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三疣梭子蟹不同盐度下血淋巴理化指标分析及Na~+/H~+-exchanger和V-ATPase基因的克隆和功能研究

摘要第5-9页
ABSTRACT第9-13页
引言第17-26页
    1 三疣梭子蟹概述第17-18页
        1.1 进化分类及区域分布第17页
        1.2 形态结构第17页
        1.3 生长、发育与繁殖第17-18页
        1.4 经济价值与面临问题第18页
    2 盐度与水生甲壳动物第18-22页
        2.1 盐度对水生甲壳动物的影响第18-19页
        2.2 水生甲壳动物血淋巴与环境盐度变化第19-20页
        2.3 渗透调节主要器官与部位第20-21页
        2.4 渗透压调节机制第21-22页
    3 V-ATPase和Na~+/H~+交换器第22-24页
        3.1 V-ATPase第22-24页
        3.2 Na~+/H~+交换器第24页
    4 本研究的目的与意义第24-26页
第一章 盐度胁迫对三疣梭子蟹血淋巴理化水平的影响第26-37页
    1 材料与方法第27-28页
        1.1 实验材料及试剂仪器第27页
        1.2 盐度胁迫实验第27-28页
        1.3 渗透压、离子含量及部分生化指标的测定第28页
        1.4 数据统计分析第28页
    2 结果第28-35页
        2.1 急性盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清渗透压的变化第28-29页
        2.2 急性盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清离子含量的变化第29-32页
        2.3 盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清葡萄糖(GLU)含量的变化第32页
        2.4 盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清甘油三脂(TG)含量的变化第32-33页
        2.5 盐度胁迫下三疣梭子蟹“黄选1号”血清总蛋白(TP)及尿素(UREA)含量的变化第33-35页
    3 讨论第35-37页
第二章 三疣梭子蟹Na~+/H~+-exchanger基因克隆鉴定及在盐度胁迫下的表达分析第37-53页
    1 材料与方法第38-46页
        1.1 实验材料及试剂仪器第38-39页
        1.2 盐度胁迫实验第39页
        1.3 总RNA提取第39-40页
        1.4 RACE c DNA模板合成第40-41页
        1.5 Na~+/H~+-exchanger基因c DNA全长克隆第41-43页
        1.6 PCR产物的分离纯化、回收和测序第43-45页
        1.7 序列分析第45页
        1.8 反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)第45-46页
        1.9 数据统计分析第46页
    2 结果第46-51页
        2.1 Na~+/H~+-exchanger基因c DNA全长克隆及序列分析第46-49页
        2.2 Na~+/H~+-exchanger基因的组织表达分布和不同盐度胁迫下的表达分析第49-51页
    3 讨论第51-53页
第三章 三疣梭子蟹V-ATPase d亚基的克隆、盐度胁迫下表达分析及原核表达构建第53-71页
    1 材料与方法第54-64页
        1.1 实验材料及试剂仪器第54页
        1.2 相关试剂的配制第54-57页
        1.3 盐度胁迫实验第57页
        1.4 总RNA提取第57页
        1.5 RACE c DNA模板合成第57页
        1.6 V-ATPase d亚基基因的c DNA全长克隆第57-59页
        1.7 PCR产物的分离纯化、回收和测序第59-60页
        1.8 序列分析第60页
        1.9 反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)第60-61页
        1.10 V-ATPase d亚基的原核表达构建第61-64页
        1.11 数据统计分析第64页
    2 结果第64-69页
        2.1 V-ATPase d亚基基因c DNA全长克隆及序列分析第64-66页
        2.2 V-ATPase d亚基基因的组织表达分布和不同盐度胁迫下的表达分析第66-68页
        2.3 VHd/p ET-28a表达载体构建、检测及蛋白质谱分析第68-69页
    3 讨论第69-71页
第四章 三疣梭子蟹V-ATPase a亚基的克隆、表达分析及盐度胁迫对Na~+/K~+-ATPase α 亚基的表达和Na~+/K~+-ATPase与V-ATPase活性的影响第71-87页
    1 材料与方法第72-76页
        1.1 实验材料及试剂仪器第72页
        1.2 盐度胁迫实验第72页
        1.3 总RNA提取第72页
        1.4 RACE c DNA模板合成第72-73页
        1.5 V-ATPase a亚基基因的c DNA全长克隆第73-75页
        1.6 PCR产物的分离纯化、回收和测序第75页
        1.7 序列分析第75页
        1.8 反转录实时荧光定量PCR(RT-q PCR)第75-76页
        1.9 Na~+/K~+-ATPase与V-ATPase活性测定第76页
        1.10 数据统计分析第76页
    2 结果第76-84页
        2.1 V-ATPase a亚基基因c DNA全长克隆及序列分析第76-79页
        2.2 V-ATPase a亚基基因的组织表达分布和不同盐度胁迫下的表达分析第79-81页
        2.3 Na~+/K~+-ATPase α 亚基组织表达分布及其表达分析第81-82页
        2.4 盐度胁迫对三疣梭子蟹Na~+/K~+-ATPase及V-ATPase活性的影响第82-84页
    3 讨论第84-87页
参考文献第87-94页
致谢第94页

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