摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1.1 生物表面活性剂的概述 | 第12-13页 |
1.1.1 生物表面活性剂的的特点 | 第12页 |
1.1.2 生物表面活性剂的种类 | 第12页 |
1.1.3 生物表面活性剂生产原料 | 第12-13页 |
1.1.4 生物表面活性剂的分离纯化 | 第13页 |
1.2 槐糖脂概述 | 第13-17页 |
1.2.1 槐糖脂的定义 | 第13-14页 |
1.2.2 槐糖脂的结构 | 第14页 |
1.2.3 槐糖脂的理化性质 | 第14-15页 |
1.2.4 槐糖脂的生产菌株 | 第15页 |
1.2.5 槐糖脂合成原理 | 第15页 |
1.2.6 槐糖脂粗产物的纯化方法 | 第15-16页 |
1.2.7 提高槐糖脂产量的方法 | 第16-17页 |
1.3 槐糖脂的应用 | 第17-20页 |
1.3.1 槐糖脂在食品中的应用 | 第17页 |
1.3.2 石油工业中的应用 | 第17页 |
1.3.3 环境保护中的应用 | 第17-18页 |
1.3.4 医药领域中的应用 | 第18-19页 |
1.3.5 日化方面中的应用 | 第19页 |
1.3.6 槐糖脂在其它领域中的新应用 | 第19-20页 |
1.4 研究内容及意义 | 第20-21页 |
第二章 不同脂溶性碳源对槐糖脂产量的影响研究 | 第21-47页 |
2.1 实验材料 | 第21-25页 |
2.1.1 实验菌种 | 第21页 |
2.1.2 实验仪器 | 第21-22页 |
2.1.3 实验试剂及药品 | 第22-23页 |
2.1.4 培养基及实验所需试剂的配制 | 第23-25页 |
2.1.5 培养条件 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-29页 |
2.2.1 菌株的活化 | 第25页 |
2.2.2 菌株的保存 | 第25页 |
2.2.3 种子液的培养 | 第25-26页 |
2.2.4 不同底物发酵生产槐糖脂-摇瓶发酵 | 第26页 |
2.2.5 不同底物发酵生产槐糖脂-分批补料发酵 | 第26页 |
2.2.6 槐糖脂的提取和纯化 | 第26-27页 |
2.2.7 葡萄糖剩余量的测定 | 第27-28页 |
2.2.8 4 种脂溶性碳源的甲酯化反应 | 第28-29页 |
2.2.9 甲酯化的4种脂溶性碳源气相色谱分析 | 第29页 |
2.2.10 槐糖脂HPLC-MS分析 | 第29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-46页 |
2.3.1 葡萄糖标准曲线的绘制 | 第29页 |
2.3.2 不同底物发酵生产槐糖脂 | 第29-31页 |
2.3.3 粗提产物薄层层析分析 | 第31-33页 |
2.3.4 4 种脂溶性碳源甲酯化GC-MS分析结果 | 第33页 |
2.3.5 槐糖脂HPLC-MS结果分析 | 第33-44页 |
2.3.6 底物组成与槐糖脂结构的比较 | 第44-46页 |
2.4 本章小结 | 第46-47页 |
第三章 球拟酵母产槐糖脂的发酵工艺条件优化 | 第47-58页 |
3.1 实验材料 | 第47-48页 |
3.1.1 实验菌种 | 第47页 |
3.1.2 实验仪器 | 第47-48页 |
3.1.3 实验试剂及药品 | 第48页 |
3.1.4 培养基及实验所需试剂的配制 | 第48页 |
3.2 实验方法 | 第48-50页 |
3.2.1 球拟酵母O131 种子液的培养 | 第48页 |
3.2.2 不同初始p H对槐糖脂产量的影响----摇瓶发酵 | 第48-49页 |
3.2.3 生长曲线的绘制 | 第49页 |
3.2.4 碳源流加方式对槐糖脂产量的影响 | 第49页 |
3.2.5 恒定发酵p H对槐糖脂产量的影响 | 第49页 |
3.2.6 转速对槐糖脂产量的影响 | 第49-50页 |
3.2.7 通气量对槐糖脂产量的影响 | 第50页 |
3.2.8 溶氧对槐糖脂产量的影响 | 第50页 |
3.2.9 温度发酵对槐糖脂产量的影响 | 第50页 |
3.3 结果与分析 | 第50-57页 |
3.3.1 不同初始p H对槐糖脂产量的影响----摇瓶发酵 | 第50-51页 |
3.3.2 动力学曲线 | 第51-52页 |
3.3.3 碳源流加式发酵对槐糖脂产量的影响 | 第52页 |
3.3.4 加碱调节p H发酵对槐糖脂产量的影响 | 第52-53页 |
3.3.5 转速发酵对槐糖脂产量的影响 | 第53-54页 |
3.3.6 通气量对槐糖脂产量的影响 | 第54页 |
3.3.7 恒定溶氧量对槐糖脂产量的影响 | 第54-55页 |
3.3.8 温度发酵对槐糖脂产量的影响 | 第55-57页 |
3.4 本章小结 | 第57-58页 |
第四章 槐糖脂理化性质的研究 | 第58-68页 |
4.1 实验材料 | 第58-60页 |
4.1.1 实验菌株 | 第58页 |
4.1.2 实验仪器 | 第58-59页 |
4.1.3 实验试剂及药品 | 第59页 |
4.1.4 培养基及实验试剂的配制 | 第59-60页 |
4.2 实验方法 | 第60-61页 |
4.2.1 槐糖脂的制备 | 第60页 |
4.2.2 表面张力(γ)与临界胶束浓度(CMC) | 第60页 |
4.2.3 盐度、温度及p H对表面活性的影响 | 第60页 |
4.2.4 乳化活性的研究 | 第60-61页 |
4.3 结果与分析 | 第61-67页 |
4.3.1 表面张力与临界胶束浓度 | 第61-62页 |
4.3.2 盐度、温度及p H对表面活性的影响 | 第62-64页 |
4.3.3 盐度、温度及p H对乳化活性的影响 | 第64-67页 |
4.4 本章小结 | 第67-68页 |
第五章 槐糖脂高产菌株载体的构建 | 第68-80页 |
5.1 实验材料 | 第68-70页 |
5.1.1 实验菌种 | 第68页 |
5.1.2 实验仪器 | 第68-69页 |
5.1.3 实验试剂及药品 | 第69页 |
5.1.4 培养基及实验所需试剂的配制 | 第69-70页 |
5.2 实验方法 | 第70-75页 |
5.2.1 PCR模板的制备 | 第70页 |
5.2.2 扩增所需基因 | 第70-72页 |
5.2.3 载体连接 | 第72页 |
5.2.4 大肠杆菌DH5α转化 | 第72页 |
5.2.5 质粒提取 | 第72页 |
5.2.6 阳性克隆的验证 | 第72-73页 |
5.2.7 酵母基因组的提取与扩增 | 第73-75页 |
5.2.8 酵母转化 | 第75页 |
5.2.9 转化子的筛选 | 第75页 |
5.3 实验结果 | 第75-79页 |
5.3.1 PGK启动子和HPT的克隆及重叠延伸 | 第75-76页 |
5.3.2 大肠杆菌转化阳性克隆的验证 | 第76页 |
5.3.3 间隔序列 | 第76-77页 |
5.3.4 表达载体的验证 | 第77-78页 |
5.3.5 转化子的筛选 | 第78-79页 |
5.4 本章小结 | 第79-80页 |
结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第88-89页 |