摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 概述 | 第10-16页 |
1.1 CRISPR-Cas系统 | 第10-12页 |
1.2 青霉素代谢 | 第12-13页 |
1.3 研究意义,研究内容和方案 | 第13-16页 |
第二章 I-B-svi型CRISPR-Cas系统及青霉素代谢相关基因的信息学分析 | 第16-22页 |
2.1 前言 | 第16页 |
2.2 材料和方法 | 第16-17页 |
2.2.1 菌株 | 第16页 |
2.2.2 信息学分析软件和网址 | 第16-17页 |
2.2.3 方法 | 第17页 |
2.3 I-B-svi型CRISPR-Cas系统 | 第17-20页 |
2.3.1 I-B-svi型CRISPR-Cas系统结构 | 第18-19页 |
2.3.2 I-B-svi型CRISPR-Cas系统蛋白特征 | 第19-20页 |
2.4 青霉素代谢相关酶基因 | 第20-21页 |
2.5 结论 | 第21-22页 |
第三章 青霉素代谢相关酶基因的编辑 | 第22-52页 |
3.1 前言 | 第22页 |
3.2 材料和方法 | 第22-40页 |
3.2.1 主要仪器,试剂及试剂配制 | 第22-24页 |
3.2.2 溶液和培养基 | 第24-25页 |
3.2.3 菌株、质粒和编辑元件 | 第25-30页 |
3.2.4 实验方法 | 第30-40页 |
3.3 结果和讨论 | 第40-51页 |
3.3.1 异青霉素N异构酶基因的插入 | 第40-43页 |
3.3.2 青霉素酰胺酶和β-内酰胺酶基因的单敲除 | 第43-50页 |
3.3.3 青霉素酰胺酶和异青霉素N异构酶以及青霉素酰胺酶和β-内酰胺酶基因的双敲除 | 第50-51页 |
3.4 结论 | 第51-52页 |
第四章 内酰胺酶相关基因的功能验证 | 第52-57页 |
4.1 前言 | 第52页 |
4.2 材料和方法 | 第52-55页 |
4.2.1 主要仪器,试剂及试剂配制 | 第52-53页 |
4.2.2 培养基 | 第53-54页 |
4.2.3 实验方法 | 第54-55页 |
4.3 结果和讨论 | 第55-56页 |
4.4 结论 | 第56-57页 |
第五章 结论与展望 | 第57-60页 |
5.1 结论 | 第57-58页 |
5.2 展望 | 第58-60页 |
附图 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
文章与专利 | 第67页 |