| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一部分 引言 | 第11-21页 |
| 1 研究背景 | 第11-18页 |
| 1.1 免疫细胞与吞噬 | 第11页 |
| 1.2 细胞趋化性研究 | 第11-13页 |
| 1.3 细胞吞噬的研究 | 第13-16页 |
| 1.4 吞噬与炎症 | 第16-18页 |
| 2 研究意义和实验设计 | 第18-21页 |
| 2.1 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 2.2 实验设计 | 第19-21页 |
| 第二部分 ELMO1对巨噬细胞系RAW264.7 的吞噬作用研究 | 第21-39页 |
| 1 实验材料 | 第21-24页 |
| 1.1 实验质粒、细菌及细胞 | 第21页 |
| 1.2 siRNA | 第21-22页 |
| 1.3 实验主要仪器 | 第22-23页 |
| 1.4 实验主要试剂耗材及配方 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.1 RAW264.7 细胞系培养 | 第24-25页 |
| 2.2 ELMO1 shRNA重组质粒的构建与鉴定 | 第25-29页 |
| 2.3 Western blot检测 | 第29页 |
| 2.4 病毒质粒的包被及鉴定 | 第29-30页 |
| 2.5 稳定转基因细胞株的筛选 | 第30-31页 |
| 2.6 吞噬实验 | 第31页 |
| 2.7 统计学分析 | 第31-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-35页 |
| 3.1 pLVX-shRNA-ELMO1i重组干扰质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2 Western Blot检测重组质粒的干扰水平 | 第33-34页 |
| 3.3 稳定转染细胞系筛选 | 第34页 |
| 3.4 ELMO1对RAW264.7 细胞吞噬能力的影响 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| 第三部分 ELMO1对原代巨噬细胞的吞噬作用研究 | 第39-53页 |
| 1 实验材料 | 第39-41页 |
| 1.1 实验细胞及实验小鼠 | 第39页 |
| 1.2 引物 | 第39页 |
| 1.3 实验主要仪器 | 第39-40页 |
| 1.4 实验主要试剂 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-45页 |
| 2.1 小鼠基因型鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2 小鼠ELMO1基因敲除后蛋白表达鉴定 | 第42页 |
| 2.3 巨噬细胞的分离、培养及纯度检测 | 第42-43页 |
| 2.4 ELISA检测炎症因子 | 第43-44页 |
| 2.5 LPS刺激巨噬细胞 | 第44页 |
| 2.6 Western Blot检测细胞内ELMO1、ELMO2、Dock2蛋白的表达 | 第44页 |
| 2.7 吞噬指数实验 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-50页 |
| 3.1 小鼠基因型鉴定结果 | 第45-46页 |
| 3.2 ELMO1敲除小鼠蛋白鉴定结果 | 第46-47页 |
| 3.3 巨噬细胞分离纯度及分化效率 | 第47-48页 |
| 3.4 LPS刺激巨噬细胞后分泌炎症因子检测 | 第48页 |
| 3.5 敲除ELMO1基因对原代巨噬细胞吞噬的影响 | 第48-50页 |
| 3.6 ELMO1对巨噬细胞内相关蛋白表达的影响 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第63-64页 |
