摘要 | 第5-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
引言 | 第17-26页 |
1 三疣梭子蟹概述 | 第17-18页 |
1.1 进化分类及区域分布 | 第17页 |
1.2 形态结构 | 第17页 |
1.3 生长、发育与繁殖 | 第17-18页 |
1.4 经济价值与面临问题 | 第18页 |
2 盐度与水生甲壳动物 | 第18-22页 |
2.1 盐度对水生甲壳动物的影响 | 第18-19页 |
2.2 水生甲壳动物血淋巴与环境盐度变化 | 第19-20页 |
2.3 渗透调节主要器官与部位 | 第20-21页 |
2.4 渗透压调节机制 | 第21-22页 |
3 V-ATPase和Na~+/H~+交换器 | 第22-24页 |
3.1 V-ATPase | 第22-24页 |
3.2 Na~+/H~+交换器 | 第24页 |
4 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
第一章 盐度胁迫对三疣梭子蟹血淋巴理化水平的影响 | 第26-37页 |
1 材料与方法 | 第27-28页 |
1.1 实验材料及试剂仪器 | 第27页 |
1.2 盐度胁迫实验 | 第27-28页 |
1.3 渗透压、离子含量及部分生化指标的测定 | 第28页 |
1.4 数据统计分析 | 第28页 |
2 结果 | 第28-35页 |
2.1 急性盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清渗透压的变化 | 第28-29页 |
2.2 急性盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清离子含量的变化 | 第29-32页 |
2.3 盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清葡萄糖(GLU)含量的变化 | 第32页 |
2.4 盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清甘油三脂(TG)含量的变化 | 第32-33页 |
2.5 盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清总蛋白(TP)及尿素(UREA)含量的变化 | 第33-35页 |
3 讨论 | 第35-37页 |
第二章 三疣梭子蟹Na~+/H~+-exchanger基因克隆鉴定及在盐度胁迫下的表达分析 | 第37-53页 |
1 材料与方法 | 第38-46页 |
1.1 实验材料及试剂仪器 | 第38-39页 |
1.2 盐度胁迫实验 | 第39页 |
1.3 总RNA提取 | 第39-40页 |
1.4 RACE c DNA模板合成 | 第40-41页 |
1.5 Na~+/H~+-exchanger基因c DNA全长克隆 | 第41-43页 |
1.6 PCR产物的分离纯化、回收和测序 | 第43-45页 |
1.7 序列分析 | 第45页 |
1.8 反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR) | 第45-46页 |
1.9 数据统计分析 | 第46页 |
2 结果 | 第46-51页 |
2.1 Na~+/H~+-exchanger基因c DNA全长克隆及序列分析 | 第46-49页 |
2.2 Na~+/H~+-exchanger基因的组织表达分布和不同盐度胁迫下的表达分析 | 第49-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第三章 三疣梭子蟹V-ATPase d亚基的克隆、盐度胁迫下表达分析及原核表达构建 | 第53-71页 |
1 材料与方法 | 第54-64页 |
1.1 实验材料及试剂仪器 | 第54页 |
1.2 相关试剂的配制 | 第54-57页 |
1.3 盐度胁迫实验 | 第57页 |
1.4 总RNA提取 | 第57页 |
1.5 RACE c DNA模板合成 | 第57页 |
1.6 V-ATPase d亚基基因的c DNA全长克隆 | 第57-59页 |
1.7 PCR产物的分离纯化、回收和测序 | 第59-60页 |
1.8 序列分析 | 第60页 |
1.9 反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR) | 第60-61页 |
1.10 V-ATPase d亚基的原核表达构建 | 第61-64页 |
1.11 数据统计分析 | 第64页 |
2 结果 | 第64-69页 |
2.1 V-ATPase d亚基基因c DNA全长克隆及序列分析 | 第64-66页 |
2.2 V-ATPase d亚基基因的组织表达分布和不同盐度胁迫下的表达分析 | 第66-68页 |
2.3 VHd/p ET-28a表达载体构建、检测及蛋白质谱分析 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-71页 |
第四章 三疣梭子蟹V-ATPase a亚基的克隆、表达分析及盐度胁迫对Na~+/K~+-ATPase α 亚基的表达和Na~+/K~+-ATPase与V-ATPase活性的影响 | 第71-87页 |
1 材料与方法 | 第72-76页 |
1.1 实验材料及试剂仪器 | 第72页 |
1.2 盐度胁迫实验 | 第72页 |
1.3 总RNA提取 | 第72页 |
1.4 RACE c DNA模板合成 | 第72-73页 |
1.5 V-ATPase a亚基基因的c DNA全长克隆 | 第73-75页 |
1.6 PCR产物的分离纯化、回收和测序 | 第75页 |
1.7 序列分析 | 第75页 |
1.8 反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR) | 第75-76页 |
1.9 Na~+/K~+-ATPase与V-ATPase活性测定 | 第76页 |
1.10 数据统计分析 | 第76页 |
2 结果 | 第76-84页 |
2.1 V-ATPase a亚基基因c DNA全长克隆及序列分析 | 第76-79页 |
2.2 V-ATPase a亚基基因的组织表达分布和不同盐度胁迫下的表达分析 | 第79-81页 |
2.3 Na~+/K~+-ATPase α 亚基组织表达分布及其表达分析 | 第81-82页 |
2.4 盐度胁迫对三疣梭子蟹Na~+/K~+-ATPase及V-ATPase活性的影响 | 第82-84页 |
3 讨论 | 第84-87页 |
参考文献 | 第87-94页 |
致谢 | 第94页 |