| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 论文缩略词表 | 第8-12页 |
| 第一章 猪体细胞核移植转基因技术的研究与应用 | 第12-21页 |
| 1. 猪转基因克隆研究简要回顾 | 第12-13页 |
| 2. 转基因克隆技术在猪育种中的应用 | 第13-16页 |
| ·生产高繁殖力猪 | 第13-14页 |
| ·提高抗病能力 | 第14页 |
| ·猪肉肉质改良 | 第14-16页 |
| 3. 猪转基因克隆技术在人类医学中的应用 | 第16-18页 |
| ·异种器官移植 | 第16-17页 |
| ·医学研究模型 | 第17页 |
| ·生物反应器 | 第17-18页 |
| 4. "环保猪" | 第18-19页 |
| 5. 展望 | 第19-21页 |
| 第二章 单层细胞共培养对猪去卵丘卵体外成熟及发育能力的影响 | 第21-32页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22-25页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第22-23页 |
| ·溶液的配制 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-27页 |
| ·共培养单层细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·卵母细胞的采集,Dos的获得和体外成熟 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-29页 |
| ·不同卵母细胞MⅡ期判定方法的相关性分析 | 第27页 |
| ·不同单层细胞共培养体系对Dos体外成熟及孤雌胚胎早期发育的影响 | 第27-29页 |
| 3 讨论 | 第29-32页 |
| ·Spindle-view对猪卵母细胞达到MⅡ期判定的适用性 | 第29页 |
| ·不同单层细胞共培养体系对Dos IVM成熟的影响 | 第29-32页 |
| 第三章 植酸酶基因转染 | 第32-41页 |
| 1. 材料与方法 | 第33-38页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-38页 |
| ·成年猪耳成纤维细胞系建立 | 第34页 |
| ·胎儿成纤维细胞系建立 | 第34页 |
| ·猪卵巢颗粒细胞系建立 | 第34-35页 |
| ·猪输卵管上皮细胞系建立 | 第35页 |
| ·细胞传代培养 | 第35页 |
| ·供体细胞液氮冷冻储存 | 第35页 |
| ·供体细胞的复苏 | 第35-36页 |
| ·植酸酶基因的转染 | 第36页 |
| ·转染效率的检测 | 第36-38页 |
| 2 结果 | 第38-39页 |
| ·不同YM6552质粒含量对转染效率的影响 | 第38页 |
| ·不同脂质体含量对转染效率的影响 | 第38-39页 |
| ·DNA/脂质体复合物的孵育时间对转染效率的影响 | 第39页 |
| 3. 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 体细胞核移植转基因胚的构建及早期发育 | 第41-50页 |
| 1. 材料与方法 | 第41-46页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·显微操作工具的制备 | 第42-43页 |
| ·方法 | 第43-46页 |
| ·卵母细胞体外成熟 | 第43-44页 |
| ·转植酸酶基因供体细胞的筛选 | 第44-45页 |
| ·核移植供体细胞的准备 | 第45页 |
| ·受体卵母细胞去核 | 第45页 |
| ·去核卵母细胞的核移植 | 第45-46页 |
| ·融合与激活 | 第46页 |
| ·胚胎培养 | 第46页 |
| 2. 结果 | 第46-48页 |
| ·不同供核体细胞对G418浓度的敏感性 | 第46-47页 |
| ·不同转基因供体细胞类型对重构胚体外发育的影响 | 第47页 |
| ·表达绿色荧光蛋白的核移植转植酸酶基因胚胎的获得 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| ·不同供核体细胞对G418浓度的敏感性 | 第48页 |
| ·不同转基因供体细胞类型对重构胚体外发育的影响 | 第48-49页 |
| ·表达绿色荧光蛋白的核移植转植酸酶基因胚胎的获得 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59页 |
