| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略词对照表 | 第7-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-24页 |
| 1 细胞能量代谢 | 第11-14页 |
| 1.1 无氧呼吸 | 第11-13页 |
| 1.2 有氧呼吸 | 第13-14页 |
| 2 线粒体结构与氧化磷酸化 | 第14-20页 |
| 2.1 线粒体结构 | 第14-15页 |
| 2.2 线粒体功能 | 第15页 |
| 2.3 氧化磷酸化活性 | 第15-20页 |
| 2.3.1 线粒体数量 | 第15-16页 |
| 2.3.2 线粒体DNA拷贝数 | 第16页 |
| 2.3.3 线粒体蛋白 | 第16-17页 |
| 2.3.4 线粒体呼吸链的组成 | 第17-20页 |
| 3 肿瘤细胞能量代谢 | 第20-23页 |
| 3.1 WARBURG效应 | 第21-22页 |
| 3.2 CRABTREE效应 | 第22-23页 |
| 4 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第24页 |
| 2.1.2 培养基、血清及胰酶 | 第24页 |
| 2.1.3 PCR引物合成 | 第24页 |
| 2.1.4 主要试剂及耗材 | 第24-26页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
| 2.2.2 呼吸抑制剂处理细胞检测细胞生长(MTS)及细胞ATP含量变化 | 第28-29页 |
| 2.2.2.1 呼吸抑制剂处理 | 第28-29页 |
| 2.2.2.2 呼吸抑制剂处理细胞检测细胞生长(MTS) | 第29页 |
| 2.2.2.3 呼吸抑制剂处理细胞检测ATP含量 | 第29页 |
| 2.2.3 细胞ATP检测 | 第29-30页 |
| 2.2.4 血清饥饿 | 第30页 |
| 2.2.5 细胞周期流式检测 | 第30页 |
| 2.2.6 细胞计数 | 第30-31页 |
| 2.2.7 细胞ROS流式检测 | 第31页 |
| 2.2.8 PDH活性检测 | 第31-32页 |
| 2.2.9 LDH活性检测 | 第32-33页 |
| 2.2.10 DNA提取 | 第33页 |
| 2.2.11 RT-PCR | 第33-35页 |
| 2.2.12 MIT GREEN流式检测 | 第35页 |
| 2.2.13 免疫荧光 | 第35页 |
| 2.2.14 WESTERN BLOT | 第35-39页 |
| 2.2.15 线粒体复合物I活性检测 | 第39-41页 |
| 第3章 实验结果 | 第41-56页 |
| 3.1 293T、U251细胞能量代谢途径检测 | 第41-45页 |
| 3.2 血清饥饿对U251细胞生长和ATP含量的影响 | 第45-48页 |
| 3.2.1 血清饥饿对U251细胞生长的影响 | 第45-47页 |
| 3.2.2 血清饥饿对U251细胞ATP及ROS含量的影响 | 第47-48页 |
| 3.3 血清饥饿对U251细胞PDH、LDH蛋白表达及活性的影响 | 第48-50页 |
| 3.4 血清饥饿对U251细胞氧化磷酸化活性的影响 | 第50-55页 |
| 3.4.1 血清饥饿对U251细胞线粒体数目的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.2 血清饥饿对U251细胞线粒体MTDNA的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.3 血清饥饿对U251细胞线粒体呼吸链复合物I活性的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.4 血清饥饿对U251细胞OXPHOS相关蛋白表达的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.5 血清饥饿对U251细胞OXPHOS活性调控蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| 3.5 血清饥饿对U251细胞细胞周期相关蛋白的影响 | 第55-56页 |
| 第4章 讨论 | 第56-58页 |
| 4.1 肿瘤代谢途径的多样性 | 第56页 |
| 4.2 培养条件和微环境影响肿瘤代谢途径 | 第56页 |
| 4.3 血清饥饿U251细胞通过降低HIF-1α升高增加细胞ATP含量 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 附录1：常见溶液的配制方法 | 第63-65页 |
| 附录2：硕士研究生期间论文发表和项目参与情况 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
