试验临床检测的对比 | 第54页 |
| ·ELISA试验临床检测结果 | 第54-55页 |
| 5.结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65页 |
