| 提要 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 中英文缩写词表 | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-29页 |
| 1.1 大肠杆菌表达系统的包涵体表达 | 第15-20页 |
| 1.1.1 包涵体表达 | 第15页 |
| 1.1.2 包涵体表达的解决方法 | 第15-20页 |
| 1.2 铁蛋白 | 第20-24页 |
| 1.2.1 铁蛋白的结构 | 第20-21页 |
| 1.2.2 铁蛋白的生物学功能 | 第21-22页 |
| 1.2.3 铁蛋白的研究进展 | 第22-24页 |
| 1.3 热休克蛋白（Heat Shock Protein，HSP） | 第24-28页 |
| 1.3.1 HSP的分类 | 第24页 |
| 1.3.2 HSP的生物学特征 | 第24-25页 |
| 1.3.3 HSP的生物学功能 | 第25-27页 |
| 1.3.4 研究热休克蛋白的意义 | 第27-28页 |
| 1.4 研究解决包涵体表达的意义 | 第28-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-47页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第29-31页 |
| 2.1.1 质粒与菌种 | 第29页 |
| 2.1.2 试剂与材料 | 第29-30页 |
| 2.1.3 实验动物 | 第30页 |
| 2.1.4 主要实验设备 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-47页 |
| 2.2.1 培养基的配制 | 第31页 |
| 2.2.2 重组蛋白诱导表达及表达方式鉴定的电泳样品制备 | 第31-32页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE | 第32页 |
| 2.2.4 包涵体的收集及裂解 | 第32-33页 |
| 2.2.5 包涵体蛋白的透析复性 | 第33-35页 |
| 2.2.6 包涵体的碱溶液直接滴定复性 | 第35页 |
| 2.2.7 高压匀质机压榨裂菌 | 第35-36页 |
| 2.2.8 镍亲和层析纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.9 透射电镜形态学检测 | 第37-38页 |
| 2.2.10 免疫实验 | 第38页 |
| 2.2.11 间接ELISA | 第38-39页 |
| 2.2.12 蛋白质 3D结构的数据库模拟预测 | 第39页 |
| 2.2.13 引物的设计与合成 | 第39页 |
| 2.2.14 PCR扩增目的基因 | 第39-40页 |
| 2.2.15 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| 2.2.16 目的基因与T载体/表达载体（p ET-28a）的连接与转化 | 第40-42页 |
| 2.2.17 碱裂解法提取质粒 | 第42页 |
| 2.2.18 质粒的双酶切 | 第42-43页 |
| 2.2.19 包涵体蛋白的凝胶过滤层析柱复性 | 第43页 |
| 2.2.20 Western检测 | 第43-45页 |
| 2.2.21 Lowry法检测蛋白的浓度 | 第45-47页 |
| 第三章 实验结果 | 第47-73页 |
| 3.1 铁蛋白作为分子伴侣的重组融合蛋白的构建、表达、纯化及活性分析 | 第47-55页 |
| 3.1.1 铁蛋白作为分子伴侣的重组融合蛋白FF在大肠杆菌中的表达 | 第47-48页 |
| 3.1.2 FF的获取及鉴定 | 第48-51页 |
| 3.1.3 FF的免疫原性及抗原性检测 | 第51-55页 |
| 3.2 热休克蛋白65及其变构体作为分子伴侣的重组融合蛋白的构建、表达、纯化及活性分析 | 第55-73页 |
| 3.2.1 HSP65及其变构体与PO的融合蛋白的设计及三级结构预测 | 第55-58页 |
| 3.2.2 HSP65的N端与C端表达载体的构建和表达方式的鉴定 | 第58-61页 |
| 3.2.3 NPO、POC和NPOC表达载体的构建和表达方式的鉴定 | 第61-64页 |
| 3.2.4 HPO和NPOC的获取 | 第64-68页 |
| 3.2.5 PO、HPO和NPOC的活性检测 | 第68-73页 |
| 第四章 讨论 | 第73-79页 |
| 4.1 伴侣蛋白与融合蛋白可溶性表达的关系 | 第73-75页 |
| 4.1.1 以铁蛋白为伴侣蛋白 | 第73-74页 |
| 4.1.2 以HSP65及其变构体为伴侣蛋白 | 第74-75页 |
| 4.2 纯化方式对蛋白结构的影响 | 第75-77页 |
| 4.2.1 铁蛋白重组表位蛋白的纯化方式对其结构的影响 | 第75-76页 |
| 4.2.2 HSP65 N、C两端重组表位蛋白的纯化方式对其结构的影响 | 第76-77页 |
| 4.3 蛋白结构对抗原活性的影响 | 第77-79页 |
| 4.3.1 铁蛋白-表位融合蛋白的结构对其抗原活性的影响 | 第77页 |
| 4.3.2 HSP65-表位融合蛋白的结构对其抗原活性的影响 | 第77-79页 |
| 第五章 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 作者简历及硕士期间科研成果 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
