| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-33页 |
| 1.1 耐辐射异常球菌的研究综述 | 第11-19页 |
| 1.1.1 耐辐射异常球菌特性 | 第11-14页 |
| 1.1.2 耐辐射异常球菌的极端抗性 | 第14-16页 |
| 1.1.3 耐辐射异常球菌的抗氧化损伤机制 | 第16-19页 |
| 1.2 铁蛋白研究综述 | 第19-22页 |
| 1.2.1 铁蛋白种类 | 第20-21页 |
| 1.2.2 细菌铁蛋白的结构特性 | 第21-22页 |
| 1.3 细菌铁蛋白的功能 | 第22-28页 |
| 1.3.1 维持铁代谢平衡和抗氧化功能 | 第22-24页 |
| 1.3.2 DNA结合的功能 | 第24-27页 |
| 1.3.3 影响基因调控的能力 | 第27-28页 |
| 1.3.4 其它功能 | 第28页 |
| 1.4 耐辐射异常球菌中铁蛋白研究进展 | 第28-29页 |
| 1.4.1 耐辐射异常球菌Dps蛋白 | 第28页 |
| 1.4.2 耐辐射异常球菌DrfE蛋白 | 第28-29页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 1.6 研究内容及创新点 | 第30-32页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第30-31页 |
| 1.6.2 创新点 | 第31-32页 |
| 1.7 技术路线 | 第32-33页 |
| 2 耐辐射异常球菌Drfe基因和DrfE蛋白的生物信息学分析 | 第33-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 2.1.1 生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 2.2 结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.2.1 drfE基因的位置和DrfE蛋白的基本特性分析 | 第34-35页 |
| 2.2.2 DrfE蛋白功能结构域的分析 | 第35-36页 |
| 2.2.3 耐辐射异常球菌DrfE同源性保守序列分析 | 第36-38页 |
| 2.2.4 DrfE蛋白跨膜区预测 | 第38-39页 |
| 2.2.5 DrfE蛋白的亲疏水性分析 | 第39-40页 |
| 2.3 讨论 | 第40-42页 |
| 3 耐辐射异常球菌drfE突变株、回补株的构建及非生物胁迫表型鉴定 | 第42-67页 |
| 3.1 材料和方法 | 第43-57页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第43-44页 |
| 3.1.2 实验溶液配制 | 第44-45页 |
| 3.1.3 细菌基因组总DNA及质粒DNA的提取 | 第45页 |
| 3.1.4 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第45-46页 |
| 3.1.5 耐辐射异常球菌的感受态细胞制备与转化 | 第46页 |
| 3.1.6 耐辐射异常球菌drfE缺失突变株的构建及鉴定 | 第46-52页 |
| 3.1.7 回补菌株的构建及鉴定 | 第52-55页 |
| 3.1.8 不同浓度H_2O_2对菌株的冲击实验 | 第55页 |
| 3.1.9 不同浓度NaCl冲击实验 | 第55-56页 |
| 3.1.10 细胞内Fe~(2+)含量的测定 | 第56页 |
| 3.1.11 抗氧化酶活性的检测 | 第56-57页 |
| 3.2 结果与分析 | 第57-65页 |
| 3.2.1 drfE基因缺失突变株的构建及鉴定 | 第57-59页 |
| 3.2.2 ΔdrfE回补株pdrfE::Δ的构建及鉴定 | 第59-60页 |
| 3.2.3 drfE的缺失导致菌株对氧化和高盐胁迫敏感 | 第60-61页 |
| 3.2.4 DrfE对细胞内铁离子含量的影响 | 第61-62页 |
| 3.2.5 drfE缺失对耐辐射异常球菌抗氧化酶活性的影响 | 第62-65页 |
| 3.3 讨论 | 第65-67页 |
| 4 耐辐射异常球菌drfE基因在大肠杆菌中的表达及对其非生物胁迫抗性的影响 | 第67-79页 |
| 4.1 材料方法 | 第68-72页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 4.1.2 细菌基因组、质粒的提取 | 第69页 |
| 4.1.3 重组载体pET32a-drfE和pPGH-drfE的构建及验证 | 第69-71页 |
| 4.1.4 不同浓度盐和山梨醇对菌株的冲击实验 | 第71页 |
| 4.1.5 不同浓度H_2O_2对菌株的冲击实验 | 第71-72页 |
| 4.1.6 His-DrfE和GST-DrfE融合蛋白的诱导表达 | 第72页 |
| 4.1.7 蛋白可溶性分析 | 第72页 |
| 4.2 结果与分析 | 第72-77页 |
| 4.2.1 重组质粒pET32a-DrfE和pPGH-DrfE的构建及验证 | 第72-73页 |
| 4.2.2 DrfE蛋白的表达增强了大肠杆菌的氧化和盐胁迫抗性 | 第73-74页 |
| 4.2.3 His-drfE和GST-drfE融合蛋白表达条件的优化 | 第74-75页 |
| 4.2.4 DrfE融合蛋白可溶性分析 | 第75-77页 |
| 4.3 讨论 | 第77-79页 |
| 结论 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-98页 |
| 附录 | 第98-100页 |
| 攻读学位期间发表的与学术论文内容相关的学术论文及研究成果 | 第100页 |
