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牛朊蛋白基因prnp敲除载体的构建及真核细胞转染

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
文献综述第12-29页
 第一章 转基因动物技术概述第12-19页
   ·转基因方法概述第12-15页
     ·原核注射法第12-13页
     ·胚胎干细胞法第13页
     ·逆转录病毒感染法第13-14页
     ·精子介导法第14页
     ·体细胞核移植法第14-15页
   ·转基因动物的应用第15-16页
     ·动物抗病育种和品种改良第15页
     ·建立乳腺生物反应器与生物制药第15-16页
     ·建立诊断和治疗人类疾病的动物模型第16页
     ·提供给人体移植的动物器官第16页
   ·转基因动物技术存在的问题第16-17页
     ·转基因动物的出生率和成活率较低第17页
     ·目的基因在转基因动物中的行为难以控制第17页
     ·转入外源基因表达情况的问题第17页
     ·转基因动物的安全性问题第17页
   ·展望第17-19页
 第二章 Prion 蛋白(引起疯牛病的病原体)的研究进展第19-29页
   ·prion 蛋白的发现及意义第19-20页
   ·PrPC 的结构第20-22页
     ·PrPC 的编码基因第20页
     ·PrPC 的结构第20-22页
   ·PrPc 的细胞定位第22-23页
   ·PrPC 的生物学功能第23-26页
     ·PrPC 在神经系统中的功能第23-24页
     ·PrPC 与Cu~(2+)代谢第24页
     ·PrPC 在免疫系统中的功能第24-25页
     ·PrPC 在信号转导中的作用第25页
     ·PrPc 在细胞附着上的功能第25-26页
   ·Prion 病的致病机理研究第26-27页
   ·影响 PrPC 向PrPSc 转化的主要因素第27-28页
   ·结语第28-29页
试验部分第29-47页
 第三章 牛朊蛋白基因prnp 敲除载体的构建第29-37页
   ·材料与方法第29-31页
     ·材料、试剂与实验仪器第29-30页
     ·试验方法第30-31页
   ·试验结果第31-35页
     ·质粒pMD20-T-3prnp 的构建结果第31-32页
     ·质粒pMD20-T-5prnp 的构建结果第32页
     ·质粒PA2T-prnps 的构建结果第32-33页
     ·打靶载体PBONP 的构建结果第33-35页
     ·打靶载体PBONP 构建图第35页
   ·讨论第35-36页
   ·小结第36-37页
 第四章 基因敲除载体PBONP 的细胞转染、筛选及阳性细胞的鉴定第37-47页
   ·材料与方法第37-40页
     ·材料第37页
     ·方法第37-40页
   ·结果第40-45页
     ·细胞筛选的结果第40-42页
     ·阳性细胞生长曲线的测定结果第42-43页
     ·阳性细胞克隆的鉴定结果第43-45页
   ·讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
结论第47-48页
参考文献第48-56页
附录1 测序图谱第56-60页
附录2 试验仪器第60-61页
附录3 试验试剂及配制方法第61-62页
致谢第62-63页
个人简介第63页

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