中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1. 前言 | 第10-13页 |
2. 材料与方法 | 第13-21页 |
2.1 标本来源 | 第13页 |
2.2 仪器设备 | 第13页 |
2.3 主要试剂 | 第13-14页 |
2.4 标本亚型鉴定与标本分组 | 第14-16页 |
2.4.1 标本前处理 | 第14页 |
2.4.2 核酸提取及扩增 | 第14-15页 |
2.4.3 扩增产物的纯化回收、测序 | 第15-16页 |
2.4.4 亚型鉴定与分组 | 第16页 |
2.5 引物设计 | 第16-17页 |
2.6 CVA6-RT-LAMP 扩增体系反应条件的优化 | 第17-19页 |
2.6.1 确定最佳扩增温度 | 第17-18页 |
2.6.2 引物浓度优化 | 第18页 |
2.6.3 Betaine 浓度优化 | 第18页 |
2.6.4 Mg~(2+)浓度优化 | 第18-19页 |
2.6.5 dNTP 浓度优化 | 第19页 |
2.6.6 CVA6-RT-LAMP 体系反应时间的确定 | 第19页 |
2.7 RT-LAMP 扩增产物的检测方法 | 第19-20页 |
2.8 CVA6-RT-LAMP 方法的特异性 | 第20页 |
2.9 CVA6-RT-LAMP 方法的灵敏度 | 第20页 |
2.10 CVA6-RT-PCR 法的灵敏度 | 第20-21页 |
2.11 CVA6-RT-LAMP 的实时监控 | 第21页 |
3. 结果 | 第21-29页 |
3.1 CVA6-RT-LAMP 扩增体系反应条件的优化 | 第21-25页 |
3.1.1 最佳扩增温度 | 第21-22页 |
3.1.2 引物浓度优化 | 第22-23页 |
3.1.3 Betaine 浓度优化 | 第23页 |
3.1.4 Mg~(2+)浓度优化 | 第23-24页 |
3.1.5 dNTP 浓度优化 | 第24-25页 |
3.1.6 CVA6-RT-LAMP 体系反应时间的确定 | 第25页 |
3.2 CVA6-RT-LAMP 反应的特异性 | 第25-26页 |
3.3 CVA6-RT-LAMP 反应的灵敏度 | 第26-27页 |
3.4 CVA6-RT-PCR 法的灵敏度 | 第27-28页 |
3.5 CVA6-RT-LAMP 的实时监控 | 第28-29页 |
4. 讨论 | 第29-33页 |
4.1 CVA6-RT-LAMP 体系的优化 | 第29-30页 |
4.2 CVA6-RT-LAMP 体系的特异性和灵敏度 | 第30-31页 |
4.3 CVA6-RT-LAMP 体系的优势和意义 | 第31-33页 |
参考文献 | 第33-39页 |
综述 | 第39-57页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录:攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第57-58页 |
致谢 | 第58页 |